Effect of Endogenous Hormones and Expressions of Relevant Genes on Tuber Growth of Bikeqi Yam
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摘要:目的 分析毕克齐山药中内源激素含量与淀粉含量、可溶性总糖含量和还原糖含量的关系，以及与其相关合成基因表达量的相关性，探究毕克齐山药块茎膨大的机理。方法 以毕克齐山药5个不同生长期块茎为材料，采用酶联免疫吸附法分别测定脱落酸（ABA）、赤霉素（GA3）、生长素（IAA）、茉莉酸（JA）、玉米素（ZR）、异戊烯基腺苷（IPA）等6种内源激素含量，采用高效液相色谱仪测定方法测定水杨酸（SA）含量。结果 IAA、ZR、ABA、JA和SA含量与山药块茎形态指标正相关；GA3、IPA含量与形态指标负相关；IAA含量与山药块茎周长和块茎直径显著正相关；GA3含量与块茎长度显著负相关；与IAA相关的基因与内源激素IAA含量显著负相关。结论 内源激素IAA、ZR、ABA、JA和SA促进山药块茎膨大；GA3、IPA抑制山药块茎生长；IAA促进山药增粗；GA3抑制其伸长生长；与IAA相关的基因的下调表达对IAA的合成有促进作用，即正调控IAA含量。Abstract:Objective Effects of endogenous hormones and expressions of genes related to the hormone syntheses on the morphology and physiology of bikequ yam (Dioscorea Opposita) tubers during expanding stage were investigated. Correlation between the indicators was established to provide guidelines for upgrading the yield and quality of the yam farming.Method During expansion stage of the tubers, contents of starch, reducing sugar, and soluble total sugar were determined by chemical analysis, those of endogenous ABA, GA3, IAA, JA, ZR, and IPA by enzyme-linked immunosorbent assay, and that of salicylic acid (SA) by HPLC. Correlations between these indicators were tested by regression analysis. The gene expression levels of endogenous hormone related genes were obtained by transcriptome sequencing.Result The contents of IAA, ZR, ABA, JA, and SA correlated positively with the morphological indices on the tuber, while those of GA3 and IPA correlated negatively. IAA correlated with the tuber perimeter and diameter. GA3 correlated inversely with the length of tuber. The IAA-related gene was found to negatively correlate with IAA in the tubers.Conclusion Among the endogenous hormones, IAA, ZR, ABA, JA, and SA promoted the tuber enlargement; GA3 and IPA inhibited the growth; IAA enhanced the girth increase; and, GA3 retarded the elongation. The downregulation of IAA-related gene increased the hormone synthesis. In other words, the gene could regulate the IAA production in the yams, and in turn, affected the tuber growth.
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0. 引言
【研究意义】大气颗粒物是指悬浮在空气中微小固体和液体小滴的混合物，是雾、烟和空气尘埃的主要成分。其中按颗粒物直径可分为总悬浮颗粒物（TSP，d≤100 μm）、PM10（d≤10 μm）和PM2.5（d≤2.5 μm）[1]。由于城市化进程加快以及能源消耗不断增加，我国大气颗粒物污染日益严重，尤以冬季为甚，危害巨大[2-5]。植物能够阻挡、过滤和吸滞大气颗粒物[6, 7]。不同的绿化树种，对于不同粒径颗粒物的滞尘能力有明显差异，在改善城市大气颗粒物污染中起重要作用[1, 4, 8]。【前人研究进展】目前，国内外学者在植物滞尘能力方面进行了一定的研究，例如植物的滞尘能力受到环境因子、生理特性和叶片结构的影响[9-12]。不同地区环境污染程度存在较大差异，植物为了适应环境会改变自身的生理特性[13]。在大气污染严重的地区，植物叶片滞留的大量颗粒物会导致其光合作用减弱，进而使叶片中的叶绿素a、b破坏分解[14]。同时在该地区，植物叶片内活性氧的产生和清除平衡也会受到破坏，引发膜脂过氧化，最终导致丙二醛含量升高[14]。而且，在植物叶片周围悬浮的颗粒物很容易造成植物叶片的气孔堵塞，此时气孔密度增加有利于提高叶片单位叶面积的气孔交换能力，使其能适应污染严重的环境[13]。因此，环境污染程度也影响着叶片表面结构的变化[10, 15, 16]。植物叶表结构会影响其滞尘能力，叶表粗糙多毛的树种的滞尘能力显著高于叶表光滑的树种[17]。此外，叶表滞留的颗粒物集中分布在中脉和凹槽附近[18]。【本研究切入点】郑州由于冬季采暖，大气颗粒物污染严重，而部分植物存在落叶无法滞尘的情况，此时常绿树种在冬季滞尘的作用显得尤为重要[19-21]。目前，郑州市常绿树种综合抗污染性相关研究较少。【拟解决的关键问题】以郑州市7种常见的常绿树种为研究对象，测定并计算出各树种单位叶面积滞留不同粒径颗粒物（TSP、PM10和PM2.5）的质量，比较分析不同污染程度下各树种叶片的生理指标（叶绿素a、b和丙二醛）和叶表面微形态结构，探讨不同污染程度下不同树种的抗污染能力，为筛选缓解郑州市空气粉尘污染、提升空气质量的园林绿化树种提供了一定的理论依据。
1. 材料与方法
1.1 试验地点
郑州市地处河南省中北部（34°16′～34°58′N，112°42′～114°14′E），属暖温带大陆性季风气候，四季分明，年降水量652.9 mm，且多集中在夏季，冬季降水较少，大气颗粒物污染频发[22]。本次采样地点设置在郑州市中原区，选取3个有代表性的采样区，分别为新技术产业开发区热力公司（简称工厂）、陇海西路（简称道路）和郑州植物园（简称公园）。现场测得的空气颗粒物含量分别为146.4 μg·m−3、101.3 μg·m−3、53.8 μg·m−3，对应设为高、中和低3个不同污染等级（图1）。
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图 1 采样区域分布注：1、公园；2、道路；3、工厂。图5同。Figure 1. Schematic distribution of sampling areaNote: 1. park; 2. road; 3. factory. The same was applied in Fig.5.1.2 供试树种
在3处不同污染程度采样区选择7种郑州市典型常绿树种为研究对象，分别为针叶树种：圆柏（Sabina chinensis）和雪松（Cedrus deodara），阔叶树种：女贞（Ligustrum lucidum）、石楠（Photinia serratifolia）、大叶黄杨（Buxus megistophylla）、海桐（Pittosporum tobira）和南天竹（Nandina domestica）。其中，2种针叶树种在郑州市主要公园的平均出现频率为100%，5种阔叶树种平均出现的频率为80%。每种树种随机选择3株，要求生长健壮无病害，生长状况一致。
1.3 叶片采集方法
采样时间为郑州冬季供暖后，于 2020年11 月雨后第7天开始（微风无降水的天气条件）在3处采样地区进行采集，各供试树种设置3个重复，共采集3次。每次采样采取分层取样法，将树冠分为上、中、下3个垂直部分和东西南北的4个方向，随机均匀地采集健康完整的叶片，单叶较大树种采取10～15片，较小的树种采取30～45片，小心放入样品袋中，并立即带回实验室处理。
1.4 叶面滞尘量的测定
采用改良的分级滤膜过滤法测定各树种叶片滞留 TSP、PM10和PM2.5的质量[4]。通过便携式叶面积仪（YMJ-B，浙江托普）对植物叶面积进行测定；针叶树采用王会霞的排水法计算叶面积[23]。每个树种叶面积的测定重复3次，分别计算各植物 TSP、PM10、PM2.5滞留量与叶片总面积的比值，得到单位叶面积各粒径颗粒物的滞留量。
1.5 生理指标测定
选取新鲜的叶片对植物其他生理指标进行测定。每项试验重复测定3 次，将叶片洗净后放在65 ℃的烘箱中烘干，除去叶脉后剪碎，叶绿素a、b值采用改良的80%丙酮溶液浸提比色分析测定[14]；丙二醛（MAD）采用硫代巴比妥酸（TBA）显色法测定[24]。
1.6 叶表面微结构观测
将叶片平放，切成1 cm×1 cm正方形，用超景深三维视频显微镜（Leica-DVM6A，德国）在60倍的放大倍数下观察各树种叶表面靠近中脉和远离中脉的颗粒物的分布情况以及叶表面的形态结构。随后刮去上表皮和叶肉组织，只留下表皮，在1200倍的放大倍数下观察并统计气孔的大小、数量等。
1.7 数据处理
采用SPSS 23.0软件进行单因素方差分析（ANOVA），确定不同树种各粒径颗粒物的滞尘能力以及生理指标的差异，并用最小显著差数法（LSD）和Dunnett’s T2检验数据之间的差异显著性，采用Pearson相关性分析法分析植物叶片滞尘能力与生理指标之间的关系，采用Excel 2010、Origin 2007绘图。
2. 结果与分析
2.1 不同程度污染下树种滞尘能力比较
如图2所示，各树种单位叶面积滞留TSP、PM10、PM2.5的变化范围分别为0.385～29.012 g∙m−2，0.211～13.033 g∙m−2和0.134～12.109 g∙m−2。不同树种滞尘量差异显著，针叶树种单位叶面积滞尘量显著高于阔叶树种，针叶树种中圆柏的滞尘量高于雪松，阔叶树种中单位叶面积滞尘量最高为女贞，其次依次为石楠、大叶黄杨和海桐，滞留量最低的为南天竹。其中石楠与大叶黄杨、海桐与南天竹之间滞尘量存在显著性差异（P＜0.05）。同一树种在不同污染程度采样区的滞尘量差异也较大，污染越严重的地区树种滞尘量越高。单位叶面积滞留TSP能力最强的圆柏和雪松在工厂的滞留量是其在清洁区公园的4.3倍和5.6倍，而TSP滞留能力较差的大叶黄杨和海桐在工厂的滞留量是其在公园滞留量的3.6倍和3.8倍。
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图 2 7种常绿树种在3个采样区滞尘量的比较Figure 2. Dust deposition on 7 species of evergreen in 3 sampling areasNote: Different lowercase letters indicate significant differences among different tree species in the same sampling area (P＜0.05); A. Sabina chinensis. B. Cedrus deodara. C. Ligustrum lucidum. D. Photinia serratifolia. E. Buxus megistophylla. F. Pittosporum tobira. G. Nandina domestica. The same for Fig.3, 4, 5.2.2 不同污染程度对树种叶片生理特性的影响
7种树种在3个不同污染程度采样区的叶绿素含量差异较大，污染越严重叶绿素含量越低；而丙二醛含量则随污染程度的加深而增加（图3）。相同污染程度下7种树种的生理响应程度也存在差异，石楠和大叶黄杨的叶绿素a、叶绿素b含量显著高于其他绿化树种（P＜0.05），圆柏和雪松的丙二醛含量显著高于其他绿化树种（P＜0.05）。在污染严重的情况下，圆柏、雪松的叶绿素a含量变化较小，分别为0.06 mg∙g−1和0.03 mg∙g−1，叶绿素b含量变化较小的树种为圆柏、雪松和女贞，分别为0.01 mg∙g−1、0.04 mg∙g−1和0.04 mg∙g−1，而海桐和南天竹的丙二醛含量变化较小，分别为3.82 μmol∙g−1和2.71 μmol∙g−1。
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图 3 7种常绿树种在3处采样区的叶绿素a、b以及丙二醛含量比较Figure 3. Contents of chlorophyll a, chlorophyll b, and malondialdehyde of evergreens in 3 sampling areas2.3 不同植物叶面结构分析
利用超景深三维视频显微镜对7种常绿树种叶片的主脉、侧脉等进行观察（图4）。针叶树种圆柏和雪松的叶表面附着大量的颗粒物，颗粒物滞留量明显高于阔叶树种（图4A、4B）；阔叶树种女贞和石楠的叶表面均有明显的主脉和侧脉结构，附着有较多的颗粒物（图4C、4D），二者在阔叶树种中滞留颗粒物最多；大叶黄杨上表面沟槽较浅或较平整，粉尘固着较分散，除中脉外有少量的颗粒物滞留（图4E），总体颗粒物滞留量一般；海桐的褶皱和沟槽中滞留着一定数量的颗粒物，且在除中脉外的区域仍有一些颗粒物滞留，整体上海桐颗粒物滞留量一般（图4F）；南天竹极窄的中脉有少量的颗粒物滞留，除中脉外叶表面其余部分光滑无毛，无颗粒物滞留，因此整体叶片粉尘滞留最少（图4G）。
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图 4 7种常绿树种的叶面颗粒物分布注：箭头为不同植物叶面颗粒分布集中区域（×60倍）。Figure 4. Distribution of particles fell on leaves of various species of evergreensNote: Arrows are the concentrated areas of leaf particles of different plants (×60 times).由表1和图5可知，同一植物在不同污染程度下气孔密度和气孔大小不同，除圆柏和雪松外，女贞、石楠、大叶黄杨、海桐、南天竹的气孔密度均随污染程度增加而变大，而气孔长度和气孔宽度均随污染程度增加而变小。随着污染程度增加，7种树种中，雪松和圆柏的气孔密度变化较小，石楠和海桐变化较大；气孔长度变化较小的为女贞和圆柏，变化较大的为雪松和海桐；南天竹和女贞的气孔宽度变化较小，海桐和圆柏变化较大。利用SPSS中一般线性模型，以污染程度和树种差异为固定因子，以气孔长度、气孔宽度和气孔密度为因变量进行方差分析，探究树种差异和污染程度对气孔指标的影响程度。方差分析结果表明（表2），污染程度对气孔密度、气孔长度和气孔宽度的影响均不显著（P＞0.05），而树种差异对气孔密度、气孔长度和气孔宽度均造成了极显著的影响（P＜0.01）。
表 1 7种常绿树种在3处采样区的叶面气孔参数Table 1. Stomatal parameters of evergreens in 3 sampling area树种
Tree species气孔形态
Stomatal morphology采样区域
Sampling area气孔密度
Stomatal density/(个·mm−2)气孔长度
Stomatal length/μm气孔宽度
Stomatal width/μm圆柏 Sabina chinensis 长圆形 Long round 1 55.18±0.00 44.21±0.92 36.15±0.78 2 55.18±0.00 42.37±0.30 32.60±0.39 3 66.68±3.98 42.11±0.51 20.93±0.49 雪松 Cedrus deodara 长圆形 Long round 1 27.59±0.00 59.28±0.91 38.67±0.30 2 27.59±0.00 44.26±0.32 37.60±0.35 3 27.59±0.00 31.98±1.16 31.27±0.75 女贞 Ligustrum lucidum 卵圆形 Ovate 1 223.03±14.36 24.72±0.15 17.25±1.13 2 236.82±3.98 24.41±0.22 13.72±1.07 3 303.50±6.90 22.93±1.24 12.59±0.05 石楠 Photinia serratifolia 圆形 Round 1 257.51±15.93 23.16±0.34 22.18±0.28 2 425.36±14.36 20.23±0.32 17.35±1.30 3 443.75±14.36 15.20±0.43 12.76±0.38 大叶黄杨 Buxus megistophylla 圆形 Round 1 236.82±22.17 37.91±0.28 37.26±0.23 2 239.12±7.96 26.83±0.13 25.89±1.01 3 287.40±14.36 24.74±0.15 24.26±0.27 海桐 Pittosporum tobira 圆形 Round 1 170.14±7.96 40.55±0.45 39.62±0.20 2 271.31±21.07 32.50±0.43 30.92±0.06 3 298.90±21.07 25.65±1.16 24.13±0.11 南天竹 Nandina domestica 卵圆形 Ovate 1 377.07±31.86 19.91±0.31 18.66±0.31 2 434.55±11.95 19.48±0.35 17.39±0.47 3 448.35±20.69 15.76±0.09 14.61±0.37 ![]()
图 5 7种常绿树种在3处采样区的叶面气孔形态观察 （×1200倍）Figure 5. Leaf stomata morphology of evergreens in 3 sampling areas (1200 ×)表 2 树种、污染程度与气孔指标的方差分析Table 2. Variance analysis on tree species, pollution degree, and stoma index固定因子
Fixed factor因变量
Dependent variableⅢ类平方和
Sum of squares of class Ⅲ自由度
Degrees of freedom均方
Squared valueF 显著性
Significance污染程度 The degree of pollution 气孔长度 Stomatal length 365.339 2 182.669 1.417 0.268 气孔宽度 Stomata width 342.450 2 171.225 2.192 0.141 气孔密度 Stomatal density 20557.829 2 10278.915 0.457 0.640 树种差异 Tree species differences 气孔长度 Stomatal length 2052.773 6 342.129 7.571 0.001** 气孔宽度 Stomata width 1303.944 6 217.324 4141.690 0.001** 气孔密度 Stomatal density 386552.852 6 64425.475 23.403 0.000** 注：**表示P＜0.01。
Note: ** means P＜0.01.2.4 滞尘量与生理指标的相关性及主成分分析
为了进一步分析树种滞尘能力与生理指标之间的关系，分析各树种的单位叶面积颗粒物（TSP、PM10、PM2.5）滞留量与生理指标之间的相关性。结果表明，各指标间的相关系数达到极显著相关的有7个（表3）。
表 3 叶片滞尘量与生理指标之间的相关性Table 3. Correlation between dust retention and physiological indices of leavesX1 X2 X3 X4 X5 X6 X1 1 0.917** 0.886** −0.692 −0.739 0.966** X2 1 0.997** −0.531 −0.508 0.907** X3 1 −0.478 −0.443 0.878** X4 1 0.918** −0.709 X5 1 −0.727 X6 1 注：**表示在0.01水平上极显著相关；X1：单位叶面积TSP滞留量； X2：单位叶面积PM10滞留量； X3：单位叶面积PM2.5滞留量； X4 ：叶绿素a含量；X5：叶绿素b含量；X6：丙二醛含量。
Note: **extremely significant correlation at P＜ 0.01; X1: TSP retention per unit leaf area; X2: PM10 retention per unit leaf area; X3: PM2.5 retention per unit leaf area; X4: chlorophyll a content; X5: chlorophyll b content; X6: malondialdehyde content.将滞尘、生理指标转化为6个主成分进行分析（表4）。由滞尘量在第1主成分上具有较高载荷，说明第1主成分主要反映了植物滞尘能力。第2主成分中叶绿素a、b含量具有较高载荷，说明第2主成分主要反映了树种的生理响应。前2个主成分的累积方差贡献率为96.65%，反映出滞尘能力和生理指标95%以上的信息；因此，可以提取前2个主成分作为植物滞尘能力和生理响应评价的综合指标。
表 4 滞尘量与生理指标的主成分贡献率和因子载荷矩阵Table 4. Contribution rate and factor loading matrix of principal components on dust retention and physiological indicators主成分
Principal component成分矩阵 Component matrix 特征值
Eigen value贡献率
Contribution/%累计贡献率
Cumulative/%X1 X2 X3 X4 X5 X6 1 0.98 0.92 0.89 −0.79 −0.80 0.97 4.80 79.92 79.92 2 0.09 0.38 0.44 0.56 0.58 0.08 1.00 16.73 96.65 2.5 树种抗污染性综合评价
为了更好评价供试植物的综合抗污染能力，根据提取的前2个主成分的贡献率得到树种的综合得分公式：
F=0.7992F1+0.1673F2 式中：F1表示树种在第1主成分的得分；F2表示树种在第2主成分的得分；F表示树种的综合得分。
基于以上公式对植物的滞尘、生理以及综合抗污染能力进行评价和排序（表5），得出滞尘能力排前2名的树种为雪松和圆柏，说明雪松和圆柏的滞尘能力较强，生理响应前2名的树种为石楠和女贞，综合得分前2名为雪松和圆柏。
表 5 树种在第1、2主成分的得分以及综合得分Table 5. Overall score and scores of first and second principal components on varied species of plants树种
Tree speciesF1 F2 F 排名
Ranking雪松 Cedrus deodara 3.19 0.01 2.55 1 圆柏 Sabina chinensis 3.08 −0.31 2.41 2 女贞 Ligustrum lucidum −0.25 0.73 −0.08 3 石楠 Photinia serratifolia −1.50 1.28 −0.98 4 大叶黄杨 Buxus megistophylla −1.41 0.64 −1.02 5 海桐 Pittosporum tobira −1.32 −0.63 −1.16 6 南天竹 Nandina domestica −1.79 −1.72 −1.72 7 注：F1：树种在第1主成分（滞尘能力）的得分，随数值增加树种滞尘能力得分高；F2：树种在第2主成分（生理响应）的得分，随数值增加树种生理响应得分高；F：树种的综合得分；表中的排名是按照F综合得分进行的排名。
Note: F1: The score of tree species in the first principal component (Dust detentions) , the dust retention ability score of tree species was higher with increasing value; F2: The score of tree species in the second principal component (Physiological response) , the physiological response score of tree species was higher with increasing value; F: Composite score of tree species; The rankings in the table are based on the F composite score.3. 讨论
综合单位叶面积滞尘量和叶表面观察，发现，7种常绿树种中，针叶树的单位叶面积滞尘能力显著强于阔叶树种，这可能与针叶树本身存在蜡质微结构有关，这与史军娜等[25]、 赵松婷等[26]的研究结果一致。针叶树种中圆柏的单位叶面积TSP滞留能力强于雪松，且两者之间存在显著差异，圆柏的鳞形叶有密集的脊状突起，突起之间沟槽宽度与深度较明显，对粒径较大的颗粒物(TSP)滞留能力更显著[27, 28]。雪松分泌的油脂对粒径较小的颗粒物(PM10和PM2.5)滞留能力更显著[25-27]。结合单位叶面积滞尘量，阔叶树种中，女贞的滞尘能力最强，大叶黄杨、石楠和海桐叶表面较光滑，滞尘能力一般，南天竹滞尘能力最差，虽然南天竹气孔密度最大，但由于叶片表面气孔较小且平整，滞尘能力最弱[19, 29]。
本研究中各树种叶片叶绿素a、b含量在污染严重的地区较低，并与滞尘量呈显著负相关（P＜0.01）。这可能是由于叶片受到大气污染后，叶片中的叶绿素a、b受到破坏而分解。裘璐函等[30]的研究也表明随滞尘时间的增加, 大部分树种叶片叶绿素相对含量呈下降趋势。本研究中丙二醛含量与滞尘量呈显著正相关（P＜0.01），在污染严重的地区相对较高，这可能是由于污染物破坏了植物叶片内活性氧产生和清除的平衡，导致丙二醛含量升高[24, 31]；此外， 俎丽红等[32]的研究发现，树种的丙二醛含量升高还可能与大气颗粒物中重金属含量较高、供试树种年龄较大有关。污染严重的工厂的植物，气孔密度最大，长度和宽度均最小，滞尘能力较强。王会霞等[13]、李艳梅等[33]发现不同程度的颗粒物污染会导致植物气孔大小和密度发生变化。这可能是由于植物在遭受颗粒物污染时其气孔密度在一定阈值内增加有利于提高叶片单位叶面积的气孔交换能力，使其能适应污染严重的环境[34]。而气孔密度与滞尘能力在整体阈值上影响趋势仍需进一步研究。不同树种在遭受颗粒物污染时生理指标响应程度不同，在严重污染的情况下，圆柏和雪松等树种的叶绿素a、b含量、气孔密度和气孔长度等生理指标的变化较小，说明二者对于颗粒物污染的抗性较强，这可能与针叶树种能分泌脂类物质提升自身的抑菌和抗污染能力有关[27,32]。
通过主成分分析法得出树种综合抗污染能力的得分依次为雪松、圆柏、女贞、石楠、大叶黄杨、海桐和南天竹。可见，雪松和圆柏的综合抗污染能力较强，是因为二者滞尘能力强，同时在遭受污染时生理指标变化小即对颗粒物污染的抗性较强，因此二者拥有较强的综合抗污染能力。
4. 结论
（1）树种滞尘能力与叶表面结构（沟槽、中脉、毛状体和气孔等）密切相关，叶表面粗糙的树种滞尘能力更强。不同程度污染下树种的滞尘量不同，污染越严重的地区树种滞尘量越高。
（2）大部分树种的叶绿素a、b含量在污染严重地区相对较低，丙二醛含量在污染严重地区相对较高。树种的滞尘量与生理指标存在显著相关性，不同树种在遭受颗粒物污染时生理指标响应程度不同。
（3）综上所述，今后在郑州治理大气粉尘污染、进行城市绿化时，还需将滞尘能力、不同植物叶表结构进行综合考虑，应优先选用雪松、圆柏这种综合抗污染能力较强的树种从而提高城市环境质量。
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图 1 生长发育过程各个生理指标的变化
注：A-生长发育过程还原糖含量的变化；B-生长发育过程可溶性总糖含量的变化；C-生长发育过程淀粉含量的变化。
Figure 1. Physiological changes on Bikeqi yam during tuber development
Note: A-on reducing sugars; B-on soluble sugars; C-on starch.
表 1 毕克齐山药在块茎膨大过程内源激素含量变化
Table 1 Changes on endogenous hormones during tuber enlargement of Bikeqi yam
[单位: ng·g−1（FW）] 项目 Item 105 d 120 d 135 d 150 d 165 d 生长素 IAA 24.697±1.82 b 38.542±1.76 b 46.454±3.46 a 37.793±2.41 b 48.012±2.68 a 玉米素 ZR 5.295±0.23 b 6.97±0.39b 8.129±0.45 ab 9.39±0.72 a 6.751±0.36 b 脱落酸 ABA 33.274±1.93 bc 33.564±0.03 bc 28.402±1.70 c 40.707±2.11 b 81.939±1.88 a 茉莉酸 JA 11.976±0.43 b 12.678±0.39 b 15.806±1.02 ab 13.541±0.92 b 21.276±1.46 a 赤霉素 GA3 5.484±0.44 a 2.538±0.09 c 4.072±0.36 bc 3.209±0.20 bc 3.69±0.26 bc 异戊烯基腺苷 IPA 4.103±0.20 b 8.005±0.30 a 5.943±0.37 ab 4.202±0.21 b 4.419±0.27 b 水杨酸 SA 52.308±30.38 b 88.763±63.26 ab 19.226±10.83 b 81±37.48 ab 234.867±111.44 a 注：同行不同小写字母表示在0.05水平上差异显著。
Note: Data with different lowercase letters indicate significant differences at 0.05 level.
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表 2 毕克齐山药内源激素与形态、生理指标相关性
Table 2 Correlation between endogenous hormones and morphology and physiology of Bikeqi yam tubers
项目
Item块茎长度
Length块茎周长
Circumference块茎直径
Diameter块茎鲜重
Fresh
weight块茎干重
Dry
weight淀粉含量
Starch
content还原糖含量
Reducing sugar
content可溶性总糖含量
Total soluble
sugar contentIAA ZR ABA JA GA3 IPA SA 块茎长度
Length0.756 0.757 0.674 0.679 0.375 −0.78 −0.940* 0.841 0.562 0.431 0.531 −0.892* 0.435 0.494 块茎周长
Circumference1.000** 0.922* 0.981** 0.719 −0.823 −0.839 0.906* 0.589 0.64 0.833 −0.425 −0.161 0.553 块茎直径
Diameter0.924* 0.982** 0.715 −0.822 −0.838 0.904* 0.588 0.643 0.833 −0.425 −0.162 0.557 块茎鲜重
Fresh weight0.972** 0.489 −0.84 −0.75 0.692 0.657 0.665 0.694 −0.43 −0.362 0.591 块茎干重
Dry weight0.646 −0.817 −0.771 0.807 0.602 0.677 0.804 −0.36 −0.321 0.579 淀粉含量
Starch content−0.617 −0.611 0.767 0.542 0.072 0.524 −0.061 −0.04 −0.082 还原糖含量
Reducing sugar content0.927* −0.732 −0.932* −0.21 −0.375 0.673 −0.034 −0.170 可溶性总糖含量
Total soluble sugar content−0.883* −0.773 −0.289 −0.494 0.805 −0.315 −0.293 IAA 0.483 0.479 0.779 −0.533 0.227 0.433 ZR −0.116 0.043 −0.575 0.022 −0.159 ABA 0.871 −0.118 −0.378 0.975** JA −0.107 −0.242 0.787 GA3 −0.612 −0.252 IPA −0.222 注：*在0.05水平，相关性显著。**在0.01水平，相关性极显著。表5、6同。
Note:*Significant correlation （P＜0.05）; **Extremely significant correlation （P＜0.01）. Same for Tables 5 and 6.
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表 3 与内源激素合成相关基因的基因编号、基因代号和基因注释信息
Table 3 Number, code, and information on genes associated with endogenous hormone synthesis in Bikeqi yam tubers
项目
Item基因
ID Gene ID基因代号
Gene code基因注释信息
Gene annotation information与IAA合成相关基因 Genes related to IAA synthesis Unigene0016848 IAA 1 生长素响应蛋白基因 Auxin response protein gene Unigene0021936 IAA 2 生长素响应蛋白基因 Auxin response protein gene Unigene0023040 IAA 3 生长素响应蛋白基因 Auxin response protein gene Unigene0025388 IAA 4 IAA-氨基酸水解酶 ILR1基因 IAA-amino acid hydrolase ILR1 gene Unigene0027417 IAA 5 IAA-氨基酸水解酶 ILR1基因 IAA-amino acid hydrolase ILR1 gene Unigene0027794 IAA 6 生长素响应蛋白基因 Auxin response protein gene Unigene0028701 IAA 7 生长素响应蛋白基因 Auxin response protein gene Unigene0028916 IAA 8 生长素响应蛋白基因 Auxin response protein gene Unigene0030426 IAA 9 生长素响应蛋白基因 Auxin response protein gene 与 GA3合成相关基因 Genes related to GA3 synthesis Unigene0002430 GA3 1 赤霉素2-β-双加氧酶 Gibberellin 2-β-dioxygenase Unigene0019924 GA3 2 赤霉素2-β-双加氧酶 Gibberellin 2-β-dioxygenase Unigene0021502 GA3 3 赤霉素2-β-双加氧酶 Gibberellin 2-β-dioxygenase Unigene0021503 GA3 4 赤霉素2-β-双加氧酶 Gibberellin 2-β-dioxygenase Unigene0027812 GA3 5 赤霉素20氧化酶 Gibberellin 2-β-dioxygenase Unigene0023907 GA3 6 赤霉素调节蛋白基因 Gibberellin regulatory protein gene Unigene0024440 GA3 7 赤霉素调节蛋白基因 Gibberellin regulatory protein gene Unigene0026445 GA3 8 赤霉素调节蛋白基因 Gibberellin regulatory protein gene Unigene0020765 GA3 9 赤霉素调节蛋白基因 Gibberellin regulatory protein gene
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表 4 与内源激素合成相关基因的rpkm平均值
Table 4 Average rpkm of genes associated with endogenous hormone synthesis
项目
Item基因ID
Gene ID基因代号
Gene code105 d 120 d 135 d 150 d 165 d 与IAA合成相关基因
Genes related to IAA synthesisUnigene0016848 IAA 1 95.82±30.63 65.29±44.90 64.25±22.21 26.73±12.83 26.68±10.96 Unigene0021936 IAA 2 14.49±2.45 8.08±6.19 3.64±2.22 2.95±3.33 3.57±0.87 Unigene0023040 IAA 3 213.97±40.34 119.15±61.21 132.16±54.901 48.88±36.07 39.56±9.26 Unigene0025388 IAA 4 4.61±3.19 5.45±0.97 8.84±2.12 1.18±0.84 0.00 Unigene0027417 IAA 5 11.82±1.17 7.21±3.44 5.10±1.42 1.48±1.15 3.18±0.68 Unigene0027794 IAA 6 2.28±0.33 0.82±0.67 0.53±0.42 0.28±0.39 0.00 Unigene0028701 IAA 7 60.78±12.10 30.43±21.84 77.84±20.86 50.67±17.82 21.64±5.46 Unigene0028916 IAA 8 127.67±26.48 40.53±21.48 66.59±24.93 35.91±11.76 14.06±1.25 Unigene0030426 IAA 9 7.79±1.10 2.82±3.12 3.91±1.72 0.36±0.51 2.20±0.80 与GA3合成相关基因
Genes related to GA3 synthesisUnigene0002430 GA3 1 24.60±5.23 24.72±10.21 18.71±6.22 5.74±6.31 2.92±0.83 Unigene0019924 GA3 2 4.80±1.80 0.62±0.60 1.20±1.54 0.00 0.00 Unigene0021502 GA3 3 4.02±1.56 1.21±1.06 3.05±2.99 2.34±1.78 0.00 Unigene0021503 GA3 4 5.82±3.34 5.51±2.87 5.20±2.06 6.88±7.74 0.00 Unigene0027812 GA3 5 13.12±2.80 1.38±1.23 2.59±0.96 1.91±0.92 5.69±1.14 Unigene0023907 GA3 6 16.76±10.56 4.20±5.94 0.67±0.60 0.08±0.12 0.42±0.60 Unigene0024440 GA3 7 176.89±19.66 189.53±72.98 110.84±19.67 80.80±39.49 423.10±68.62 Unigene0026445 GA3 8 47.20±12.01 32.18±34.09 51.94±10.28 74.13±97.99 203.55±60.52 Unigene0020765 GA3 9 11.95±2.51 1.74±1.95 4.61±2.35 0.55±0.78 0.00
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表 5 内源激素IAA含量与其合成相关基因表达量的相关性分析
Table 5 Correlation between IAA and expression of IAA synthesis-related gene
项目
ItemIAA含量
IAA contentIAA 1 IAA 2 IAA 3 IAA 4 IAA 5 IAA 6 IAA 7 IAA 8 IAA 9 IAA含量 IAA content −0.681 −0.875 −0.719 −0.046 −0.744 −0.902* −0.230 −0.799 −0.644 IAA 1 0.868 0.992** 0.669 0.956* 0.912* 0.482 0.898* 0.916* IAA 2 0.869 0.218 0.961** 0.966** 0.128 0.833 0.869 IAA 3 0.638 0.944* 0.936* 0.547 0.946* 0.936* IAA 4 0.442 0.340 0.700 0.481 0.453 IAA 5 0.944* 0.245 0.855 0.937* IAA 6 0.373 0.944* 0.904* IAA 7 0.643 0.418 IAA 8 0.911* IAA 9
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表 6 内源激素GA3含量与其合成相关基因表达量的相关性分析
Table 6 Correlation between GA3 and expression of GA3 synthesis-related gene
项目
ItemGA3含量
GA3 contentGA3 1 GA3 2 GA3 3 GA3 4 GA3 5 GA3 6 GA3 7 GA3 8 GA3 9 GA3含量 GA3 content 0.256 0.863 0.680 0.020 0.900* 0.737 −0.007 −0.041 0.872 GA3 1 0.652 0.557 0.511 0.267 0.648 −0.400 −0.803 0.673 GA3 2 0.765 0.306 0.876 0.958* −0.185 −0.416 0.991** GA3 3 0.728 0.468 0.620 −0.730 −0.704 0.826 GA3 4 −0.096 0.277 −0.957* −0.910* 0.354 GA3 5 0.873 0.224 0.058 0.827 GA3 6 −0.085 −0.383 0.914* GA3 7 0.854 −0.265 GA3 8 −0.469 GA3 9
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