利用芥菜转录组信息挖掘SSR标记及用于种质分析

李永平; 张双照; 薛珠政; 温庆放

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2020.02.007

利用芥菜转录组信息挖掘SSR标记及用于种质分析

李永平^{1, 2,},
张双照³,
薛珠政^{1, 2, ,},
温庆放^{1, 2}

1.
福建省农业科学院蔬菜研究中心，福州　350013
2.
福建省农业科学院作物研究所，福州　350013
3.
龙岩市农业科学研究所，龙岩　36400

基金项目: 国家特色蔬菜产业技术体系项目（CARS-24-G-07）；福建省科技厅农业引导性（重点）项目（2017N0048）；福建省农业科学院10、福建省财政专项－福建省农业科学院科技创新团队建设项目蔬菜科技创新团队项目（STIT2017-1-2）

详细信息

作者简介:
李永平（1974−），女，硕士，副研究员，研究方向：蔬菜分子育种（E-mail：248937256@qq.com）

通讯作者:
薛珠政（1971−），男，研究员，研究方向：蔬菜育种（E-mail：369654817@qq.com）

中图分类号: S 649
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出版历程
- 收稿日期: 2019-10-22
- 修回日期: 2019-12-18
- 刊出日期: 2020-01-31

Using SSR Markers from Brassica juncea Transcriptome for Germplasm Analysis

LI Yong-ping^{1, 2,},
ZHANG Shuang-zhao³,
XUE Zhu-zheng^{1, 2, ,},
WEN Qing-fan^{1, 2}

1.
Vegetable Research Center, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou, Fujian　350013, China
2.
Crops Research Institute, Fujian Academy of Agricultural Sciences, Fuzhou, Fujian　350013, China
3.
Longyan Agricultural Science Institute, Longyan, Fujian　36400, China

摘要

摘要:
目的为开发高效的芥菜Brassicajuncea.分子标记。
方法本研究通过对芥菜转录组测序的信息搜索SSR位点并分析其分布特点，应用Primer 3.0软件设计SSR引物，随机选择 50 对引物扩增44 份芥菜种质，检测其多态性。
结果芥菜转录组测序共获得55 636条unigene，全部序列有48 193 376 bp；有7 834条unigene包含SSR的序列，从中鉴定出9 526个SSR位点，其中有1 371条序列包含1个以上SSR，复合SSR有572个，SSR发生频率为14.08%。优势重复基序为三核苷酸和二核苷酸，分别占总SSR的51.12%和41.91%。二核苷酸重复基元中以AG/CT为优势重复基元，占总位点的34.74%，三核苷酸重复基元以AAG/CTT为主，占总位点的18.30%。共设计出21 282对SSR引物，随机选择 50 对引物进行 PCR 扩增，其中41对扩增出清晰可重复的预期条带，17对（占34%）在 44 份芥菜种质中表现出多态性。应用UPGMA得到将44份供试材料分为4大类聚类图，可准确地体现了芥菜种质材料的关系。
结论根据芥菜转录组数据能开发出类型丰富、效率较高的SSR标记，为芥菜亲缘关系分析和遗传图谱构建等提供更可靠的标记。
- 芥菜 /
- 转录组 /
- SSR /
- 多态性
Abstract:
Objective To search for applicable molecular markers for studying Brassica juncea.
Method SSR sites were searched from transcriptional sequencing of B. juncea. Potential primers were designed using Primer 3.0, and polymorphisms of 44 B. juncea germplasms detected from randomly selected 50 pairs of primers for the investigation.
Result Totally, 55,636 unigenes were obtained from the transcriptome sequencing. The entire sequence was 48,193,376bp with 9,526 SSR loci identified from 7,834 unigenes at a rate of 14.08%. Of the loci, 1,371 contained more than one SSR locus and 572 compound loci. Of the major repeat types, 51.12% were trinucleotide dominated by AGA/TCT (18.30%), and 41.91% dinucleotide dominated by AG/CT (34.74%). Using Primer 3.0, from 21,282 pairs of SSR primers, 50 were randomly selected for the PCR amplification. Out of 44 amplifications, 41 showed clear and reproducible bands, and 17 with polymorphisms. The 44 germplasms were classified into 4 distinctive groups by UPGMA.
Conclusion The SSR markers with high frequency and polymorphism could be acquired from the transcriptome to be used for the genetic diversity analysis and mapping construction on B. juncea.
- Brassica juncea /
- transcriptome /
- simple sequence repeat /
- polymorphism

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0.   引言

【研究意义】植物种质资源的收集与保存是植物研究重要内容，其中超低温保存作为植物组织和细胞长期保存的理想方法，尤其适合营养繁殖作物的茎尖或分生组织的保存，具有直接再生完整小植株、减少遗传变异等优点^[1]。海棠是蔷薇科（Rosaceae）苹果属（Malus）中果径较小（≤5 cm）的落叶乔木或小乔木，其中观赏海棠（Malus sp.）观赏价值高，是重要的优质绿化树种，研究海棠茎尖超低温保存在生产上具有重要意义。【前人研究进展】超低温保存后较高的存活率和再生率是主要的技术目标，已有研究显示，玻璃化超低温保存中活性氧（Reactive oxygen species, ROS）诱导的氧化应激是引起植物材料冻存后存活率下降的原因之一，因此，可以采用外源抗氧化剂来保护机体在超低温保存中免受伤害，如过氧化氢酶（Catalase, CAT）^[2]、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase, SOD）^[3]等酶类抗氧化剂以及抗坏血酸（Ascorbic acid, AsA）^[4]和谷胱甘肽（Glutathione, GSH）^[5]等非酶类抗氧化剂，均可以有效降低ROS生成量，减少氧化应激的发生，显著改善超低温保存效果。此外，细胞程序性死亡（Programmed cell death, PCD）作为一种基因编码主动性的死亡方式，在植物超低温保存中也扮演了重要的角色，添加细胞凋亡抑制剂D-CHO^[6]、NO供体（Sodium Nitroprusside, SNP）^[7]和乙烯（乙烯利Ethephon, Eth）^[8] 等抑制PCD发生的物质可以提高存活率。【本研究切入点】目前除了对苹果属一些种类有少量超低温保存^[9-12]，特别是涉及观赏海棠的超低温保存研究极少，而极具观赏价值的北美海棠品种之一——红丽海棠（Malus Red Splendor）超低温保存鲜见报道。【拟解决的关键问题】本文以红丽海棠茎尖为试材，研究其超低温保存技术程序，探讨添加不同含量的抗氧化剂及PCD抑制剂对茎尖超低温保存冻后存活率的影响，建立红丽海棠玻璃化超低温保存技术程序，为观赏海棠种质资源保存提供一种技术思路，并为抗氧化剂和PCD抑制剂在超低温保存中的应用提供参考。

1.   材料与方法

1.1   试验材料

供试材料为观赏海棠品种红丽，以健康且带有饱满腋芽的当年生枝条为外植体（采自国家植物园海棠栒子园），在1/2MS+1.5 mg·L⁻¹ 6BA+0.1 mg·L⁻¹ IAA的培养基中诱导无菌苗，并于1/2MS+1.0 mg·L⁻¹ 6-BA+0.5 mg·L⁻¹ IAA的培养基中进行继代培养，诱导和继代培养条件：（23±3）℃，光照强度40 μmol·m⁻²·s⁻¹，光照时间14 h·d⁻¹，取生长旺盛的组培苗用于超低温保存试验。

1.2   试验方法

1.2.1   茎尖玻璃化法超低温保存

根据初步预试验设置玻璃化超低温保存的基本程序，再采用“逐步单因子法”对关键环节进行优化。（1）预培养：将红丽组培苗切成5 mm左右的带顶芽茎段，分别接种在不同蔗糖浓度（0.1、0.3、0.5、0.7、0.9 mol·L⁻¹）的MS培养基中4 ℃下培养2 d，然后继续下述程序：（2）装载（Loading）：在双目解剖镜下，用镊子和手术刀切下带3～4片叶原基、大小为1.5～2.0 mm的茎尖；将切下的茎尖放入1.5 mL 装有1 mL MS溶液的离心管中，吸出离心管中的MS溶液，加入1 mL Loading溶液（2 mol·L⁻¹丙三醇+0.4 mol·L⁻¹蔗糖，蒸馏水配置，pH 5.8），在室温下静置处理30 min；（3）PVS2处理：吸出离心管中的Loading溶液，加入1mL PVS2溶液[30%（m/V）丙三醇+15 %（m/V）乙二醇+15%（m/V）二甲基亚砜+0.4 mol·L⁻¹蔗糖，1/2MS盐溶液配置，pH 5.8]，在0 ℃于冰浴中处理90 min；（4）液氮冻存：更换新的1 mL PVS2溶液后，封紧离心管口，立即投入液氮，冻存1 h；（5）化冻：将装有PVS2和茎尖的离心管从液氮中取出，迅速放入38 ℃水浴中化冻1 min；（6）去装载（Unloading）：将离心管中的PVS2溶液吸出，加入Unloading溶液（用1/2MS盐溶液配置的1.2 mol·L⁻¹蔗糖，pH 5.8）后在室温下震荡洗涤2次，每次10 min。然后用于存活率或恢复生长率测定。相关步骤示意图见图1。

图 1 茎尖玻璃化超低温保存及存活率检测

A.红丽海棠组培苗；B.预培养；C.切取1.5～2.5 mm茎尖；D.茎尖在离心管中；E.经TTC染色变红（左）与未染色（右）的茎尖；F.冻后茎尖接种到恢复培养基中。

Figure 1. Survival rate of post-cryopreservation shoot tips

A: Crabapple tissue culture; B: pre-culture; C: 1.5-2.5 mm cut of shoot tip; D: shoot tip segment in centrifugal tube; E: TTC stained red (left) and original (right) shoot tips; F: post-frozen shoot tips inoculated on recovery medium.

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关键环节的优化：在获得适宜预培养蔗糖浓度基础上，分别设置不同预处理时间（1、2、3 d），不同Loading溶液处理时间（0、10、20、30、40 min）和不同PVS2溶液处理时间（0、30、60、90、120 min），每个优化环节之前的步骤采用上一步已优化的处理方法，之后的步骤采用上述基本程序，直至完成所有关键环节的优化。每处理10～15个茎尖，重复3次。

1.2.2   存活率测定

采用氯化三苯基四氮唾（TTC）法检测冻存后茎尖的存活率。将经过Unloading溶液处理的茎尖置于含0.4%（m/V）的TTC溶液的离心管中，再放入37 ℃的水浴中黑暗处理30 min，将茎尖取出后，置于体视显微镜下，观察其染色情况。顶端分生组织被染红的茎尖记为存活的茎尖，而未被染红的茎尖记为死亡的茎尖。存活率/%=(被染红的茎尖/所有经过TTC处理的茎尖)×100%。每处理10～15个茎尖，重复3次。

1.2.3   恢复生长率测定

将经过液氮保存后的茎尖接种于MS培养基中暗培养2周后，然后转入正常光照条件（与组织培养的条件相同）下培养，茎尖长叶记为恢复生长。每处理10～15个茎尖，重复3次。

1.2.4   外源抗氧化剂和PCD抑制剂的添加

在建立的玻璃化超低温保存程序的基础上，根据课题组前人研究结果^{[4, 7-8, 13]}，分别在预培养基中添加Eth（100、200、400、800 mg·L⁻¹）；在Loading溶液中添加CAT，使其终浓度分别为50、100、200、400 U·mL⁻¹和硝普钠（SNP），使其终浓度分别为50、100、200、1000 μmol·L⁻¹；在PVS2溶液中添加GSH，使其终浓度分别为0.04、0.08、0.16、0.32 μmol·L⁻¹；在Unloading溶液中添加AsA，使其终浓度分别为100、200、400、600 μmol·L⁻¹，各处理均以原溶液为对照。

1.2.5   数据处理及分析

采用SPSS 26.0和Excel软件分别对试验数据进行单因素方差分析和数据整理、图表绘制。

2.   结果与分析

2.1   红丽海棠茎尖玻璃化超低温保存程序的建立

2.1.1   预培养基蔗糖浓度对液氮冻存后茎尖存活率的影响

将红丽海棠带顶芽茎段分别在含0.1、0.3、0.5、0.7、0.9 mol·L⁻¹蔗糖的预培养基上进行2 d的培养，之后采用后续的基本程序，测定液氮冻存后茎尖存活率。如图2所示，茎尖冻后存活率随蔗糖浓度的升高先上升再下降，0.3 、0.5 、0.7 mol·L⁻¹蔗糖浓度培养的茎尖存活率没有显著差异，但0.7 mol·L⁻¹蔗糖浓度的预培养基上茎尖冻后存活率最高，为76.54%，显著高于0.1 、0.9 mol·L⁻¹蔗糖浓度。因此红丽海棠超低温保存程序中预培养基的最适蔗糖浓度为0.7 mol·L⁻¹，浓度过低过高则会降低茎尖的存活率。

图 2 预培养基蔗糖浓度对液氮冻存后茎尖存活率的影响

不同小写字母表示不同差异显著(P＜0.05)，下同。

Figure 2. Effect of sucrose concentration in pretreatment medium on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

Different lowercase letters indicate different significant differences (P＜0.05), same as below.

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2.1.2   预处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

将带顶芽的红丽海棠茎段接种于含0.7 mol·L⁻¹蔗糖的预培养基上，在4 ℃条件下分别培养1 、2 和3 d，继续超低温保存基本程序的后续环节，液氮冻存后红丽茎尖存活率见图3。随预处理时间的增加，茎尖存活率逐渐升高，在2 d时存活率最高达到79.24%，后又下降。表明液氮冻后茎尖存活率受预培养环节冷锻炼时间的影响，适宜时长可以提高茎尖的抗冻能力。

图 3 预处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

Figure 3. Effect of pretreatment time on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

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2.1.3   Loading溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

红丽海棠茎段在含0.7 mol·L⁻¹蔗糖浓度的预培养2 d后，将茎尖分别在Loading溶液中处理不同时间，继续超低温保存基本程序的后续环节，从液氮取出化冻后茎尖存活率的结果如图4所示。Loading处理20 min时茎尖存活率最高，为60.61%，而随着处理时间的继续延长逐渐下降，处理40 min时的茎尖存活率为0。因此，Loading溶液处理时间不宜过长，否则可能会造成茎尖过度脱水而降低存活率。红丽海棠茎尖超低温保存的适宜Loading处理时间为20 min。

图 4 Loading溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

Figure 4. Effect of loading solution treatment time on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

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2.1.4   PVS2溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

红丽海棠茎段在4 ℃下，含0.7 mol·L⁻¹蔗糖浓度的预培养基上培养2 d后，Loading溶液处理20 min，分别采用PVS2溶液处理不同时间，继续超低温保存基本程序的后续环节，结果如图5。未经PVS2溶液处理的茎尖全部死亡，说明PVS2处理对玻璃化超低温保存过程起着至关重要的作用，随处理时间的增加，茎尖冻后存活率逐渐升高，处理90 min时茎尖存活率最高，为62.88%，后随时间的延长而显著下降。红丽海棠茎尖超低温保存PVS2处理适宜时间为90 min。

图 5 PVS2溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

Figure 5. Effect of PVS2 treatment time on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

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2.2   外源添加剂对茎尖超低温保存效果的影响

2.2.1   预培养环节添加外源Eth对液氮冻存后茎尖存活率的影响

在红丽海棠茎尖超低温保存中预培养环节添加4个质量浓度的外源Eth，继续超低温保存优化后的后续环节，茎尖冻后存活率见图6。添加100～400 mg·L⁻¹与对照没有显著差异，200 mg·L⁻¹时存活率稍高，而100 、400 mg·L⁻¹时存活率稍低，而质量浓度过高时（800 mg·L⁻¹）存活率显著下降。说明在预培养环节导入200 mg·L⁻¹Eth时可能起到一定保护作用，小幅度提高冻后存活率，高浓度反而会导致其存活率降低。

图 6 外源Eth对液氮冻存后茎尖存活率的影响

Figure 6. Effect of added Eth on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

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2.2.2   Loading环节添加外源CAT或SNP对液氮冻存后茎尖存活率的影响

采用预培养优化方案后，在Loading环节添加不同浓度的外源CAT，之后继续超低温保存优化后的后续环节，茎尖液氮冻存后存活率见图7。添加200 U·mL⁻¹时，茎尖的存活率最高，为86.67%，显著高于其他处理；含量为50 U·mL⁻¹稍有提高，但差异不显著，其余含量显著下降。由此可知，Loading环节添加适宜浓度的外源CAT浓度可以发挥抗氧化保护作用，显著提高茎尖冻后存活率。

图 7 外源CAT对液氮冻存后茎尖存活率的影响

Figure 7. Effect of added CAT on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

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采用预培养优化方案后，在Loading环节添加不同浓度的外源SNP，之后继续超低温保存优化后的后续环节，茎尖超低温保存后存活率如图8所示。各浓度处理后冻后存活率均下降，但添加100和1000 μmol·L⁻¹SNP时与对照无明显差异，而添加50和200 μmol·L⁻¹SNP时存活率显著下降，相比对照分别降低了23.25%和13.25%。表明对PCD有拮抗作用的SNP在这里没有显示其作用。

图 8 外源SNP对液氮冻存后茎尖存活率的影响

Figure 8. Effect of added SNP on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

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2.2.3   PVS2环节添加外源GSH对液氮冻存后茎尖存活率的影响

采用优化的预培养和Loading方案后，在PVS2环节添加不同浓度的外源GSH，之后继续超低温保存后优化的后续环节，茎尖液氮冻存后存活率见图9。添加各种浓度的GSH，较对照均显著提高了茎尖冻后的存活率，其中导入浓度为0.04 μmol·L⁻¹时存活率最高，为94.19%。由此表明，在PVS2环节导入外源GSH可有效发挥抗氧化保护作用，提高存活率。

图 9 外源GSH对液氮冻存后茎尖存活率的影响

Figure 9. Effect of added GSH on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

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2.2.4   Unloading环节添加外源AsA对液氮冻存后茎尖存活率的影响

采用优化的保存程序后，在Unloading环节导入不同浓度的外源AsA，茎尖超低温保存后存活率如图10所示，除200 μmol·L⁻¹存活率下降外，其余浓度均可提高冻后存活率，效果最好的浓度为400 μmol·L⁻¹，说明外源AsA起到了一定的抗氧化保护作用，小幅度提高了存活率。

图 10 外源AsA对液氮冻存后茎尖存活率的影响

Figure 10. Effect of added AsA on survival rate of post-cryopreservation shoot tips

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2.3   红丽海棠茎尖超低温保存后恢复培养

采用优化后的超低温保存程序，在PVS2环节添加0.04 μmol·L⁻¹的外源GSH，之后继续超低温保存后优化的后续环节，并进行恢复培养。没有添加GSH的对照组恢复生长率为16.67%，添加0.04 μmol·L⁻¹外源GSH的恢复生长率为41.39%，提高了24.73%。

3.   讨论

冷锻炼能够提高植物茎尖的抗冻能力^[14]，通过在含有一定浓度的高糖、山梨醇或DMSO的培养基中培养植物茎尖，可以显著提高冻存后茎尖的存活率^[15]。在大部分苹果属玻璃化超低温保存中，都至少需要3～4周的4 ℃或5 ℃的冷锻炼^[16-19]。本试验通过4 ℃预培养，起到冷锻炼作用，预培养2 d，超低温保存后的茎尖存活率可到79.24%。在苹果属其他茎尖超低温保存的研究中，有不使用Loading处理直接脱水处理^[20-22]，本试验不经Loading溶液处理也可达到36.11%的存活率，但经Loading溶液处理20 min的茎尖冻后存活率更高，因为装载阶段是实现玻璃化而脱水处理的过渡阶段，能够避免高浓度玻璃化溶液引起的剧烈渗透变化导致的材料损伤。另外在本试验中0 ℃条件下PVS2处理90 min后茎尖冻后存活率最高，也有研究在室温下进行脱水处理，如将苹果品种嘎啦、望山红在室温下用PVS2处理30 min^[10]或40 min^[11]后再生率分别为55.6%和17.9%，但Uragami等^[23]认为低温能降低玻璃化溶液的高渗作用导致的植物损伤，因此在大多数植物的超低温研究中，玻璃化步骤均在0 ℃下进行^{[24, 25]}。

ROS是需氧生物中细胞有氧代谢的副产物，在正常状态下，机体可以在ROS的产生和清除之间保持动态平衡，但当ROS在逆境胁迫下产生过量时，自身的抗氧化系统，包括CAT、SOD和POD等酶类，以及AsA和GSH等非酶类系统会协同作用清除抵抗ROS可能带来的伤害，但当抗氧化能力不足以清除过量的ROS时，机体就会出现氧化应激。这启发研究人员们通过导入外源抗氧化剂来抵御氧化损伤，研究证明外源CAT^{[4, 13, 26]}、AsA^{[4, 27]}和GSH^[6]均有抑制氧化应激的作用。本研究结果也显示，外源抗氧化剂CAT、AsA和GSH可以提高红丽海棠茎尖冻后存活率，说明外源抗氧化剂可能抑制了ROS造成的氧化损伤。3种外源抗氧化剂在不同环节中使用，分别提高了红丽海棠茎尖冻后存活率20.28%、6.75%、27.61%。

PCD作为一种自发性、有序的细胞死亡方式，受基因调控，是生物生活的基本过程。多项研究表明植物PCD存在于植物的各个生长发育过程及植物对非生物胁迫的响应中^[28]。有研究显示超低温保存中预培养是PCD的一个信号起始环节，PCD相关调控基因显著上调^[7]，由于细胞凋亡存在一定的延迟性，预培养后的Loading环节也成为超低温保存中PCD研究的另一重要环节。本试验在预培养和Loading环节添加了PCD抑制剂，结果显示预培养环节添加外源Eth只是小幅度提高了红丽海棠茎尖冻后存活率，而在Loading环节添加外源SNP冻后存活率反而下降了，SNP通过抑制PCD信号分子NO而其作用，而NO调控PCD具有双重作用，可以促进PCD的发生^{[29, 30]}，也可以抑制PCD的发生^{[31, 32]}，而添加环节对NO在PCD发生的作用也十分关键，如在春石斛类原球茎中预培养环节导入NO供体（SNP）促进了PCD的发生，降低了存活率，而在Loading环节添加则抑制了PCD的发生^[7]，故推测外源SNP对不同的植物和不同添加环节可能有不同的影响效果。

4.   结论

红丽海棠茎尖采用以下程序可以实现超低温保存：取组培苗4～5 mm带顶芽茎段，接种在含0.7 mol·L⁻¹蔗糖的预培养基，4 ℃冰箱培养2 d；切取1.5～2.0 mm的茎尖，Loading溶液室温下处理20 min；PVS2溶液0 ℃下处理90 min，可存入液氮保存；需用时将其取出放入38 ℃水浴快速化冻1 min；在室温下Unloading溶液震荡洗涤2次，每次10 min；进行恢复培养，存活率为66.58%，恢复生长率为16.67%。在Loading、PVS2和Unloading环节导入适宜浓度的抗氧化物质CAT、GSH、AsA可明显提高冻后存活率，最佳添加量分别为200 U·ml⁻¹、0.04 μmol·L⁻¹和400 μmol·L⁻¹，较对照存活率分别提高了20.28%、27.61%和6.75%，而添加PCD抑制剂没有显示明显作用

图 1 引物BaSSR046（A）和BaSSR007（B）在44份芥菜种质资源（1-44）中的多态性

注： M：DNA marker；1-44：芥菜种质资源。

Figure 1. Polymorphisms in 44 B. juncea germplasms (1–44) as shown by primer BaSSR046 (A) and BaSSR007 (B)

Note: M: DNA marker; 1-44: Brassicajuncea germplasms.

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图 2 芥菜种质资源的UPGMA聚类图

Figure 2. B. juncea germplasms classified by UPGMA

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表 1 44份芥菜种质材料主要性状

Table 1 Major properties of 44 B. juncea germplasms

编号 Code	品种名称 Cultivar	品种来源 Source	株型 Plant type	叶特征（叶形、叶面光滑与否、有无刺毛、蜡粉） Leaf characteristics（leaf shape, smooth or not, with or without bristles, wax powder）	抽䑓性 Bolting property	结球性（是/否） Heading ability（Y/N）	食用器官 Edible organ
1	龙岩青皮芥菜 Longyan Green Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	卵圆形、皱、无刺毛、无蜡粉 Ovoid, wrinkled, spineless, no wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
2	连城紫芥菜 Liancheng Pulse Purple Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	开展 Expansion	阔椭圆、微皱、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, slightly wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
3	抗热四季 ok甜芥菜 Hot Resistant Four Seasons OK Sweet Mustard	广西横县 Guangxi Hengxian	直立 Upright	阔椭圆、平滑、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, smooth, spineless, wax powder	早 Early	否 No	叶 Leaf
4	华517 Hua517	湖北武汉市 Hubei Wuhan	直立 Upright	倒卵、微皱、无刺毛、无蜡粉 Obovate, slightly wrinkled, spineless, no wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
5	厦门芥菜 Xiamen Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	开展 Expansion	扇形、皱、无刺毛、有蜡粉 Fan-shaped, wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
6	华515 Hua515	华中农大 Central China Agricultural University	开展 Expansion	阔椭圆、皱、无刺毛、无蜡粉 Broad oval, wrinkled, spineless, no wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
7	平和芥菜 Pinghe Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	椭圆、微皱、无刺毛、有蜡粉 Oval, slightly wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
8	特选竹芥菜 Selected Bamboo Mustard	广东广州市 Guangdong Guangzhou	直立 Upright	阔椭圆、平滑、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, smooth, spineless, wax powder	早 Early	否 No	叶 Leaf
9	龙岩长茎芥菜2 Longyan Long stem Mustard 2	北京市 Beijing	直立 Upright	卵圆形、皱、无刺毛、无蜡粉 Ovoid, wrinkled, spineless, no wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
10	细叶雪里蕻 Spire Potherb Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	半直立 Semi-upright	倒披针、平滑、无刺毛、有蜡粉 Inverted lanceolate, smooth, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
11	龙岩芥菜3 Longyan Mustard 3	福建龙岩市 Fujian Longyan	半直立 Semi-upright	倒卵、皱、无刺毛、有蜡粉 Obovate, wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
12	客家甜芥菜 Kejia Mustard	广东兴宁市 Guangdong Xingning	半直立 Semi-upright	阔椭圆、平滑、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, smooth, spineless, wax powder	早 Early	否 No	叶 Leaf
13	四季甜客家芥 Four-season sweet hakka Mustard	江西宜春市 Jiangxi Yichun	直立 Upright	阔椭圆、平滑、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, smooth, spineless, wax powder	早 Early	否 No	叶 Leaf
14	本地大菜 Local Mustard	广东兴宁市 Guangdong Xingning	直立 Upright	倒卵、皱、无刺毛、有蜡粉 Obovate, wrinkled, spineless, wax powder	早 Early	否 No	叶 Leaf
15	张白土茎用芥菜 Zhangbaitu stem Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	卵圆形、皱、无刺毛、无蜡粉 Ovoid, wrinkled, spineless, no wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
16	漳州芥菜2 Zhangzhou Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	倒卵、皱、无刺毛、有蜡粉 Obovate, wrinkled, spineless, wax powder	早 Early	否 No	叶 Leaf
17	特选大坪埔大肉包心芥菜 Specially selected Dapingpu big meat stuffed mustard	广西横县 Guangxi Hengxian	开展 Expansion	扁圆、皱、无刺毛、无蜡粉 Oval, wrinkled, spineless, no wax powder	中 Medium	是 Yes	叶球 Leaf Bulb
18	广东鸡那菜 Guangdong jina Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	倒披针、微皱、无刺毛、有蜡粉 Inverted lanceolate, slightly wrinkled, spineless, wax powder	早 Early	否 No	叶 Leaf
19	美口宽杆芥菜 Meikou Mustard	甘肃省武威市 Gansu Wuwei	开展 Expansion	卵圆、皱、无刺毛、有蜡粉 Ovoid, wrinkled, spineless, wax powder	晚 Later	否 No	叶 Leaf
20	闽清大芥菜 Minqin big Mustard	福建福州市 Fujian Fuzhou	半直 Upright	倒卵、微皱、无刺毛、无蜡粉 Obovate, slightly wrinkled, spineless, no wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
21	精品大肉大坪包心芥 Premium Dapingpu big meat stuffed Mustard	江西宜春市 Jiangxi Yichun	开展 Expansion	扁圆、皱、无刺毛、有蜡粉 Oval, wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	是 Yes	叶球 Leaf Bulb
22	台湾芥菜1 Taiwan Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	半直立 Semi-upright	长倒卵、平滑、无刺毛、无蜡粉 Long obovate, smooth, spineless, no wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
23	宽帮青菜 Wide petiole Mustard	四川省绵阳市 Sichuan Mianyang	开展 Expansion	阔椭圆、微皱、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, slightly wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
24	四川大肉青 Sichuan big meat Mustard	四川省广汉市 Sichuan Guanghan	开展 Expansion	阔倒卵、皱、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
25	华513 Hua513	湖北武汉市 Hubei Wuhan	开展 Expansion	倒卵、微皱、有刺毛、无蜡粉 Obovate, slightly wrinkled, spine, no wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
26	华512 Hua512	湖北武汉市 Hubei Wuhan	开展 Expansion	阔椭圆、微皱、有刺毛、无蜡粉 Broad oval, slightly wrinkled, spine, no wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
27	华516 Hua516	湖北武汉市 Hubei Wuhan	开展 Expansion	阔椭圆、微皱、有刺毛、有蜡粉 Broad oval, slightly wrinkled, spine, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
28	上杭毛芥菜 Shanghang Hairy Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	半直立 Semi-upright	卵圆形、微皱、有刺毛、无蜡粉 Ovoid, slightly wrinkled, spine, no wax powder	中 Medium	否 No	叶球 Leaf Bulb
29	宽叶厚肉高脚芥 Broadleaf Thick Meat Tall Mustard	广东兴宁市 Guangdong Xingning	直立 Upright	倒卵、微皱、无刺毛、有蜡粉 Obovate, slightly wrinkled, spine, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
30	连城芥菜 Liancheng Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	卵圆形、皱、无刺毛、有蜡粉 Ovoid, wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
31	香港客家甜芥菜 Hong Kong Hakka Sweet Mustard	广东兴宁市 Guangdong Xingning	半直立 Semi-upright	阔椭圆、平滑、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, smooth, spineless, wax powder	极早 Very Early	否 No	叶 Leaf
32	福州宽杆芥菜 Fuzhou Wide pole Mustard	福建福州 Fujian Fuzhou	半直立 Semi-upright	阔椭圆、皱、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, slightly wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
33	闽清大挂菜 Minqing Large Mustard	福建福州 Fujian Fuzhou	半直立 Semi-upright	倒卵、微皱、无刺毛、有蜡粉 Obovate, slightly wrinkled, spine, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
34	特选甜脆客家芥菜 Special sweet and crisp Hakka Mustard	广东深圳市 Guangdong Shenzhen	半直立 Semi-upright	阔椭圆、平滑、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, smooth, spineless, wax powder	极早 Very Early	否 No	叶 Leaf
35	皱叶芥 Crinkle Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	阔椭圆、皱、无刺毛、无蜡粉 Broad oval, smooth, spineless, wax powder	中 Medium	是 Yes	叶球 Leaf Bulb
36	永定客家芥 Yongding Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	卵圆形、皱、无刺毛、有蜡粉 Ovoid, wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
37	万安客家芥菜 Wanan Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	倒卵、微皱、无刺毛、有蜡粉 Obovate, slightly wrinkled, spine, wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
38	桂林甜芥菜薹 Guilin Mustard Stalk	广西横县 Guangxi Hengxian	开展 Expansion	阔椭圆、平滑、无刺毛、无蜡粉 Broad oval, smooth, spineless, no wax powder	中 Medium	是 Yes	叶、花 Leaf and Flower 薹 Bolting
39	绿欣芥菜 Luxin Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	倒卵、皱、无刺毛、有蜡粉 Obovate, wrinkled, spine, wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
40	龙芥1号 Long Mustard 1	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	卵圆形、皱、无刺毛、有蜡粉 Ovoid, wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem
41	大排芥菜 Dapai Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	阔椭圆、微皱、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, slightly wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	是 Yes	叶球 Leaf Bulb
42	紫脉芥 Purple vein Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	开展 Expansion	倒卵、皱、无刺毛、有蜡粉 Obovate, wrinkled, spine, wax powder	中 Medium	否 No	叶 Leaf
43	台湾芥菜2 Taiwan Mustard 2	福建龙岩市 Fujian Longyan	开展 Expansion	阔倒卵、微皱、无刺毛、有蜡粉 Broad oval, slightly wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	是 Yes	叶球 Leaf Bulb
44	龙岩长茎芥菜 Longyan Long stem Mustard	福建龙岩市 Fujian Longyan	直立 Upright	卵圆形、皱、无刺毛、有蜡粉 Ovoid, wrinkled, spineless, wax powder	中 Medium	否 No	茎 Stem

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表 2 芥菜SSR的类型分布

Table 2 Distribution of SSR types in B. juncea

SSR类型 SSR type	重复次数 Repeat number									总计 Total	比例/% Ratio
SSR类型 SSR type	4	5	6	7	8	9	10	11～14	≥ 15	总计 Total	比例/% Ratio
二核苷酸 Di	0	0	1 510	1 011	645	362	226	134	104	3 992	41.91
三核苷酸 Tri	0	3 108	1 185	403	78	20	32	29	15	4 870	51.12
四核苷酸 Tetra	273	55	17	5	1	0	1	0	0	308	3.70
五核苷酸 Penta	99	24	6	1	2	0	0	1	0	122	1.40
六核苷酸 Hexa	133	34	4	4	2	0	0	2	0	183	1.87
总计 Total	505	3 221	2 722	1 424	728	382	259	166	119	9 526
比例% Ratio	5.30	33.82	28.57	14.95	7.64	4.01	2.72	1.74	1.25		100

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表 3 芥菜转录中不同SSR重复基序出现的频率

Table 3 Frequency of different SSR repeat motifs in B. juncea transcriptome

SSR类型 SSR type	重复基序种类数 Repeat species	重复基序类型 Repeat motif type	数量 Number	发生频率/% Frequency	比例/% Proportion
二核苷酸 Di	4	AG/CT	3 309	34.74	82.89
		AC/GT	388	4.07	9.72
		AT/AT	291	3.05	7.29
		CG/CG	4	0.04	0..10
三核苷酸 Tri	10	AAG/CTT	1743	18.30	35.79
		AGG/CCT	827	8.68	16.98
		ATC/ATG	740	7.77	15.20
		AAC/GTT	461	4.84	9.47
		ACC/GGT	390	4.09	8.00
		AGC/CTG	320	3.36	6.57
		CCG/CGG	138	1.45	2.83
		ACG/CGT	94	0.99	1.93
		ACT/AGT	83	0.87	1.70
		AAT/ATT	74	0.78	1.52
四核苷酸 Tetra	25	AAAG/CTTT	74	0.78	24.02
		AAAC/GTTT	68	0.71	22.08
		AAGG/CCTT	41	0.43	12.99
		AATC/ATTG	40	0.43	12.99
		其他 Other	85	0.89	27.60
五核苷酸 Penta	41	AAGAG/CTCTT	14	0.15	11.48
		AATCG/ATTCG	13	0.14	10.66
		AAAAC/GTTTT	12	0.13	9.84
		其他 Other	83	0.87	68.03
六核苷酸 Hexa	92	AAGGAG/CCTTCT	15	0.16	8.20
		AAGAGG/CCTCTT	12	0.13	6.56
		AAAAAC/GTTTTT	10	0.10	5.46
		其他 Other	146	1.53	79.78

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表 4 芥菜17对SSR多态性引物信息

Table 4 Information on 17 pairs of SSR primers for studying polymorphism of B. juncea

引物名称 Primer name	引物序列（5′→3′） Primer sequence	SSR基元 SSR motif	产物长度/bp Length of product	多态条带数 Number of polymorphic bands	多态信息量 PIC
BaSSR002	TCACCGAGCTTCTTCGTCTT/CTCCTTTCTATTCGGTTGCG	（AG）9	235	3	0.54
BaSSR003	TGACTTGGGCCAAAGCTTAC/CACTTCTCTTTCGGGTCCAG	（AG）20	247	3	0.63
BaSSR007	CCTCTCCGAATCAAGTCTCG/TGTTAAACCTCAACCTCGCA	（AG）9	286	1	0.43
BaSSR009	GGGAACATACATATCAGATTGTGG/TTCCCACAGAAGCCATTCTC	（AG）23	225	3	0.67
BaSSR012	ACGAAACCCCAGAAGAAAGC/GATCATTCCTCCCCTCTTCC	（AGA）7	181	3	0.71
BaSSR013	AAAGTGGAACCCTGTGAACG/AATCGGCGGTAACTCCTTCT	（GAA）8	264	2	0.58
BaSSR015	TGGATAAGGGAACAAGGCTG/GAAGATTCACGAGCTCCAGG	（GCT）8	241	3	0.58
BaSSR016	AGCACCTCACCAAACTGGAC/CAACAGTTCCAGCAGCTTCA	（TGC）8	169	2	0.53
BaSSR019	GAAGTCTTTGCGATTGAGAAAAA/TCCCATTGTACACGACCCTT	（GAA）15	280	4	0.72
BaSSR020	CAAAAAGTGGGTTCGAGGAG/CGCAAAACTCTTCCTTCCAC	（AAG）7	238	3	0.71
BaSSR022	CATCACCTAACCGATTGCCT/TCTTGTTTCTGTGGCGTGAG	（AACC）6	131	3	0.70
BaSSR023	GTCGAGAGAACCTTTCGTGC/GCCCATATCAGCCTCGTTTA	（TTTC）7	257	2	0.51
BaSSR032	TAAGGAAGGCGAAAGTTGGA/AGAGAATCAGCTTCCCGTCA	（TTGGT）7	249	2	0.53
BaSSR037	GATTCTCTTTCGCGATTCGT/ATCTTGTTTTCGCCCTGACA	（TTTGG）6	278	2	0.53
BaSSR043	TAGCTGCAGCAACAATCGTC/GATGTGCAAGCAAGGATTGA	（AAAAG）5	217	2	0.47
BaSSR045	TCCATCTGAACGGTTCTTTG/CATAGATCCATTGCTTAGCGG	（CTGTTA）6	185	2	0.50
BaSSR046	CACGAATGTGAAGCAGCAGT/GTAGCCAGGTCGTGGTTGTT	（CACCCA）5	277	6	0.82

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[32]	FU J. Genetic diversity and phylogenetic relationship among Chinese mustard as revealed by RAPD and microsatellite markers[D]. Hangzhou: Zhejiang University, 2005.(in Chinese)
[33]	齐晓花. 中国芥菜系统进化研究及重要数量性状的遗传分析[D]. 杭州: 浙江大学, 2009. Qi X H. Phylogeny of Chinese mustard and genetic analysis of important quantitative characters[D]. HangZhou: Zhejiang University, 2009. (in Chinese)
[34]	齐晓花. 中国芥菜系统进化研究及重要数量性状的遗传分析[D]. 杭州: 浙江大学, 2009. QI X H. Phylogenetic evolution and quantitative genetic analysis of major traits for Chinese vegetable mustard (Brassica juncea)[D]. Hangzhou: Zhejiang University, 2009.(in Chinese)[知网]
[35]	宋明, 刘婷, 汤青林, 等. 芥菜种质资源的RAPD和ISSR分析 [J]. 园艺学报, 2009, 36(6):835−842. DOI: 10.3321/j.issn:0513-353X.2009.06.009 SONG M, LIU T, TANG Q L, et al. Genetic diversity analysis of mustard germplasm based on RAPD and ISSR [J]. Acta Horticulturae Sinica, 2009, 36(6): 835−842.(in Chinese) DOI: 10.3321/j.issn:0513-353X.2009.06.009

施引文献(1)

期刊类型引用(1)

戴惠新，吴金洋，张梦樵，张湘菊，吴丽娜. 喷涂机器人用改性聚天门冬氨酸酯腻子制备及性能测试. 粘接. 2024(12): 42-45 .

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图(2) / 表(4)

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0. 引言
1. 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 试验方法
1.2.1 茎尖玻璃化法超低温保存
1.2.2 存活率测定
1.2.3 恢复生长率测定
1.2.4 外源抗氧化剂和PCD抑制剂的添加
1.2.5 数据处理及分析
2. 结果与分析
2.1 红丽海棠茎尖玻璃化超低温保存程序的建立
2.1.1 预培养基蔗糖浓度对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.1.2 预处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.1.3 Loading溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.1.4 PVS2溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.2 外源添加剂对茎尖超低温保存效果的影响
2.2.1 预培养环节添加外源Eth对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.2.2 Loading环节添加外源CAT或SNP对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.2.3 PVS2环节添加外源GSH对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.2.4 Unloading环节添加外源AsA对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.3 红丽海棠茎尖超低温保存后恢复培养
3. 讨论
4. 结论

0. 引言
1. 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 试验方法
1.2.1 茎尖玻璃化法超低温保存
1.2.2 存活率测定
1.2.3 恢复生长率测定
1.2.4 外源抗氧化剂和PCD抑制剂的添加
1.2.5 数据处理及分析
2. 结果与分析
2.1 红丽海棠茎尖玻璃化超低温保存程序的建立
2.1.1 预培养基蔗糖浓度对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.1.2 预处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.1.3 Loading溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.1.4 PVS2溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.2 外源添加剂对茎尖超低温保存效果的影响
2.2.1 预培养环节添加外源Eth对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.2.2 Loading环节添加外源CAT或SNP对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.2.3 PVS2环节添加外源GSH对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.2.4 Unloading环节添加外源AsA对液氮冻存后茎尖存活率的影响
2.3 红丽海棠茎尖超低温保存后恢复培养
3. 讨论
4. 结论

参考文献(35)

施引文献(1)

资源附件(0)

利用芥菜转录组信息挖掘SSR标记及用于种质分析

作者简介: 李永平（1974−），女，硕士，副研究员，研究方向：蔬菜分子育种（E-mail：248937256@qq.com）

通讯作者: 薛珠政（1971−），男，研究员，研究方向：蔬菜育种（E-mail：369654817@qq.com）

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出版历程

Using SSR Markers from Brassica juncea Transcriptome for Germplasm Analysis

0. 引言

1. 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

1.2.1 茎尖玻璃化法超低温保存

1.2.2 存活率测定

1.2.3 恢复生长率测定

1.2.4 外源抗氧化剂和PCD抑制剂的添加

1.2.5 数据处理及分析

2. 结果与分析

2.1 红丽海棠茎尖玻璃化超低温保存程序的建立

2.1.1 预培养基蔗糖浓度对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.1.2 预处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.1.3 Loading溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.1.4 PVS2溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.2 外源添加剂对茎尖超低温保存效果的影响

2.2.1 预培养环节添加外源Eth对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.2.2 Loading环节添加外源CAT或SNP对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.2.3 PVS2环节添加外源GSH对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.2.4 Unloading环节添加外源AsA对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.3 红丽海棠茎尖超低温保存后恢复培养

3. 讨论

4. 结论

期刊类型引用(1)

其他类型引用(0)

计量

出版历程

目录

0. 引言

1. 材料与方法

1.1 试验材料

1.2 试验方法

1.2.1 茎尖玻璃化法超低温保存

1.2.2 存活率测定

1.2.3 恢复生长率测定

1.2.4 外源抗氧化剂和PCD抑制剂的添加

1.2.5 数据处理及分析

2. 结果与分析

2.1 红丽海棠茎尖玻璃化超低温保存程序的建立

2.1.1 预培养基蔗糖浓度对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.1.2 预处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.1.3 Loading溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.1.4 PVS2溶液处理时间对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.2 外源添加剂对茎尖超低温保存效果的影响

2.2.1 预培养环节添加外源Eth对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.2.2 Loading环节添加外源CAT或SNP对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.2.3 PVS2环节添加外源GSH对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.2.4 Unloading环节添加外源AsA对液氮冻存后茎尖存活率的影响

2.3 红丽海棠茎尖超低温保存后恢复培养

3. 讨论

4. 结论

作者简介:
李永平（1974−），女，硕士，副研究员，研究方向：蔬菜分子育种（E-mail：248937256@qq.com）

通讯作者:
薛珠政（1971−），男，研究员，研究方向：蔬菜育种（E-mail：369654817@qq.com）