SRAP-marker Based Genetic Diversity of Germplasms of Cymbidium Hybrids
-
摘要: 采用SRAP技术对24份杂交兰种质资源的遗传多样性进行分析。筛选出的11对引物组合共扩增出119条谱带,其中102条为多态带,多态性比率86.1%,平均每对引物组合产生9.3个多态性位点。各种质之间的相似系数变化范围为0.43~0.98,平均为0.67。UPGMA聚类分析表明:在遗传相似系数0.69处将24份供试材料划分为5个类群,较好地揭示了杂交兰种质间的遗传多样性与亲缘关系,可为杂交兰种质资源利用、杂交育种亲本选择及杂种后代鉴定提供科学依据。Abstract: SRAP was applied for the determination of the genetic diversity of 24 hybrid cultivars of Cymbidium. Eleven polymorphic primer combinations were screened to result in 119 amplified DNA bands. Of the amplified DNA, 102 were polymorphic, at a ratio of 86.1%. The average number of polymorphic loci amplified by each primer was 9.3. The genetic similarity among the 24 germplasms ranged from 0.43 to 0.98, averaging 0.67. The UPGMA cluster analysis classified the germplasms with a similarity coefficient of 0.69 into 5 groups clearly showing the genetic diversity and relationship among the hybrids.
-
Keywords:
- Cymbidium hybrid /
- SRAP /
- genetic diversity /
- cluster analysis
-
-
表 1 杂交兰供试材料
Table 1 Cymbidium hybrids examined
序号 品种 花部等特征 1 绿翡翠C. ‘Green Jade’ 黄绿色、素心,微香 2 黄金小神童 C. Golden Elf‘Sundust’ 黄花素心,浓香 3 十八格格C. ‘Eighteen Princess’ 花瓣青黄色,唇瓣白色、有淡粉色虎斑,清香 4 韩国小姐 C.‘Miss Korea’ 花瓣桃红色具纵纹线,唇瓣带红色虎斑,淡香 5 爪艺韩国小姐 C.‘K32-1’ 花瓣桃红色具纵纹线,叶片爪艺 6 韩国桃花C.‘Korea Peach’ 花瓣铜红色具纵纹线,唇瓣黄色带暗红虎斑 7 黄金美人C.‘Golden Beauty’ 黄花素心,荷瓣,浓香 8 紫元素C.‘Purple Element’ 花瓣红褐色,彩心,清香 9 红美人C.‘Red Beauty’ 花瓣暗红色,唇瓣基部为黄色,微香 10 K33a红美人C.‘K33a’ 花瓣暗红色,唇瓣基部为黄色,微香 11 醉美人C.‘Drunk beauty’ 花瓣橘红色、基部具红色斑块,浓香 12 金玉满堂C.‘K36’ 花瓣橙红色带胭脂红斑纹,浓香 13 台北小姐 C.‘Miss Taipei’ 粉红色带紫红条纹,唇瓣具深红斑,清香 14 东方快车 C.‘Orient Express’ 米黄色带紫红条纹,唇瓣具红色斑块,清香 15 樱花 C.‘K40’ 粉红色花,荷瓣 16 K40-2樱花 C.‘K40-2’ 粉红色花,荷瓣 17 夏日香水C.‘Summer perfume’ 花瓣青黄色,唇瓣带深红斑块,浓香 18 西施 C.‘xisi’ 花瓣红色带深红色条纹 19 金龙爪C.‘K18-1’ 深黄,唇瓣具更深黄色斑,叶片爪艺, 20 立叶大凤C.‘Liyedafeng’ 金黄色素花,微香 21 黄金龙C.‘K18’ 黄色素花,微香 22 华韵丹霞C.‘Huayundanxia’ 深红色带胭脂红斑,微香 23 华韵红霞C.‘Huayunhongxia’ 鲜红色带胭脂红斑,微香 24 玉凤C.‘Yufeng’ 青黄色素花,微香,微香 表 2 SRAP 引物组合的扩增结果
Table 2 Results and polymorphism of SRAP primer combinations
引物名称 引物序列(5′-3′) 扩增
条带数多态性
带数多态性
比率/%Me2+Em9 TGAGTCCAAACCGGAGC
GACTGCGTACGAATTACG12 10 83.3 Me3+Em3 TGAGTCCAAACCGGAAT
GACTGCGTACGAATTGAC13 10 76.9 Me3+Em5 TGAGTCCAAACCGGAAT
GACTGCGTACGAATTAAC10 8 80.0 Me4+Em7 TGAGTCCAAACCGGACC
GACTGCGTACGAATTATG12 11 91.7 Me5+Em8 TGAGTCCAAACCGGAAG
GACTGCGTACGAATTCTG10 9 90.0 Me5+Em10 TGAGTCCAAACCGGAAG
GACTGCGTACGAATTTAG9 9 100.0 Me6+Em2 TGAGTCCAAACCGGTAA
GACTGCGTACGAATTTGC13 11 84.6 Me6+Em3 TGAGTCCAAACCGGTAA
GACTGCGTACGAATTGAC10 9 90.0 Me6+Em8 TGAGTCCAAACCGGTAA
GACTGCGTACGAATTCTG10 8 80.0 Me7+Em2 TGAGTCCAAACCGGTGT
GACTGCGTACGAATTAGC9 8 88.9 Me8+Em10 TGAGTCCAAACCGGTGC
GACTGCGTACGAATTTAG11 9 81.8 总数 119 102 平均数 10.8 9.3 86.1 -
[1] 朱根发. 国际兰属植物杂交育种进展[J].广东农业科学,2005,(4):25-27. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-GDNY200504005.htm [2] 陆然. 杂交兰:生产渐成规模产销优势明显[J]. 中国花卉园艺,2013,(1):23-24. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-HYZG201301009.htm [3] LI G,QUIROS C F. Sequence-related amplified polymorphism(SRAP), a newmarker system based on a simple PCR reaction:Itsapplication to mapping and gene tagging in Brassica[J]. Theor ApplGenet,2011,103(2):455-461. http://www.docin.com/p-585415537.html
[4] 钟淮钦,钟海丰,林兵,等. 中小花型蝴蝶兰种质遗传多样性的形态与SRAP分析[J]. 分子植物育种,2013,11(1):119-125. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-FZZW201301021.htm [5] 牛田,张林,王厚新,等. 利用SRAP标记分析春兰种质资源遗传多样性[J]. 农学学报,2014,4(8):53-58. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-XKKJ201408014.htm [6] 蹇黎,朱利泉. 寒兰品种类型的SRAP分子鉴定[J]. 中国农业科学, 2010,43(15):3184-3190. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZNYK201015017.htm [7] 唐源江,曹雯静,吴坤林. 基于SRAP标记的国兰种质资源遗传多样性分析及分子身份证构建[J]. 中国农业科学,2015,48(9):1795-1806. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZNYK201509013.htm [8] 蒋彧,何俊蓉,刘菲,等. 中国兰遗传多样性的SRAP分析[J]. 西南农业学报,2013,26(4):1645-1648. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-XNYX201304070.htm [9] 马红勃,赖鋆英,许旭明,等. 基于SRAP标记的大花蕙兰种质资源遗传多样性分析[J]. 植物遗传资源学报,2011,12(4):551-556. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZWYC201104012.htm [10] 周艳霞,尹俊梅,任羽,等. 文心兰种质遗传多样性的SRAP分析[J]. 热带农业科学,2009,29(7):43-46. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-RDNK200907011.htm [11] 徐进,张西西,董爱香. 部分矮牵牛品种亲缘关系的SRAP分析[J]. 园艺学报,2008,35(12):1837-1842. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YYXB200812021.htm [12] 赵秀娟,宋建文,胡开林. 苦瓜种质遗传多样性的SRAP标记分析[J]. 植物遗传资源学报,2013,14(1):78-84. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZWYC201301011.htm [13] 马二磊,王燕,刘莉,等. 松花型花椰菜主要品种鉴定的分子标记分析[J]. 植物遗传资源学报,2010,11(5):621-624. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZWYC201005018.htm [14] 徐爱遐,马朝芝,肖恩时,等. 中国西部芥菜型油菜遗传多样性研究[J]. 作物学报,2008, 34(5):754-763. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-XBZW200805007.htm [15] 昝逢刚,吴转娣,曾淇. 荔枝种质遗传多样性的SRAP分析[J]. 分子植物育种, 2009,7(3):562-568. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-FZZW200903029.htm [16] 林忠旭,张献龙,聂以春. 新型标记SRAP在棉花F2分离群体及遗传多样性评价中的适用性分析[J]. 遗传学报,2004,31(6):622-626. [17] 刘倩,戴志刚,陈基权,等. 应用SRAP分子标记构建红麻种质资源分子身份证[J]. 中国农业科学,2013,46(10):1974-1983. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZNYK201310003.htm [18] 陈瑶瑶,张燕,张琛,等. 杂交兰‘韩国桃花’×蕙兰种间杂交种子无菌萌发特征研究[J]. 园艺学报,2009,36(3):441-446. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-YYXB200903022.htm [19] 曾碧玉,常强,许传俊. 杂交兰品种‘韩国小姐’与墨兰品种‘企剑黑墨’杂交坐果及无菌播种研究[J]. 热带作物学报,2015,36(3):510-515. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-RDZX201503011.htm [20] 左利娟,李志强,郑志勇,等. 杂交兰根状茎的增殖与分化成苗技术[J]. 江苏农业科学,2015,43(6):54-55. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-JSNY201506015.htm [21] 谢利,马晓娟,郭和蓉,等. 杂交兰类原球茎增殖中芽分化的控制和快速繁殖[J]. 植物生理学报,2014,50(2):209-213. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZWSL201402014.htm [22] 孙瑶,赵福康,陈一. 肥料处理对杂交兰醉美人一年生苗生长的影响[J]. 浙江农业科学,2015,56(10):1631-1632. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-ZJNX201510036.htm [23] 王园园,尹翠翠,王广东. 高温胁迫对二倍体和四倍体杂交兰相关生理生化特征的影响[J]. 西北植物学报,2013,33(4):735-740. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-DNYX201304017.htm [24] 谢佩吾,李早文,伍爱萍,等. 17个杂交兰及3个大花蕙兰品种的染色体研究[J]. 广东农业科学,2015,(8):26-28. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-GDNY201508006.htm [25] 李永明,赵玉琪. 实用分子生物学方法手册[M]. 北京:科学出版社,2001:173-178. [26] BUDAK H, SHEARMAN R C, PARMAKSIZ I, et al. Molecular characterization of buffalograss germplasmusing sequence-related amplified polymorphism markers[J]. Theoreticaland Applied Genetics, 2004, 108(5):328-334. http://cn.bing.com/academic/profile?id=2ddaa5c92cde58d5527b4370cff33704&encoded=0&v=paper_preview&mkt=zh-cn
[27] 赵洋,杨阳,曾贞,等. SRAP标记在茶树育种上的应用前景[J]. 贵州茶叶,2007,34(2):11-13. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-CYTX200702004.htm [28] 张彤,屈淑平,崔崇士. SRAP标记在蔬菜作物遗传育种中的应用[J]. 东北农业大学学报,2009,40(1):119-122. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-DBDN200901030.htm [29] 孙佳琦,梁建国,石少川,等. SRAP标记在观赏植物遗传育种中的应用[J]. 分子植物育种,2010,8(3)577-588. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-FZZW201003035.htm [30] 蹇黎. ISSR和SRAP标记技术在兰花植物种质资源研究中的应用[J]. 北方园艺,2011,(23):191-192. http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTOTAL-BFYY201123075.htm