• 中文核心期刊
  • CSCD来源期刊
  • 中国科技核心期刊
  • CA、CABI、ZR收录期刊

留言板

尊敬的读者、作者、审稿人, 关于本刊的投稿、审稿、编辑和出版的任何问题, 您可以本页添加留言。我们将尽快给您答复。谢谢您的支持!

姓名
邮箱
手机号码
标题
留言内容
验证码

天蚕素AD和BuforinⅡ表达载体的改良和融合蛋白表达条件优化

陈泉 扈进冬 赵晓燕 李哲 李纪顺 杨合同

陈泉, 扈进冬, 赵晓燕, 李哲, 李纪顺, 杨合同. 天蚕素AD和BuforinⅡ表达载体的改良和融合蛋白表达条件优化[J]. 福建农业学报, 2013, 28(12): 1195-1199. doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2013.12.001
引用本文: 陈泉, 扈进冬, 赵晓燕, 李哲, 李纪顺, 杨合同. 天蚕素AD和BuforinⅡ表达载体的改良和融合蛋白表达条件优化[J]. 福建农业学报, 2013, 28(12): 1195-1199. doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2013.12.001
CHEN Quan, HU Jin-dong, ZHAO Xiao-yan, LI Zhe, LI Ji-shun, YANG He-tong. Improvement of Cecropin AD and Buforin Ⅱ Expression Vector and Optimization for Fusion Protein Expression Conditions[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2013, 28(12): 1195-1199. doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2013.12.001
Citation: CHEN Quan, HU Jin-dong, ZHAO Xiao-yan, LI Zhe, LI Ji-shun, YANG He-tong. Improvement of Cecropin AD and Buforin Ⅱ Expression Vector and Optimization for Fusion Protein Expression Conditions[J]. Fujian Journal of Agricultural Sciences, 2013, 28(12): 1195-1199. doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2013.12.001

天蚕素AD和BuforinⅡ表达载体的改良和融合蛋白表达条件优化

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2013.12.001
基金项目: 

济南市科技计划项目——企业自主创新计划 (201201077)

山东省科技发展计划项目 (2011GSF12107、2009GG10009012、2010GNC10974)

详细信息
    作者简介:

    陈泉 (1981-), 男, 博士, 助理研究员, 研究方向:微生物代谢;杨合同 (1966-), 男, 博士, 研究员, 研究方向:微生物与生物防治 (E-mail:yanght@sdas.org)

  • 中图分类号: Q78

Improvement of Cecropin AD and Buforin Ⅱ Expression Vector and Optimization for Fusion Protein Expression Conditions

  • 摘要: 为提高重组大肠杆菌表达天蚕素AD和BuforinⅡ融合蛋白的表达效率, 研究表达菌株、质粒稳定性和诱导条件对天蚕素AD和BuforinⅡ融合蛋白表达的影响。通过SDS-PAGE分析目的蛋白占全菌总蛋白的含量, 确定大肠杆菌BER2566为表达菌株;利用基因工程技术, 构建卡那霉素抗性的表达质粒pET (K) -Trx-CADBuforinII, 提高质粒稳定性和蛋白表达效率;优化了IPTG浓度、诱导时机和诱导时间等诱导条件, 确定菌体浓度为OD600=0.8时, IPTG浓度为0.8mmol·L-1, 诱导时间为5h, 目的蛋白表达量最高, 可达到全菌总蛋白含量的50%以上。
  • [1] GUAN-GUERRA E, SANTOS-MENDOZA T, LUGO-REYES S O, et al.Antimicrobial peptides:general overview and clinical implications in human health and disease[J].Clinical Immunology, 2010, 135 (1) :1-11.
    [2] 郭伟生, 吴哲, 郭海勇, 等.抗菌肽的基因克隆表达及其在畜牧业中的应用前景[J].吉林畜牧兽医, 2008, 29 (12) :10-12.
    [3] PAPAGIANNI M.Ribosomally synthesized peptides with antimicrobial properties:biosynthesis, structure, function, and applications[J].Biotechnology advances, 2003, 21 (6) :465-499.
    [4] HANCOCK R E.Cationic peptides:effectors in innate immunity and novel antimicrobials[J].The Lancet infectious diseases, 2001, 1 (3) :156-164.
    [5] 郑青, 苏智慧.抗菌肽AD基因的合成[J].生物化学与生物物理进展, 1998, 25 (2) :178-180.
    [6] KIM S, PARK C-B, LEE D-K, et al.A Novel Antimicrobial Peptide Isolated From Bufo Bufo Gargarizans[P].WO Patent, 1998, 007, 440.
    [7] GIACOMETTI A, CIRIONI O, GHISELLI R, et al.Potential therapeutic role of cationic peptides in three experimental models of septic shock[J].Antimicrobial agents and chemotherapy, 2002, 46 (7) :2132-2136.
    [8] GHISELLI R, GIACOMETTI A, CIRIONI O, et al.Cationic peptides combined with betalactams reduce mortality from peritonitis in experimental rat model[J].Journal of Surgical Research, 2002, 108 (1) :107-111.
    [9] 扈进冬, 魏艳丽, 张广志, 等.天蚕素AD和蛙BuforinⅡ融合蛋白在大肠杆菌中的表达[J].中国畜牧兽医, 2012, 39 (4) :35-38.
    [10] ANDREU D, UBACH J, BOMAN A, et al.Shortened cecropin A-melittin hybrids significant size reduction retains potent antibiotic activity[J].FEBS letters, 1992, 296 (2) :190-194.
    [11] LI Y.Recombinant production of antimicrobial peptides in Escherichia coli:A review[J].Protein expression and purification, 2011, 80 (2) :260-267.
    [12] 赵东红, 戴祝英, 周开亚.昆虫抗菌肽的功能, 作用机理与分子生物学研究最新进展[J].生物工程进展, 1999, 19 (5) :14-17.
    [13] 陆海荣, 李国栋, 吴宏宇, 等.抗菌肽GK1在大肠杆菌中的融合表达[J].生物工程学报, 2008, 24 (1) :21-26.
    [14] ZHOU L, ZHAO Z, LI B, et al.TrxA mediating fusion expression of antimicrobial peptide CM4from multiple joined genes in Escherichia coli[J].Protein expression and purification, 2009, 64 (2) :225-230.
    [15] 王继雯, 谢宝恩, 周伏忠, 等.抗菌肽hepcidin融合蛋白在大肠杆菌中表达条件的优化[J].生物技术通报, 2009, 10:151-155.
    [16] 阿里木热·汗古丽, 毛新芳, 刘忠渊.黄粉虫抗菌肽在大肠杆菌中表达条件优化及活性分析[J].生物工程学报, 2013, (6) :836-847.
  • 加载中
计量
  • 文章访问数:  181
  • HTML全文浏览量:  43
  • PDF下载量:  2
  • 被引次数: 0
出版历程
  • 收稿日期:  2013-10-09
  • 刊出日期:  2013-12-18

目录

    /

    返回文章
    返回