Physiological Races of Magnaporthe grisea and Disease-Resistant Rice in Fujian
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摘要:目的 了解近年来福建省稻瘟病菌生理小种组成和福建省主栽水稻品种的稻瘟病抗性情况,可为合理布局抗病品种和稻瘟病抗性育种提供科学依据。方法 于2017–2019年收集福建省17个县市(地区)的中稻稻瘟病穗颈瘟样本,分离单孢用7个中国鉴别品种进行分类鉴定,并从中筛选出60个福建省内具有代表性的稻瘟病菌株,室内喷雾接菌32个福建省主栽水稻品种,同时用9个稻瘟病抗性基因分子标记检测这32个主栽品种。结果 7个鉴别品种的鉴定分类结果显示,稻瘟病生理小种ZA群出现频率为39.48%,为优势种群;用60个代表性生理小种室内接菌鉴定结果显示,这些生理小种平均致病率为23.28%,相对较低,说明福建省推广的主栽水稻品种的抗瘟性相对较好;鉴定筛选出宽抗谱水稻品种15份,其中隆两优华占、两优332的抗谱最广,建议在生产上推广利用。结论 福建省的稻瘟病生理小种已由早期的以ZB、ZC群为优势种群逐渐转变为以ZA群为优势种群,这与近年来甬优系列品种的大面积推广有关。在抗稻瘟病的品种布局上应优选抗谱宽度大的品种,同时在新品种推广种植中,应追溯宽抗谱水稻品种的致病生理小种来源地,尽量避开可能致使拟推广品种感病的生理小种所在地区。Abstract:Objective Physiological races of Magnaporthe grisea, the major pathogen of rice blast disease in Fujian in recent years, and the rice varieties resistant to the infection were studied to understand the fungal distribution and provide a clue for breeding to prevent the disease.Method Microbial samples from the diseased rice in 17 localities in the province were collected from 2017 to 2019. Monospores were isolated and classified by comparing with 7 species with known identifications. From them, 60 distinctive strains were sprayed indoor on 32 local rice varieties to detect the presence of 9 molecular markers of rice blast resistance genes on the inoculated rice plants.Result Using the 7 specimens with known identification and classification for comparison, the ZA group with an occurrence frequency at 39.48% was found to be the dominant physiological race of rice blast. Inoculation of the 60 physiological races on the 32 rice varieties showed an average pathogenicity rate of 23.28%. The relatively low infection rate suggested that most of the local rice were blast resistant to varying degrees. Subsequently, 15 of the rice varieties with broad resistance spectra were identified. Of which, Longliangyouhuazhan and Liangyou 332 exhibited the broadest spectra and were considered suitable for further applications.Conclusion The dominant physiological race of M. grisea appeared to have gradually changed over recent years from ZB and ZC to ZA group in Fujian. The transformation might relate to the large-scale promotion of the Yongyou rice series during the time. Consequently, it would be prudent in selecting rice varieties with a broad-spectrum on blast resistance for promotion. And, prior to introducing a new variety, an understanding of the origin of pathogenic physiological races would be necessary to preclude areas that are susceptible to the spread of the disease for the cultivation.
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Keywords:
- Rice blast /
- resistance identification /
- resistance spectrum /
- resistance genes /
- molecular markers
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0. 引言
【研究意义】鸡传染性支气管炎(Infectious bronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)感染引起的一种急性、接触性传染性病,被世界兽医局列为禽病B类传染病[1]。根据IBV对宿主组织的亲嗜性及引起的主要症状,可将其划分为呼吸系型、肾型和肠型等。IBV基因型较多且不同类型毒株之间交叉免疫保护的能力弱,导致该病的防控难度较大,至今IB仍是妨碍世界养鸡业健康发展的主要疫病之一[2-3]。【前人研究进展】IBV基因组为不分节的单股正链RNA,全长约27.6 kb,囊括6种亚基因组 mRNA(1~6),其中mRNA2、mRNA3、mRNA4和mRNA6分别编码4个结构蛋白:纤突蛋白(S)、小膜蛋白(E)、膜蛋白(M)和核蛋白(N)[4-7]。S蛋白与宿主细胞膜上的病毒受体结合后被宿主细胞的蛋白酶裂解为N端的S1蛋白和C端的S2蛋白[4]。S1蛋白是IBV产生感染性、致病性及组织嗜性的主要蛋白。不同IBV毒株间S1基因变异较大,其编码的氨基酸差异在2%~25%[8-9]。由于IBV复制依赖的RNA聚合酶缺乏校正能力,以及疫苗的频繁使用,致使病毒在复制过程中容易发生变异或重组[10-13]。S1基因核苷酸序列的点突变、插入、缺失或重组是导致IBV基因型较多的主要原因,国内外学者开展了许多基于S1 基因的序列差异分析研究工作[14-17]。国内外学者在IBV的病原学、流行与分布、分子遗传变异机制、IBV诱导的天然免疫应答、体外培养、诊断技术和防控措施等方面都有深入研究。然而,由于IBV自身变异频率高以及频繁地使用疫苗加剧了野毒株的变异压力,导致病毒进化加快。因此,对IBV的流行病学和分子遗传变异情况进行监测,已成为有效防控IBV的重要组成部分。【本研究切入点】近年来,福建省IBV流行发生频繁,2021年福建地区IBV的流行及变异情况亟需开展相关研究。【拟解决的关键问题】在福建地区疑似发生IB的临床样品中分离到2株病毒,通过对鸡胚致病性试验、电镜观察以及RT-PCR进行鉴定确认分离到的2株病毒均为IBV,并进一步对2株IBV分离株的 S1基因进行克隆、测序及序列分析,以期为福建省有效防控IB提供科学依据。
1. 材料与方法
1.1 病料来源、SPF鸡胚及主要试剂
2021年在福州市、南平市鸡场采集疑似IB病死鸡脏器组织样品。10日龄SPF鸡胚购自广东大华农动物保健品股份有限公司SPF实验动物中心;IBV毒株由本研究室分离、鉴定及保存。核酸提取试剂盒(EasyPure® viral DNA/RNA kit)、反转录试剂盒(TransScript® One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis Super Mix)、克隆试剂盒(pEASY®-Blunt Zero Cloning kit)均购自北京全式金生物技术有限公司;DNA纯化回收试剂盒(TianGen·Universal DNA Purification kit)购自天根生物技术有限公司;高保真酶(2 ×CataAmp High Fidelity PCR Mix)购自爱博泰克生物技术有限公司;DL2000 DNA Marker购自大连宝生物有限公司。
1.2 引物设计
下载GenBank中收录的IBV S1全基因序列,利用Oligo7.0软件设计1对特异性引物,上游引物S1F:5′-ACTGAACAAAAGACCGACT-3′;下游引物S1R: 5′-GGCACTATCATCTTTAACGAAC-3′,扩增片段大小为1 770 bp;IBV鉴定引物参照参考文献[17]设计,由福州尚亚生物技术有限公司合成。
1.3 样品处理
在生物安全柜中将组织剪碎,每克组织加入4 mL无菌PBS溶液研磨;加入2000 UI·mL−1青霉素和2000 μg·mL−1链霉素,4 ℃作用4 h,−70 ℃冰箱反复冻融3次,6000 r·min−1,4 ℃离心10 min,取上清,分装保存;取部分上清,平板划线,37 ℃过夜培养,确定有无细菌污染,并将无细菌生长的样品冻存。
1.4 病毒分离与电镜鉴定
将1.3中上清经0.22 µm过滤器过滤后取200 µL接种于10日龄SFP 鸡胚尿囊腔中,置于37 ℃恒温培养箱中孵育。剔除24 h内死亡的鸡胚。收取48~120 h内死亡的鸡胚, 4 ℃冰箱静置12 h以上;无菌收取尿囊液,将收取的尿囊液在SPF鸡胚中盲传4代后进行PCR鉴定。取第4代 PCR 鉴定为阳性的鸡胚尿囊液2 mL,参照参考文献[18]处理,电镜下观察病毒形态。
1.5 核酸提取和RT-PCR鉴定
按EasyPure® viral DNA/RNA kit说明书提取尿囊液中的核酸。按照TransScript® One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis Super Mix试剂盒的操作说明书对提取的RNA进行反转录,反转录后的cDNA取3 µL、2×CataAmp High Fidelity PCR Mix 10 µL,上/下游引物(10 µmol·L−1) 各1 µL,无菌去离子水补足至20 µL。反应条件:95 ℃ 预变性5 min;95 ℃热变性 30 s,55 ℃退火30 s,72 ℃ 延伸15 s,35个循环;72 ℃ 终延伸7 min。反应结束后取7 µL扩增产物于1%琼脂糖凝胶上进行电泳,电泳条件为125 V、25 min。
1.6 IBV分离株S1基因克隆测序
提取盲传后第4代鸡胚尿囊液中的病毒总RNA。参照TransScript® One-Step gDNA Removal and cDNA Synthesis Super Mix试剂盒的操作说明对1.5中提取的RNA进行反转录,反转录后的cDNA取3 µL、2×CataAmp High Fidelity PCR Mix 10 µL,S1F/S1R引物(10 µmol·L−1) 各1 µL,无菌去离子水补足至20 µL。反应条件为:95 ℃预变性5 min;95 ℃ 30 s,57 ℃ 30 s,72 ℃ 2 min,35个循环;72 ℃ 延伸10 min,4 ℃保存。反应结束后取7 µL扩增产物于1%琼脂糖凝胶上进行电泳,电泳条件为125 V、25 min。PCR产物回收纯化后连接于pEASY®-Blunt Zero 克隆载体上并转化至Trans1-T1感受态细胞中,经菌落PCR检测阳性的单个菌落进行扩繁并提取质粒,阳性质粒送往福州尚亚生物技术有限公司进行测序。
1.7 IBV分离株S1基因序列分析
利用DNAStar Lasergene 7软件对2株IBV分离株的S1基因测序结果进行拼接并上传至GenBank数据库。采用MEGA7.0软件对2株分离株的S1基因与GenBank数据库收录的有代表性的37株IBV参考株(表1)的S1基因序列进行比对分析,构建S1基因的遗传进化树。使用SimPlot3.5.1和 RDP4.101软件进行分离株S1基因遗传重组分析。
表 1 IBV参考毒株Table 1. IBV reference strains毒株 Virus 登录号 Locus 毒株 Virus 登录号 Locus Ma5
H120
LDT3
4/91
H52
28/86
M41
G13-1
Holte
UK/7/93
Italy-02
TW2575/98
3468/07
JP9758
TA03
GX-NN-6
TC07-2
PSH050513
QXIBVAY561713
FJ888351
AY702975
KF377577
EU817497
AY846750
DQ834384
L14069
L18988
Z83979
AJ457137
DQ646405
EU822336
AY296746
AY837465
JX291985
GQ265948
DQ160004
AF193423ZJ971
L-1148
A2
LX4
HB08
HN08
CK/CH/GD/HY09
CK/CH/HN/HN09
CKCHJSLYG1911-8
CKCHJSLYG1911-10
CKCHJSLYG1911-11
CK/CH/LGX/091109
CK/CH/LDL/07II
X
CK/CH/LCQ/08II
ck/CH/LGX/091110
CKCHJSLYG1912-1
CK CH GD LZ12-4AF352313
DQ431199
AY043312
AY338732
GQ265934
GQ265940
HQ018887
HQ018886
MW044574
MW044575
MW044583
KF411041
EU563940
FJ8298882
GQ258305
HM194643
MW044590
KC6922772. 结果与分析
2.1 病毒分离鉴定结果
10日龄SPF鸡胚接种2种病料研磨液后,鸡胚陆续出现死亡。与对照组相比,接毒组表现发育不良、胚体蜷曲、弥漫性出血(图1)。分离株4代SPF鸡胚尿囊液经1%磷钨酸负染后电镜下可见直径约80~120 nm、略呈圆形的病毒粒子,表面有松散的冠状突起,与冠状病毒特有的形态学特征相一致(图2)。通过RT-PCR对4代鸡胚尿囊液进行检测,结果扩增出大小约800 bp的目的片段,而阴性对照无特异性扩增片段(图3)。将2株分离株分别命名为FJ-NP01(南平)和FJ-FZ01(福州)。
2.2 IBV分离株S1基因克隆测序
利用设计引物对2株IBV分离株的S1基因进行扩增,并设置阴、阳性对照。从图4中可见,在1 700 bp左右出现与预期目的条带大小相符的片段。对经PCR鉴定为阳性的质粒送往测序公司进行测序,序列拼接显示FJ-NP01株和FJ-FZ01株S1基因长度分别为1629 nt和1620 nt,分别编码543 aa和540 aa。FJ-NP01株和FJ-FZ01株S1基因序列提交至GenBank,获得的登录号分别为ON548486和ON548487。
2.3 IBV分离株S1基因遗传进化、同源性及裂解位点分析
将分离株序列与GeneBank中下载的37株IBV S1基因参考序列,利用MEGA7软件绘制S1基因的系统进化树。结果显示:FJ-NP01株和FJ-FZ01株与所有参考毒株共同形成8个不同的进化分支;其中FJ-FZ01株与 QXIBV为代表的基因型I 在同一进化分支中;分离株FJ-NP01在基因型Ⅳ进化分支中;2株分离株与国内常用Mass型疫苗株进化距离均较远(图5)。核苷酸序列和推导的氨基酸序列同源性比对分析结果显示,2株分离株间的核苷酸和氨基酸同源性较低,分别为83.2%和79.6%; FJ-FZ01株与基因型I分支的所有参考毒株间核苷酸和氨基酸同源性分别为91.9%~98.1%和 94.5%~95.6%; FJ-NP01株与基因型Ⅳ分支的所有参考株核苷酸和氨基酸同源性分别为94.3%~95.7%和92.5%~94.7%;2株分离株与我国使用的Mass型常规疫苗核苷酸和氨基酸序列同源性仅为75.7%~76.3%和77.1%~83.5%。推导的氨基酸序列显示,FJ-FZ01株 S1基因裂解位点为HRRRR,与基因型I分支所有参考毒株裂解位点一致;FJ-NP01株 S1基因裂解位点为HRRKR,与已报道的基因型Ⅳ的IBV分离毒株的裂解位点不同,与基因型Ⅵ参考毒株TC07-2的裂解位点一致。
2.4 IBV分离株S1基因重组分析
利用SimPlot 3.5.1软件对2株分离株的S1基因序列进行重组分析,发现FJ-NP01株用SimPlot和BootScan方法分析均可推测亲本毒株CK CH GD LZ12-4和L-1148出现交叉,预示可能存在基因重组。利用RDP 4.101软件对重组事件进行验证,结果显示FJ-NP01株是由基因型Ⅳ毒株CK CH GD LZ12-4与基因型I 毒株L-1148在S1基因处发生重组而产生的新毒株,其核苷酸序列1438~1506 nt与推测的亲本毒株CK CH GD LZ12-4同源性达97%,其他S1基因核苷酸序列与推测的亲本毒株L-1148同源性达95.9%,RDP 4.101软件分析计算的P值为6.974×10−8(表2)。
表 2 RDP 4. 101软件分析 IBV 分离株的 S1 基因遗传重组结果Table 2. Recombinant results of S1 of IBV isolate analyzed by RDP 4. 101 software重组
Recombinant破裂点
Break points主要亲本
Major parent次要亲本
Minor parentP值
P value毒株
Strain基因型
Genotype头端
Begin/nt末端
End/nt命名
Name基因型
Genotype同源性
Homology/%命名
Name基因型
Genotype同源性
Homology/%FJ-NP01 Ⅳ 1438 1506 CK CH GD LZ12-4 Ⅳ 97% L-1148 I 95.9 6.974×10−8 3. 讨论
自1931年美国学者Schalk和Hawn首次报道IB以来,该病至今仍是影响世界家禽养殖业发展的重要传染性疾病之一[14]。究其原因乃是IBV出现了越来越多的基因型变异株,以及弱毒苗的广泛使用在某种程度上加快了病毒本身的变异,导致该病的防控难度日益加大,不可否认的是疫苗在控制IB的发生中发挥着重要作用,然而随着变异株的不断出现,研制出安全、高效、广谱的疫苗则是今后科研工作者的重要研究方向。
本研究从福建地区疑似发生IB的鸡场中分离到了2株病毒,通过电镜观察和RT-PCR方法进行了鉴定,确认分离到的病毒均为IBV,分别命名为FJ-NP01和FJ-FZ01;进一步分析发现FJ-NP01株属于基因型Ⅳ,FJ-FZ01株属于基因型I。
S1基因是当前研究IBV遗传变异与进化分析的靶标基因,通过分析S1基因序列有助于监测IBV的流行态势[16]。本研究通过对FJ-FZ01株和FJ-NP01株 S1基因进行克隆测序分析;系统进化树分析表明FJ-FZ01株属于基因型I,与位于同一分支的参考毒株相比,核苷酸序列及其推导的氨基酸序列同源性极高,分别在91.9%~98.1%和 94.5%~95.6%,且具有典型HRRRR裂解位点特征。基因型I毒株是我国IBV主要流行毒株,据统计50%~60%的IB病例由基因型I引起。李彬等[16]对2019–2021年我国29个省级行政区IBV分型统计结果显示,基因型I仍然是主要流行的毒株,且有不断扩大的趋势。Feng等[5]报道对中国2011–2012年华南地区分离的62株IBV有32株属于基因型I。本研究分离的 FJ-FZ01株亦属于基因型I,与国内主要流行毒株一致。然而,基因型I毒株与现有Mass型疫苗株的亲缘关系较远,导致Mass型疫苗不能对基因型I毒株提供完全保护。基因重组是导致众多IBV变异毒株出现的原因之一,重组可发生在疫苗株之间、疫苗毒株与野毒株之间及野毒株之间[3]。陈彤等[19]对合肥分离株 CK/CH/GX/LC17-1的 S1 基因重组分析发现,该毒株是由疫苗株Ark型ArkDPI毒株与Mass型Ma5毒株S1基因发生了重组形成的新毒株。吴倩倩等[20]对河南IBV分离株CK/CH/HN/NY1206/2017、CK/CH/HN/XY911/2017 进行重组分析,发现2株分离毒株均是由4/91(CHⅡ)基因型毒株 LZ07 和 JP/Saitama/2006 重组产生的新毒株。本研究通过SimPlot和RDP软件对FJ-NP01株的S1基因序列进行遗传重组分析,发现FJ-NP01株是由基因型Ⅳ毒株 CK CH GD LZ12-4与基因型I毒株L-1148在S1基因处发生重组而产生的新毒株,其核苷酸序列1438~1506 nt,与推测的亲本毒株CK CH GD LZ12-4同源性达97.0%,其他S1基因核苷酸序列与推测的亲本毒株L-1148同源性达95.9%,这类重组变异株在福建地区尚无相关报道。另外,本研究发现重组变异株FJ-NP01 S1基因裂解位点为HRRKR,与已报道的基因型Ⅳ分离毒株的裂解位点不同,与基因型Ⅵ参考毒株TC07-2的裂解位点一致。因此,后续需进一步进行验证FJ-NP01株是否因为基因重组和裂解位点的改变,导致其毒力、致病性和组织嗜性等发生改变。
综上所述,本研究分离鉴定了2株IBV,通过对S1基因克隆测序分析结果显示,FJ-FZ01株与国内流行毒株一样,FJ-NP01株发生了重组变异,表明福建地区IBV流行较为复杂,现有Mass型疫苗在福建省可能起不到良好的免疫保护作用。因此,需加强对福建省IBV的流行病学监测,为新疫苗的研发提供参考资源,也为福建省IB防控提供科学依据。
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表 1 国际水稻研究所9级制标准
Table 1 International Rice Research Institute’s 9-level standards
级别 Level 表现 Expression 0 无病斑 No disease spots 1 叶片上产生针头状大小的褐点型病斑 Pinhead-sized brown spot-like disease spots are produced on leaves 2 稍大病斑 Slight serious disease spot 3 小圆形稍长的灰色病斑,边缘褐色,病斑直径1~2 mm Small round and slightly long gray lesion with brown edge and diameter of 1–2 mm 4 典型的纺锤形病斑, 长1~2 cm,通常局限在两条主脉间,危害面积不超过叶面积的2%
A typical spindle-shaped lesion, 1–2 cm long, is usually confined between the two main veins, and its damage area does not exceed 2% of the leaf area.5 典型病斑,危害面积不超过叶面积的10% Typical disease spots, the damage area does not exceed 10% of the leaf area 6 典型病斑,危害面积为叶面积的11%~25% Typical disease spots, the damage area is 11%–25% of the leaf area 7 危害面积为叶面积的26%~50% The damage area is 26%-50% of the leaf area 8 典型病斑,危害面积为叶面积的51%~75% Typical disease spots, the damage area is 51%–75% of the leaf area 9 典型病斑,危害面积为叶面积的76%至全叶枯死 Typical disease spots, the damage area is 76% of the leaf area to the whole leaf dead 表 2 32个福建省主栽水稻品种在接菌试验的抗瘟性鉴定结果
Table 2 Resistance of 32 local rice varieties inoculated with 60 physiological races of M. grisea
序号
Serial
number采集地
Collection area生理小种
Physiological
form品种代号 Variety code 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 1 光泽大陂 GuangzeDapi ZC15 R R R M R R R R R R R R R R R R R M S S R R R R M R R R R R R R 2 光泽良种场 GuangzeLiangzhongchang ZA47 R S R R R R R R R R R R R S S M R R S R R M S R R S R M R M R M 3 光泽良种场 GuangzeLiangzhongchang ZA39 R R R R R R R S R R R S R S S R R R S R R M S R R S S R R R R S 4 建阳将口 JianyangJiangkou ZC8 R S R R R R R R R R R R M S R R R M S R R S M M R R R R R R R R 5 建阳将口 JianyangJiangkou ZA39 M S R R R R R M R R M R M S S R R M S R R R S R R M R R R M R M 6 建阳将口 JianyangJiangkou ZB7 M S R R R R R M R R S R S S S R R R S R R S S R M M M R R R R M 7 建阳莒口 JianyangJukou ZA5 M S R R R R R S S R S R S S S M M S S R S R S S S S S R S R M M 8 建阳莒口 JianyangJukou ZA5 M R R M R R R R R R R M R S R R R R M R R S R R R R R R R R R R 9 建阳石宇 JianyangShiyu ZD4 R R R R R R R M R M R M R M S R R R S R R S S S R R R R R R R R 10 建阳石宇 JianyangShiyu ZD6 R M R M R R R R R R R M R R R R R R S R M R R R R M R R R R R R 11 建阳石宇 JianyangShiyu ZA5 R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R 12 建阳石宇 JianyangShiyu ZB2 R R R R R R R S R R S R S M R R R R S R R R R R S R R R R R R R 13 建阳石宇 JianyangShiyu ZA7 R M R R R R R R R R R S S R R R R R R R R R M R R R R R M R R R 14 建阳石宇 JianyangShiyu ZA48 R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R R M R R R R R R R 15 建阳石宇 JianyangShiyu ZB2 R R R R R R R R S R R R S S S R R R R S R R R R R R R R R R M R 16 建阳石宇 JianyangShiyu ZB2 R R R R R R R R S R R R S S S R R R R S R R R R R R R R R R M R 17 建阳石宇 JianyangShiyu ZA34 R R M R R M R R R R R R R R R R R M M S R R S R M R M R R R M R 18 建阳童游 JianyangTongyou ZB5 R S S S R R R R S R S R S S S S R R S S S S S R S S S S S R S S 19 建阳童游 JianyangTongyou ZG1 R R R R R R R R R R R S S R M M R R R R R R R R S S R S R M R R 20 建阳童游 JianyangTongyou ZG1 R R R R R R R R R R R R R S R R R R S R R R R R R R M R R R R R 21 龙岩上杭 LongyanShanghang ZD8 R M R M R R R S R R R R M S R R R R S R R R M R R R R R S R R S 22 龙岩上杭 LongyanShanghang ZA64 S S R R R R S R S R M M S S R R R M S R R R R R S R R R R R R R 23 龙岩上杭 LongyanShanghang ZF2 R R R R R R R R R R R R R R R R R R M R R R S R R R R R S R R S 24 龙岩上杭 LongyanShanghang ZG1 R R R R R R R R R R R R R M R R R R R R R R R R R R R R M R R M 25 浦城水北 PuchengShuibei ZC15 R R R R R R R R R R R R R M R R R R M R R R R R R R R R R R R R 26 浦城水北 PuchengShuibei ZD7 R R R R R R R R R R R R R R R R R R S R R R R R R R R M R R R R 27 浦城水北 PuchengShuibei ZB9 R R R R R R R R R R R R R R R R R R S R R R R R R R R R R R R R 28 三明将乐 SanmingJiangle ZB32 R R R R R R R R R R R R R M M R R R S R R R R R R R R R R R R R 29 三明将乐 SanmingJiangle ZA6 R R R R R R R R R R R R R R S R R R R R R R R R R S R R R R S R 30 三明将乐 SanmingJiangle ZA5 R R M R M R R R M R S R S S S R R R S R S R S R S R R R S R R R 31 三明将乐 SanmingJiangle ZB6 M R R R R R R R R R R M S S R R R R S R S R S R M M R R S R R S 32 三明将乐 SanmingJiangle ZA1 R R R R R R R S R R R R S R R S R R S R S R S R S R R R S R R S 33 三明将乐 SanmingJiangle ZA7 S M R R S R R R M S R M S S S R R S S S S R S S S S R R S S R S 34 三明将乐 SanmingJiangle ZD7 M R R M R M R M R M R M S S M M R M S M S R S M S M R S S M R S 35 三明将乐 SanmingJiangle ZC5 R R R R R R R R R R R R S S R R R R R R R R R R R R R R S R R S 36 三明将乐 SanmingJiangle ZD7 R R R R R R R R R R R S R S R M R R S R R R S R R R R R S R R R 37 三明将乐 SanmingJiangle ZA39 R R R R R R R R R R R R R S M R R R R R R R S R R R R R R R R S 38 三明宁化 ShanmingNinghua ZA5 R R R S R R R R M R S R M S S R R R S R M M S R R R M R R R R M 39 三明宁化 ShanmingNinghua ZA6 R R S S M M M M R R R M S R R R R S S S R R M R S S M R R R R R 40 三明宁化 ShanmingNinghua ZD7 S R S R M R R S R M R R S S R R R R R R S R S S S S R R R S M S 41 三明宁化 ShanmingNinghua ZC7 R S R M R R M M S S S R S S S M R R M R S R S R S S S R S R M S 42 三明宁化 ShanmingNinghua ZC5 R R R R R R M S R R R S M S R R R S R R R R R R R M M R R M R M 43 三明宁化 ShanmingNinghua ZB5 R R R R R R R R R R R R S R M R R R M R R R R R S S R R R R R R 44 三明泰宁 SanmingTaining ZC15 R R R R R R R R R R R R S S R R R R R R R R R R R M R R R R R R 45 邵武大布干 ShaowuDabugan ZC3 R R R R R R R R R R M R R R S M R R S R R R R R R R R R R R R R 46 邵武外南源 ShaowuWainanyuan ZA37 R M R R R R R R R M R M S R S R R R R R R R R R R R R R R R R S 47 邵武外南源 ShaowuWainanyuan ZA1 R S S M R M M S S S S R S S S S M M S R S R S M S S S R S R M S 48 邵武外南源 ShaowuWainanyuan ZD7 M S M R R R S S S R S S S S S S S S S R S R S M S S S R S R M M 49 邵武外南源 ShaowuWainanyuan ZD8 R R R R R R R R R R M R R S M R R R S R M R R R R M S R R R R M 50 松溪花桥 SongxiHuaqiao ZA5 R M R R M R R R R R R R R M R R R R R R R R R R R R R S M R R R 51 松溪花桥 SongxiHuaqiao ZA55 R R R R R R R R R R R R S R R R R R R R R R R R S R R R R R R R 52 松溪花桥 SongxiHuaqiao ZA1 R M R R R R R R M R R M M S R R M R S R S R M R R M S R M R R S 53 松溪花桥 SongxiHuaqiao ZB29 R R R R R R R R R R R R R M R R R R R M R R R S R R R S R R R R 54 松溪祖墩 SongxiZudun ZC6 R M R R R R M M M R R R R R M R R R R R R R M R R R R R R R R M 55 松溪祖墩 SongxiZudun A37 S R R R R R R M M R R R S M R R R M M S M R R R R S R R R R M S 56 松溪祖墩 SongxiZudun ZB31 S R R R M R R R R S R R M R S R R R R R R R R R R R R R R R R R 57 松溪祖墩 SongxiZudun ZC13 R R S R R R S M S M S R R S S R R R S R S R S R S S R R S R R R 58 武夷山五夫 WuyishanWufu ZD5 R R R R M M R R M R S S S S S M R M S S S R S S S M S R S R M R 59 武夷山五夫 WuyishanWufu ZA7 R R R M R R R M R R R R S S S R R M S R R R S R R R M R M R R R 60 武夷山五夫 WuyishanWufu ZA5 R R R R R R R R R R R R S S M R R R R R R M S M R S R R R R R M 注:表中R表示水稻品种抗生理小种;M表示水稻品种中感生理小种;S表示水稻品种感病生理小种。
Note: R means resistant race of rice varieties; M means resistant race of rice varieties; S means susceptible race of rice varieties.表 3 福建省60个稻瘟病菌株的致病率情况
Table 3 Pathogenicity of 60 rice blast strains from Fujian
序号
Serial number地区
Area生理小种
Physiological form致病率
Pathogenicity/%序号
Serial number地区
Area生理小种
Physiological form致病率
Pathogenicity/%1 光泽大陂
GuangzeDapiZC15 10.94 31 三明将乐
ShanmingJiangleZA7 48.44 2 光泽良种场
GuangzeLiangzhongchangZA39 29.69 32 三明将乐
ShanmingJiangleZA39 28.13 3 光泽良种场
GuangzeLiangzhongchangZA47 26.56 33 三明将乐
ShanmingJiangleZB6 28.13 4 建阳将口
JianyangJiangkouZA39 29.69 34 三明将乐
ShanmingJiangleZB32 9.38 5 建阳将口
JianyangJiangkouZB7 34.38 35 三明将乐
ShanmingJiangleZC5 17.19 6 建阳将口
JianyangJiangkouZC8 18.75 36 三明将乐
ShanmingJiangleZD7 12.5 7 建阳莒口
JianyangJiangkouZA5 57.81 37 三明将乐
ShanmingJiangleZD7 10.94 8 建阳莒口
JianyangJukouZA5 12.5 38 三明宁化
ShanmingNinghuaZA5 35.94 9 建阳石宇
JianyangShiyuZA5 1.56 39 三明宁化
ShanmingNinghuaZA6 42.19 10 建阳石宇
JianyangShiyuZA7 10.94 40 三明宁化
ShanmingNinghuaZB5 7.81 11 建阳石宇
JianyangShiyuZA34 17.19 41 三明宁化
ShanmingNinghuaZC5 12.5 12 建阳石宇
JianyangShiyuZA48 1.56 42 三明宁化
ShanmingNinghuaZC7 21.88 13 建阳石宇
JianyangShiyuZB2 17.19 43 三明宁化
ShanmingNinghuaZD7 53.13 14 建阳石宇
JianyangShiyuZB2 17.19 44 三明泰宁
SanmingTainingZC15 9.38 15 建阳石宇
JianyangshiyuZB2 17.19 45 邵武大布干
ShaowuDabuganZC3 17.19 16 建阳石宇
JianyangShiyuZD4 21.88 46 邵武外南源
haowuWainanyuanZA1 67.19 17 建阳石宇
JianyangShiyuZD6 10.94 47 邵武外南源
haowuWainanyuanZA37 67.19 18 建阳童游
JianyangtongyouZG1 20.31 48 邵武外南源
haowuWainanyuanZD7 17.19 19 建阳童游
JianyangTongyouZG1 7.81 49 邵武外南源
haowuWainanyuanZD8 9.38 20 建阳童游
JianyangTongyouZB5 65.63 50 松溪花桥
SongxiHuaqiaoZA1 9.38 21 龙岩上杭
LongyanShanghangZA64 29.69 51 松溪花桥
SongxiHuaqiaoZA5 6.25 22 龙岩上杭
LongyanShanghangZD8 21.88 52 松溪花桥
SongxiHuaqiaoZA55 28.13 23 龙岩上杭
LongyanShanghangZF2 10.94 53 松溪花桥
SongxiHuaqiaoZB29 10.94 24 龙岩上杭
LongyanShanghangZG1 4.69 54 松溪祖墩
SongxiZudunZA37 12.5 25 浦城水北
PuchengShuibeiZC15 3.13 55 松溪祖墩
SongxiZudunZB31 40.63 26 浦城水北
PuchengShuibeiZD7 1.56 56 松溪祖墩
SongxiZudunZC6 26.56 27 浦城水北
PuchengShuibeiZD8 3.13 57 松溪祖墩
SongxiZudunZC13 51.56 28 三明将乐
ShanmingJiangleZA1 57.81 58 武夷山五夫
WuyishanWufuZA5 29.69 29 三明将乐
ShanmingJiangleZA5 28.13 59 武夷山五夫
WuyishanWufuZA7 18.75 30 三明将乐
ShanmingJiangleZA6 32.81 60 武夷山五夫
WuyishanWufuZD5 23.44 表 4 宽抗谱品种在福建省内避免推广的地区
Table 4 Areas in Fujian where rice varieties with a broad resistance spectrum should be avoided
序号
Serial number品种
Variety采集点内避免推广的地区
Areas within collection points to avoid promotion1 和两优332 Heliangyou332 采集点范围内均适宜推广 2 隆两优华占 Longliangyouhuazhan 邵武外南源 Shaowu Wainanyuan 3 隆两优1988 Longliangyou 1988 三明将乐 SanmingJiangle 4 民优667 Mingyou667 三明将乐 SanmingJiangle、三明宁化 SanmingNinghua 5 科优16 Keyou16 三明将乐 SanmingJiangle、建阳童游 JianyangTongyou 6 晶两优534 Jingliangyou534 龙岩上杭 LongyanShanghang、松溪祖墩 SongxiZudun、邵武外南源 Shaowuwainanyuan 7 福两优366 Fuliangyou366 三明将乐 SanmingJiangle、三明宁化 SanmingNinghua、建阳童游 JianyangTongyou 8 隆两优锋占 Longyoufengzhan 三明将乐 SanmingJiangle、三明宁化 SanmingNinghua、建阳童游 JianyangTongyou、邵武外南源 ShaowuWainanyuan 9 广优688 Guangyou688 三明将乐 SanmingJiangle、松溪华侨 SongxiHuaqiao、建阳童游 JianyangTongyou、邵武外南源 ShaowuWainanyuan 10 梦两优黄莉占 Mengliangyouhuanglizhan 三明宁化 SanmingNinghua、建阳童游 JianyangTongyou、松溪花桥 SongxiHuaqiao、邵武外南源 ShaowuWainanyuan 11 微两优898 Weiliangyou898 三明将乐 SanmingJiangle、三明宁化 SanmingNinghua、松溪祖墩 SongxiZudun、邵武外南源 ShaowuWainanyuan、武夷山五夫 Wuyishanwufu 12 隆两优1377 Longliangyou1377 三明将乐 SanmingJiangle、龙岩上杭 LongyanShanghang、松溪祖墩 SongxiZudun、 13 晶两优华占 Jingliangyouhuazhan 三明将乐 SanmingJiangle、三明宁化 SanmingNinghua、邵武外南源 ShaowuWainanyuan、建阳莒口 JianyangJukou 14 浙优18 Zheyou18 建阳童游 JianyangTongyou、建阳马伏 JianyangMafu、建阳石宇 JianyangShiyu、建阳将口 JianyangJiangkou 15 K两优369 Kliangyou369 三明将乐 SanmingJiangle、三明宁化 SanmingNinghua、松溪花桥 SongxiHuaqiao、松溪祖墩 SongxiZudun、建阳石宇 JianyangShiyu 表 5 宽抗谱水稻材料的抗谱及含有抗病基因的情况
Table 5 Resistance spectrum and resistance gene-containing status of rice varieties with broad resistance spectra
品种
Variety抗谱
Resistance spectrum/%抗性基因数
Number of disease resistance genes含有的抗性基因
Contains resistance genes和两优332 Heliangyou332 100.00 3 Pita、Pi25、Pi2 隆两优华占 Longliangyouhuazhan 98.33 5 Pita、Pi25、Pi5、Pib、Pi2 隆两优1988 Longliangyou 1988 98.33 5 Pita、Pi25、Pi5、Pib、Pi2 民优667 Mingyou667 96.67 1 Pi5 科优16 Keyou16 96.67 2 Pita、Pi5 晶两优534 Jingliangyou534 95.00 5 Pita、Pi25、Pi5、Pib、Pi2 福两优366 Fuliangyou366 95.00 3 Pita、Pi5、Pib 隆两优锋占 Longyoufengzhan 93.33 5 Pita、Pi25、Pi5、Pib、Pi2 广优688 Guangyou688 91.67 3 Pita、Pid3、Pi5 梦两优黄莉占 Mengliangyouhuanglizhan 91.67 2 Pi5、Pi2 微两优898 Weiliang898 91.67 4 Pi5、Pib、Pit、Pi2 隆两优1377 Longliangyou1377 91.67 5 Pita、Pi25、Pi5、Pib、Pi2 晶两优华占 Jingliangyouhuazhan 91.67 4 Pi25、Pi5、Pib、Pi2 浙优18 Zheyou18 91.67 4 Pita、Pid3、Pib、Piz-t K两优369K liangyou369 90.00 4 Pita、Pi25、Pi5、Pi2 -
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