Content and Bioactivity of Flavonoids Extracted from Mucunae sempervirens and Extraction Process Optimization
-
摘要: 通过超声波辅助提取常春油麻藤总黄酮，在单因素试验基础上，利用响应面法优化常春油麻藤总黄酮提取工艺，并对羟基自由基清除能力和牛血清白蛋白结合效应进行评价。结果表明：当料液比1：25（g·mL-1）、甲醇体积分数60%、超声时间20 min、超声功率420 W，总黄酮含量预测值为3.64 mg·g-1，验证值为3.58 mg·g-1，与理论值的相对误差为1.64%，表明该优化方法合理可行。常春油麻藤总黄酮提取液对羟基自由基最大清除率可达85.35%；对牛血清白蛋白具有一定的荧光淬灭作用，淬灭方程为Y =-233.9ln（X）+25.665，R2=0.9906。Abstract: An ultrasonic extraction of flavonoids from Mucunae sempervirens was optimized using a single factor response surface methodology. The content, hydroxyl radical scavenging capacity and bovine serum albumin (BSA) combining ability of the resulting extract were determined for the evaluation. The results showed the optimized conditions to include a methanol volume fraction of 60% and a solid-liquid ratio of 1:25 (g·mL-1) with 420 W ultrasound applied for 20 min to reach a total extracted flavonoid content of 3.64 mg·g-1. In comparison to the verification content of 3.58 mg·g-1, the difference between the theoretical and experimental values was 1.64% indicating that a reasonable and feasible result had been reached. The hydroxyl radical scavenging rate of the extract was 85.35%, and the fluorescence quenching effect of the extract on the BSA combination test followed the exponential function of Y=-233.9 ln(X) + 25.665 (R2=0.9906).
-
常春油麻藤Mucunae sempervirens为豆科油麻藤属常绿木质左旋大藤本，蝶形花科Fabaceae植物。在我国川、贵、滇、陕、鄂、浙、湘、闽、粤、桂等地均有分布[1]。其藤茎、花和种子具有活血、通经活络之功效，常用于风湿疼痛、四肢麻木、血虚贫血、月经不调等病症，具有很好的疗效[2]。
杨申明等[3]优化常春油麻藤总黄酮的提取工艺、测定其总黄酮的DPPH·、·OH和O2-·的清除能力，结果表明：乙醇体积分数75%，料液比1:30(g·mL-1)，微波时间3.5 min，微波功率200 W，总黄酮的平均提取率为19.77%；对DPPH·、·OH和O2-·清除作用明显。张凌等[4]通过正交试验优选常春油麻藤总黄酮提取，研究表明乙醇浓度、料液比、回流时间和提取次数对提取率均有影响。宋培浪等[5]对常春油麻藤的挥发油成分进行了分析, 共鉴定出52种成分，占挥发油总成分的78.60%。
武夷山国家森林公园拥有目前世界上同纬度仅存的最典型、面积最大、保存最完整的中亚带原生性森林生态系统和世界珍稀特有野生动植物的基因库。本研究以武夷山国家森林公园内常春油麻藤为研究对象，响应面法优化超声波辅助提取总黄酮工艺，并对总黄酮的羟基自由基清除能力和与牛血清白蛋白的淬灭作用进行评价，以期为闽常春油麻藤的资源开发利用奠定基础。
1. 材料与方法
1.1 试验材料
原料：油麻藤，采自福建省武夷山国家森林公园，经过张传海教授鉴定为：油麻藤属Mucunae sempervirens Hemsl，隶属于豆科Fabacaee蝶形花亚科Papilionoidaee，由Michel Adanson建于1763年，其模式种为原产于南美的Mucuanuerns(L.) Dc.[6]。
试剂：吖啶红、硫酸亚铁、十二烷基苯磺酸钠溶液、浓硫酸(98.2%)、过氧化氢(30%)、浓盐酸(37.5%)、无水甲醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、维生素C、罗丹明B，以上试剂均为分析纯，购置于国药集团化学试剂有限公司；生化试剂：三羟甲基氨基甲烷、芦丁对照品购自国药集团化学试剂有限公司；牛血清白蛋白，购自上海展云化工有限公司；水为二次蒸馏水。
溶液配制：配制9.6×10-5 mol·L-1罗丹明B、8×10-4 mol·L-1 FeSO4、1.0×10-2 mol·L-1十二烷基苯磺酸钠、2.4×10-5 mol·L-1吖啶红、0.8 mol·L-1 H2SO4、0.3%H2O2、2×10-5 mol·L-1的牛血清白蛋白(BSA)，pH7.40 Tris-HCl缓冲液(含0.3 mol·L-1 NaCl)各100 mL，于4℃冰箱保存。
仪器：超声波清洗机[S10H型致微(厦门)仪器有限公司]，紫外可见分光光度计(UV2550型日本岛津公司)，荧光分光光度计(F-4500型日本日立公司)，电子天平(BS224SS型北京赛多利斯仪器系统有限公司)，旋转蒸发仪[RV型10艾卡(广州)仪器设备有限公司]。
1.2 试验方法
1.2.1 常春油麻藤总黄酮含量的测定
(1) 标准曲线的绘制:分别移取0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 mL芦丁标准母液(质量浓度为320 μg·mL-1)于25 mL具塞比色管中，参考杜庆鑫等[7]的方法，采用亚硝酸钠-硝酸铝比色法在Aλ=510nm处测定吸光度，绘制标准曲线。
(2) 常春油麻藤总黄酮的含量测定：称取常春油麻藤粉末0.500 0 g，按照一定的料液比、提取时间、功率、体积分数进行超声波提取；减压抽滤、浓缩，定容至25 mL；移取4.00 mL提取液于25 mL比色管中，测定其吸光值A。按下式计算常春油麻藤总黄酮含量：
总黄酮含量(mg·g-1) =(C·N·V)/M
式中，C为提取液的总黄酮质量浓度(mg·mL-1)；N为稀释倍数；V为提取液体积(mL)；M为常春油麻藤粉末质量(g)。
(3) 单因素试验：以常春油麻藤提取液的总黄酮含量为指标，分别对超声提取功率(240、300、360、420、480 W)，甲醇体积分数(40%、50%、60%、70%、80%)，超声作用时间(10、15、20、25、30 min)，料液比(g·mL-1，1:15、1:20、1:25、1:30、1:35)等有关因素进行考察和分析，确定适宜的水平，每组试验重复3次，取平均值。
(4) 响应面法试验：利用Box-Behnken中心组合试验设计原理设计试验。以常春油麻藤中黄酮类化合物的含量为指标，设计以提取功率(A)、提取时间(B)、甲醇体积分数(C)、料液比(D)为自变量，进行提取工艺条件优化。试验设计编排组合见表 1，Box-Behnken试验因子及编码值见表 2。
表 1 Box-Behnken试验设计Table 1. Box-Behnken experimental design and levels of variables编码值 A超声功率/W B超声时间/min C甲醇体积分数/% D液料比/(mL·g-1) 1 480 40 70 1:40 0 420 30 60 1:30 -1 360 20 50 1:20 表 2 Box-Behnken试验设计及数据结果Table 2. Experimental results of Box-Behnken design matrixA提取功率/W B提取时间/min C甲醇体积分数/% D液料比/(g·mL-1) 总黄酮含量/(mg·g-1) 1(480) 1(25) 0(60) 0(25:1) 3.33 0(420) 0(20) 1(70) 1(30:1) 3.19 -1(360) 1(25) 0(60) 0(25:1) 3.31 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.68 0(420) 0(20) 1(70) -1(20:1) 3.52 0(420) -1(15) 1(70) 0(25:1) 3.61 0(420) 0(20) -1(50) 1(30:1) 3.57 0(420) -1(15) 0(60) 1(30:1) 3.35 0(420) 1(25) 1(70) 0(25:1) 3.26 1(480) 0(20) 1(70) 0(25:1) 3.66 0(420) 1(25) -1(50) 0(25:1) 3.47 0(420) -1(15) -1(50) -1(20:1) 3.62 0(420) 0(20) -1(50) -1(20:1) 3.66 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.55 1(480) 0(20) 0(60) -1(20:1) 3.41 -1(360) 0(20) 0(60) -1(20:1) 3.23 -1(360) -1(15) 0(60) 0(25:1) 3.48 0(420) 1(25) 0(60) -1(20:1) 3.55 -1(360) 0(20) -1(50) 0(25:1) 3.45 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.88 0(420) -1(15) 0(60) -1(20:1) 3.22 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.39 0(420) 1(25) 0(60) 1(30:1) 3.35 -1(360) 0(20) 0(60) 1(30:1) 3.30 -1(360) 0(20) 1(70) 0(25:1) 3.32 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.60 1(480) -1(15) 0(60) 0(25:1) 3.42 1(480) 0(20) 0(60) 1(30:1) 3.67 1(480) 0(20) -1(50) 0(25:1) 3.43 1.2.2 ·OH的清除率测定
采用张晓鹤等[8]的方法，移取吖啶红溶液、罗丹明B溶液、硫酸亚铁溶液、十二烷基苯磺酸钠溶液、硫酸溶液各1.00 mL于25 mL容量瓶，取另一支容量瓶多加入1.00 mLH2O2溶液，定容25 mL后，反应30 min，测定其荧光值。仪器工作条件：光电管负高压V=700 V，起始Em和Ex=200 nm，终止Em和Ex=700 nm，狭缝Em和Ex=5 nm，扫描速度为1 200 nm·min-1。按下面公式计算黄酮类对羟基自由基的清除率：
·OH清除率/% =[(A3-A2)/ (A1-A2)]×100
式中，A1为未加Fenton试剂和常春油麻藤提取液的荧光值，A2为只加Fenton试剂的荧光值，A3为加入Fenton试剂和常春油麻藤提取液的荧光值。
1.2.3 BSA荧光淬灭作用测定
参照张传海等[9]的方法进行。准确移取牛血清白蛋白(BSA)溶液和Tris-HCl溶液各1.00 mL于25 mL容量瓶中，再各自加入0.10~1.00 mL的芦丁试液、常春油麻藤提取液，定容至25 mL，25℃恒温静置5 min后，测定其荧光值。仪器工作条件与1.2.2一致。
2. 结果与分析
2.1 常春油麻藤总黄酮含量分析
2.1.1 芦丁标准曲线
依照2.2.1所描述的步骤方法测定芦丁的吸光度，得到芦丁吸光度Y与芦丁质量浓度X的回归方程为：Y=0.0131X+0.0075，R2=0.9992(图 1)。
2.1.2 单因素试验结果
讨论超声提取功率(240、300、360、420、480 W)，甲醇体积分数(40%、50%、60%、70%、80%)，超声作用时间(10、15、20、25、30 min)，料液比(g·mL-1)(1:15、1:20、1:25、1:30、1:35)等有关因素进行考察和分析常春油麻藤中总黄酮含量的工艺条件。试验结果如图 2所示。从图 2可知，超声功率为420 W，总黄酮含量最高，达3.44 mg·g-1，而后呈现下降，因此最佳超声提取功率为420 W；甲醇体积分数为60%，测得总黄酮含量达到峰值3.26 mg·g-1，随后下降，因此最佳甲醇体积分数为60%；超声提取时间为20 min，总黄酮含量达到最大值3.53 mg·g-1，超声提取时间以20 min为优；料液比达到1:25，总黄酮含量达到最大值3.38 mg·g-1，选择料液1:25为佳。
2.1.3 响应面试验结果及分析
对得到的结果进行响应面分析，建立出多元二次响应面回归模型：
Y=3.61+0.047A-0.067B-0.063C+0.057D+0.020AB+0.065AC+0.0005AD-0.050BC-0.045BD+0.025CD-0.11A2-0.1B2-0.037C2-0.15D2
由表 3可见，整体模型的“P rob>F”值小于0.01，表明该二次方程模型高度显著。回归方程失拟检验P>0.05，差异不显著。说明未知因数对试验结果干扰很小。回归方程对试验拟合情况较好，试验误差小，较好地反映了常春油麻藤中黄酮类化合物提取率与甲醇体积分数、料液比、超声功率和超声时间的关系，因此所得的回归方程能较好地预测常春油麻藤总黄酮类化合物提取率随各参数的变化规律，试验中各种因素对总黄酮提取率的相互作用如图 3所示。
表 3 二次多项模型方差分析结果、回归方程系数显著性检验结果Table 3. Variance analysis on fitted quadratic polynomial model and regression coefficients and their significance on quadratic model系数项 平方和 自由度 均方 F值 P值 显著性 模型 0.44 14 0.031 3.88 0.0081 ** A提取功率 0.026 1 0.026 3.26 0.0927 - B提取时间 0.053 1 0.053 6.64 0.0219 * C甲醇体积分数 0.048 1 0.048 6.00 0.0281 * D料液比 0.039 1 0.039 4.80 0.0459 * AB 1.600E-003 1 1.600E-003 0.20 0.6621 - AC 0.017 1 0.017 2.11 0.1688 - AD 1.000E-004 1 1.000E-004 0.012 0.9127 - BC 0.010 1 0.010 1.25 0.2832 - BD 8.100E-003 1 8.100E-003 1.01 0.3322 - CD 2.500E-003 1 2.500E-003 0.31 0.5856 - A2 0.086 1 0.086 10.66 0.0056 ** B2 0.068 1 0.068 8.46 0.0114 * C2 9.041E-003 1 9.041E-003 1.13 0.3065 - D2 0.16 1 0.16 19.37 0.0006 ** 残差 0.11 14 8.027E-003 - - - 失拟项 0.095 10 9.530E-003 2.23 0.2282 - 纯误差 0.017 4 4.270E-003 - - - 总差 0.55 28 - - - - 注:*为差异显著(P < 0.05)，**为差异极显著(P < 0.01)，-为差异不显著(P>0.05)。 ![]()
图 3 不同试验因素对总黄酮提取相互作用的响应面Figure 3. Response surface map of various factors on flavonoid extraction2.1.4 验证试验
优化结果表明：最佳提取工艺条件为提取功率420 W，提取时间30 min，甲醇体积分数60%，料液比1:25(g·mL-1)。采用最佳提取工艺条件进行6次验证平行试验，总黄酮提取率为3.53%，与预测值(3.58%)的偏差为1.35%，实际值与预测值较为接近，表明本响应面优化设计合理可行，该回归方程能反应各因素与总黄酮提取率的影响(表 4)。
表 4 提取工艺重现性Table 4. Reproducibility of extraction technology序号 1 2 3 4 5 6 吸光度(A) 0.368 0.385 0.389 0.389 0.360 0.368 含量/(mg·g-1) 3.62 3.61 3.45 3.52 3.37 3.62 平均值/(mg·g-1) 3.53 预测值/(mg·g-1) 3.58 2.2 ·OH的清除能力
2.2.1 最佳激发和发射波长的确定
对空白试样、VC和芦丁进行3D扫描，判定对·OH清除的最优Em和Ex，结果表明：·OH清除的最优Em=561 nm和Ex=575 nm(图 4)。
![]()
图 4 空白试样(A)、VC (B)和芦丁(C)的3D扫描Figure 4. 3D scans of blank sample (A), VC(B)and rutin (C)2.2.2 常春油麻藤总黄酮、芦丁、Vc对·OH清除作用的比较
在体系中分别加入0.50、1.00、1.50、2.00、2.50 mL的芦丁标准溶液、常春油麻藤提取液、VC标准溶液，进行清除·OH能力分析比较。试验结果表明：常春油麻藤总黄酮提取液随着样品加入量的增多，对·OH的清除率增加明显，当加入量达到2.00 mL后，对·OH清除率达到85.35%(图 5)。
![]()
图 5 黄酮提取液与芦丁、Vc对·OH清除能力的比较Figure 5. Hydroxyl radical scavenging capacity of flavonoid extract, rutin and VC2.3 常春油麻藤总黄酮与牛血清白蛋白(BSA)的淬灭作用
2.3.1 激发波长与发射波长的确定
对芦丁、Vc和空白试样进行3D扫描，判断BSA淬灭Em和Ex的最佳值，结果表明：淬灭的最佳Em=280 nm和Ex=347 nm(图 6)。
![]()
图 6 BSA淬灭实验的空白试样(D)、芦丁(E)和Vc (F)的3D扫描Figure 6. 3D scans of blank sample (D), rutin (E) and VC (F) in BSA test2.3.2 常春油麻藤总黄酮提取液、芦丁对BSA的淬灭作用比较
在试验体系中分别加入0.10~1.00 mL芦丁标准溶液、常春油麻藤总黄酮提取液，分别考察与BSA的淬灭作用(图 7)。
![]()
图 7 总黄酮提取液(G)和芦丁(H)与BSA淬灭作用Figure 7. Quenching effects of flavonoid extract (G) and rutin (H) in BSA combination test由图 7可知，随着芦丁和常春油麻藤总黄酮提取液加入量的增加，荧光强度呈递减，表明：常春油麻藤总黄酮提取液和芦丁对BSA有一定的荧光淬灭作用。芦丁与BSA相互作用的指数方程为Y = -1050ln(X) + 395.89，R2= 0.9974；常春油麻藤总黄酮与BSA结合作用的指数方程为Y = -233.9ln(X) + 25.665，R2= 0.9906。
3. 讨论与结论
利用Box-Behnken实验设计和响应面分析法，优化了油麻藤总黄酮超声波辅助提取工艺条件。通过单因素试验表明：在超声功率为420 W时，总黄酮含量最高值3.44 mg·g-1，而后呈现下降。李增富等[10]通过金线莲总黄酮工艺试验认为这可能是由于超声波功率过大不利于黄酮类化合物母核活性的保护，产品中黄酮类化合物得率和含量低。张海容等[11]研究表明，当甲醇体积分数为60%时，测得总黄酮含量达到最大值3.26 mg·g-1，随后黄酮含量下降，这可能与黄酮提取时和提取溶剂的极性有关。王壹等[12]研究表明，当超声提取时间为20 min时，总黄酮含量达到最大值3.53 mg·g-1，但继续延长超声波作用时间，提取率却出现急剧下降的现象。其原因是超声波的长时间作用，破坏了细胞内壁，致使其他物质浸提出来，反而降低了总黄酮的含量。曾俊美等[13]研究表明，当料液比达到1:25，总黄酮含量达到最大值3.38 mg·g-1，随后黄酮含量下降。这是可能因为溶剂用量过大，过多的溶剂会对微波、超声波产生一定的吸收，也可能是因为溶剂体积过大时传质过程受到影响。
羟基自由基能造成遗传分子的损伤，经济有效的天然黄酮类抗氧化剂是防治上述疾病的重要途径[14]。张爱梅等[15]在稀硫酸介质中，利用吖啶红与Fenton反应产生的羟自由基反应后，产生荧光淬灭，采用葡萄皮水提取物、硫脲对羟自由基的清除作用，使吖啶红荧光强度减弱，据此建立测定抗氧化能力新方法。本研究也采用该法，试验结果表明：·OH的最佳Em=561 nm和Ex=575 nm，当提取液加入量达到2.00 mL后，对·OH清除率达到85.35%。
研究药物与白蛋白质的结合作用对药物在体内的迁移和分布有重要意义，研究黄酮与白蛋白质在不同条件下的结合情况，对于解释黄酮类在体内的迁移和分布有一定的参考价值[16]。表儿茶素对蛋白质硝基化反应有很强的抑制作用，黄酮类天然化合物能很好地抑制由NO2-引起的硝化损伤体内蛋白质[17]。本研究通过与BSA淬灭试验表明：在Em=280 nm和Ex=347 nm时，长春油麻藤总黄酮提取液与BSA之间产生了荧光淬灭反应，呈现规律性递减，其淬灭方程为Y= -233.9ln(X) + 25.665，R2= 0.9906。
-
![]()
图 3 不同试验因素对总黄酮提取相互作用的响应面
Figure 3. Response surface map of various factors on flavonoid extraction
![]()
图 4 空白试样(A)、VC (B)和芦丁(C)的3D扫描
Figure 4. 3D scans of blank sample (A), VC(B)and rutin (C)
![]()
图 5 黄酮提取液与芦丁、Vc对·OH清除能力的比较
Figure 5. Hydroxyl radical scavenging capacity of flavonoid extract, rutin and VC
![]()
图 6 BSA淬灭实验的空白试样(D)、芦丁(E)和Vc (F)的3D扫描
Figure 6. 3D scans of blank sample (D), rutin (E) and VC (F) in BSA test
![]()
图 7 总黄酮提取液(G)和芦丁(H)与BSA淬灭作用
Figure 7. Quenching effects of flavonoid extract (G) and rutin (H) in BSA combination test
表 1 Box-Behnken试验设计
Table 1 Box-Behnken experimental design and levels of variables
编码值 A超声功率/W B超声时间/min C甲醇体积分数/% D液料比/(mL·g-1) 1 480 40 70 1:40 0 420 30 60 1:30 -1 360 20 50 1:20 
下载: 导出CSV
表 2 Box-Behnken试验设计及数据结果
Table 2 Experimental results of Box-Behnken design matrix
A提取功率/W B提取时间/min C甲醇体积分数/% D液料比/(g·mL-1) 总黄酮含量/(mg·g-1) 1(480) 1(25) 0(60) 0(25:1) 3.33 0(420) 0(20) 1(70) 1(30:1) 3.19 -1(360) 1(25) 0(60) 0(25:1) 3.31 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.68 0(420) 0(20) 1(70) -1(20:1) 3.52 0(420) -1(15) 1(70) 0(25:1) 3.61 0(420) 0(20) -1(50) 1(30:1) 3.57 0(420) -1(15) 0(60) 1(30:1) 3.35 0(420) 1(25) 1(70) 0(25:1) 3.26 1(480) 0(20) 1(70) 0(25:1) 3.66 0(420) 1(25) -1(50) 0(25:1) 3.47 0(420) -1(15) -1(50) -1(20:1) 3.62 0(420) 0(20) -1(50) -1(20:1) 3.66 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.55 1(480) 0(20) 0(60) -1(20:1) 3.41 -1(360) 0(20) 0(60) -1(20:1) 3.23 -1(360) -1(15) 0(60) 0(25:1) 3.48 0(420) 1(25) 0(60) -1(20:1) 3.55 -1(360) 0(20) -1(50) 0(25:1) 3.45 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.88 0(420) -1(15) 0(60) -1(20:1) 3.22 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.39 0(420) 1(25) 0(60) 1(30:1) 3.35 -1(360) 0(20) 0(60) 1(30:1) 3.30 -1(360) 0(20) 1(70) 0(25:1) 3.32 0(420) 0(20) 0(60) 0(25:1) 3.60 1(480) -1(15) 0(60) 0(25:1) 3.42 1(480) 0(20) 0(60) 1(30:1) 3.67 1(480) 0(20) -1(50) 0(25:1) 3.43
下载: 导出CSV
表 3 二次多项模型方差分析结果、回归方程系数显著性检验结果
Table 3 Variance analysis on fitted quadratic polynomial model and regression coefficients and their significance on quadratic model
系数项 平方和 自由度 均方 F值 P值 显著性 模型 0.44 14 0.031 3.88 0.0081 ** A提取功率 0.026 1 0.026 3.26 0.0927 - B提取时间 0.053 1 0.053 6.64 0.0219 * C甲醇体积分数 0.048 1 0.048 6.00 0.0281 * D料液比 0.039 1 0.039 4.80 0.0459 * AB 1.600E-003 1 1.600E-003 0.20 0.6621 - AC 0.017 1 0.017 2.11 0.1688 - AD 1.000E-004 1 1.000E-004 0.012 0.9127 - BC 0.010 1 0.010 1.25 0.2832 - BD 8.100E-003 1 8.100E-003 1.01 0.3322 - CD 2.500E-003 1 2.500E-003 0.31 0.5856 - A2 0.086 1 0.086 10.66 0.0056 ** B2 0.068 1 0.068 8.46 0.0114 * C2 9.041E-003 1 9.041E-003 1.13 0.3065 - D2 0.16 1 0.16 19.37 0.0006 ** 残差 0.11 14 8.027E-003 - - - 失拟项 0.095 10 9.530E-003 2.23 0.2282 - 纯误差 0.017 4 4.270E-003 - - - 总差 0.55 28 - - - - 注:*为差异显著(P < 0.05)，**为差异极显著(P < 0.01)，-为差异不显著(P>0.05)。
下载: 导出CSV
表 4 提取工艺重现性
Table 4 Reproducibility of extraction technology
序号 1 2 3 4 5 6 吸光度(A) 0.368 0.385 0.389 0.389 0.360 0.368 含量/(mg·g-1) 3.62 3.61 3.45 3.52 3.37 3.62 平均值/(mg·g-1) 3.53 预测值/(mg·g-1) 3.58
下载: 导出CSV
-
[1] 云南省药物研究所.云南天然药物图鉴:第2卷[M].昆明:云南科学技术出版社, 2007:402. [2] 芦夕芹, 彭志金.常春油麻藤的开发利用[J].中国林副特产, 2007, 6(4):85-86. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zglftc200702040 [3] 杨申明, 杨红卫, 王振吉, 等.微波辅助提取常春油麻藤花总黄酮工艺及其抗氧化性[J].江苏农业科学, 2016, 44(8):366-369. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/jsnykx201608106 [4] 张凌, 刘亚丽, 饶志军, 等.正交实验优选常春油麻藤总黄酮提取工艺的研究[J].时珍国医国药, 2008, 19(4):796-798. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/szgygy200804010 [5] 宋培浪, 程力, 何先贵, 等.固相微萃取-气相色谱-质谱法分析常春油麻藤花挥发油成分[J].理化检验(化学分册), 2010, 46(4):354-356. http://www.wanfangdata.com.cn/details/detail.do?_type=perio&id=QK201001082762 [6] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志第41卷[M].北京:科学出版社, 1995. [7] 杜庆鑫, 魏艳秀, 刘攀, 等.分光光度法测定杜仲雄花和叶中的总黄酮[J].中南林业科技大学学报, 2017, 37(5):96-100. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/znlxyxb201705017 [8] 张晓鹤, 谢红, 张泗达, 等.吖啶红-罗丹明B体系光度法测定马蹄皮提取物清除羟自由基作用[J].化学工程师, 2012, (11):15-18. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/hxgcs201211006 [9] 张传海, 林志銮, 李宝银, 等.闽北林下种植多花黄精的总黄酮含量分析及其生物活性评价[J].天然产物研究与开发, 2018, 30(2):225-231. [10] 李增富, 张君诚, 张杭颖, 等.超声波辅助溶剂法提取金线莲总黄酮工艺优化[J].中国农学通报, 2017, 33(33):148-158. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zgnxtb201733023 [11] 张海容, 史振华.响应面法优化超声波辅助提取沙棘籽粕中黄酮工艺[J].中国油脂, 2017, 42(3):117-121. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zgyz201703025 [12] 王壹, 范婷婷, 周婵媛, 等.超声波辅助提取葛根总黄酮工艺的优化[J].贵州农业科学, 2018, 46(3):103-106. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/gznykx201803023 [13] 曾俊美, 郑启翔, 刘杰凤, 等.响应面法优化超声波-微波协同提取龙眼壳总黄酮[J].食品工业科技, 2018, 39(9):154-158. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/spgykj201809027 [14] PUPPEL K, KAPUSTAA, KUCZYHSKA B.The etiology of oxidative stress in the various species of animals:a review[J].Journal of the Science of Food and Agriculture, 2015, 95(11):2179-2184. DOI: 10.1002/jsfa.2015.95.issue-11
[15] 张爱梅, 臧运波.吖啶红荧光法检测Fenton反应产生的羟自由基[J].理化检验(化学分册), 2006, 42(6):469-470. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/lhjy-hx200606020 [16] 郭新颖, 杨清华, 史玉坤.简便荧光法测定不同品种葡萄皮的抗氧化活性[J].中国食品添加剂, 2017, 39(10):157-160. http://d.old.wanfangdata.com.cn/Periodical/zgsptjj201710021 [17] WIPPEL R, REHN M A, GORREN C F.Interference of the polyphenol epicatechin with the biological chemistry of nitric oxide and peroxynitrite mediated reactions[J].Biochem Pharm, 2004, 67(7):1285-1295. DOI: 10.1016/j.bcp.2003.11.017
-
期刊类型引用(2)
1. 杨期和，牟利辉，肖建华. 油麻藤生态生物学特性及其资源利用的研究进展. 中国野生植物资源. 2024(05): 95-101 . 
百度学术
2. 邓莹，刘杰，李海洋，陈莎，刘继雄，李明霞，龙昭军，李小丹. 牛马藤多糖的提取工艺优化及抗氧化活性研究. 广州化工. 2024(11): 28-32 . 百度学术
其他类型引用(0)
计量
- 文章访问数: 1215
- HTML全文浏览量: 169
- PDF下载量: 14
- 被引次数: 2
