鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白的原核表达

施少华; 程龙飞; 傅光华; 陈红梅; 万春和; 傅秋玲; 林建生; 黄瑜

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2014.10.001

鸭坦布苏病毒囊膜E蛋白的原核表达

doi: 10.19303/j.issn.1008-0384.2014.10.001

施少华^1,2,
程龙飞^1,2,
傅光华^1,2,
陈红梅^1,2,
万春和^1,2,
傅秋玲^1,2,
林建生^1,2,
黄瑜^1,2

1. 福建省农业科学院畜牧兽医研究所，福建福州 350013;
2. 福建省畜禽疫病防治工程技术研究中心，福建福州 350013

基金项目:

福建省种业创新与产业化工程建设项目 (2011FJZY-9)

福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项 (2011R1025-8)

现代农业产业技术体系建设专项 (CARS-43)

详细信息

作者简介:
施少华 (1977-) , 男, 博士生, 副研究员, 主要从事兽医微生物学研究;黄瑜 (1965-) , 男, 研究员, 主要从事动物传染病研究 (E-mail:huangyu_815@163.com)

中图分类号: S858.32
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出版历程
- 收稿日期: 2014-04-10
- 刊出日期: 2014-10-18

Prokaryotic Expression of E Protein from Duck Tembusu Virus

1. Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine,Fujian Academy of Agricultural Sciences;
2. Fujian Animal Diseases Control Technology Development Center

摘要

摘要: 利用RT-PCR方法扩增鸭坦布苏病毒分离株 (WR株) 全长E蛋白基因, 克隆到pEASY-T3载体中, 经Bam HI和XhoI酶切后将目的片段连接入pET-32a载体, 构建原核表达重组质粒pET-E。表达质粒转化入感受态细胞BL21 (DE3) 后, 经IPTG诱导后表达出鸭坦布苏病毒E蛋白, 并以包涵体的形式存在, Westernblotting试验呈阳性, 表明E蛋白有很好的反应原性。
- 鸭坦布苏病毒 /
- E基因 /
- 原核表达
Abstract: The entire E gene from the duck Tembusu virus (strain WR) was amplified by RT-PCR, and cloned into the pEASY-T3 vector.The recombinant plasmids carrying the target fragment were digested with Bam HI and Xho I, and cloned into the pET-32 avector to construct recombinant plasmid to be named pET-E.pET-E was subsequently transformed into Escherichia coli BL21 (DE3) .The fusion protein was expressed by IPTG induction, and presented mainly as inclusion bodies.The positive western blotting result suggested a strong reactinogenicity of the protein.
- duck tembusu virus /
- E gene /
- prokaryotic expression

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