Analysis of Genetypes Related to Important Agronomic Traits of Purple Waxy Special Rice Variety Ziliangyou 737
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摘要:目的 解析紫糯特种稻紫两优737及其亲本的产量、品质相关性状的基因型构成,为该品种及其双亲在育种和生产上的进一步应用提供分子依据。方法 应用10个重要基因的13个分子标记,分析紫两优737及其亲本紫392S、福恢737在产量、品质等相关基因座位上的等位基因变化。结果 在7个基因座位上,紫两优737及其亲本均携带相同等位基因型。在穗实粒数主效基因Gn1a座位上均携带高产等位基因Ha-Gn1a;在粒重和粒长主效基因GS3座位上均携带长粒型等位基因MH-GS3;在种皮基因Pb座位上均携带紫色果皮等位基因型;在糯稻蜡质基因wx座位上均携带低直链淀粉含量等位基因型;此外在淀粉分支酶基因SBE1和SBE3以及极限糊精酶基因PUL基因座位上亦均携带相同等位基因型。在3个基因座位上,双亲携带不同等位基因型。在Hd3a座位上,紫392S、福恢737和紫两优737分别携带Hd3aNip、hd3aKasa和Hd3aNip/hd3aKasa;在Hd1座位上,分别携带Hd1jap、Hd1ind和Hd1jap/Hd1ind;在焦磷酸化酶大亚基基因AGPlar座位上,分别为Ⅰ型,Ⅱ型及Ⅰ/Ⅱ杂合型。结论 紫两优737重要农艺性状的遗传解析为其具有高产、优质、适应性好及种皮颜色等特点提供了分子证据,并为相关有利等位基因的进一步利用提供参考。Abstract:Objective This study was conducted to analyze the genotypes of yield and quality-related traits of the purple waxy special rice Ziliangyou 737 and its parents, and to provide molecular basis for the further application of this variety and its parents in breeding and production.Method Using 13 molecular markers of 10 important genes, the alleles of Ziliangyou 737 and its parents Ziliang392s and Fuhui 737 were analyzed in relation to yield and quality.Result In 7 gene loci, both Zizliangyou 737 and its parents carry the same allele genotype. The high-yield allele Ha-Gn1a was carried in the seat of Gn1a, the major gene of panicles number. The long grain allele MH-GS3 was carried in the GS3 locus of the major gene for grain weight and grain length. The alleles of purple pericarp were carried in the Pb locus of seed coat gene. All alleles with low amylose content in waxy gene wx locus were carried in glutinous rice. In addition, the same allelic genotype was carried in the starch branch enzyme genes SBE1 and SBE3 and the limit dextrin enzyme gene PUL gene locus. In three loci, parents carry different alleles. In the Hd3a seat, the Zi 392S, Fuhui 737 and Ziliangyou 737 carry Hd3aNip, hd3aKasa and Hd3aNip/hd3aKasa respectively. On the Hd1 seat, carry Hd1jap, Hd1ind and Hd1jap/Hd1ind respectively. In the large subunit gene AGPlar locus of pyrophosphorylase, there were type I, type II and hybrid type I/II, respectively.Conclusion The genetic analysis of important agronomic traits of Ziliangyou 737 provided molecular evidence for its high yield, high quality, good adaptability and seed coat color, and provided reference for further utilization of related favorable alleles
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Keywords:
- Purple waxy hybrid rice /
- molecular markers /
- genotyping /
- high yield /
- high quality
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0. 引言
【研究意义】黄麻(Corchorus capsularis L.)为一年生韧皮纤维作物,生产上有长果种和圆果种两个栽培种,根据用途可分为纤用黄麻和菜用黄麻。菜用黄麻主要作为蔬菜进行食用,在中国广西、广东、福建、重庆等地区均有栽培和食用黄麻嫩茎叶的习惯[1]。菜用黄麻叶含有丰富的粗蛋白、膳食纤维、维生素、氨基酸、矿物质及硒等微量元素,还含有多糖、总酚、总黄酮等生物活性成分,具有抗氧化、抗炎、缓解疼痛、抑制肿瘤、抑菌、润肠通便等功效[2−4]。近年来随着人们对人类健康的日益关注,植物天然活性成分引起了人们的极大关注,总酚、总黄酮、多糖等成分被广泛研究。品种、生育期、组织部位等显著影响植物天然活性成分的合成积累及含量[5]。因此研究不同生育期菜用黄麻叶总酚、总黄酮、多糖的积累特性,对菜用黄麻的合理采收和开发利用具有重要意义。【前人研究进展】不同作物品种在不同生育期生物活性物质成分含量变化存在显著差异。史冠莹等[6]研究表明产地气候、生长环境、生长期等因素均会影响香椿的物质组成及含量。徐建霞等[7]研究表明玉米须的总黄酮和多糖含量从未授粉期到成熟期呈下降的趋势,相同生长期不同品种的总黄酮和多糖含量均存在差异;安景舒等[8]研究表明不同梨品种间总酚和黄酮含量存在差异,且不同组织的总酚和黄酮含量显著差异;宋彪等[9]研究表明柚的总酚、总黄酮相对含量和积累量在果皮和果肉上存在显著的品种差异,成熟期总酚及总黄酮平均相对含量和积累量较膨大期升高。目前关于黄麻生物活性成分的研究主要集中在物质提取、抗氧化能力评估等方面[10−12],关于黄麻生物活性物质成分积累的研究相对较少。Adedayo等[13]研究表明不同食用黄麻品种的生物活性成分存在较大的差异;Yan等[14]研究表明长果种黄麻的整株、叶、茎的总黄酮及总酚含量存在显著差异;Biswas等[15]研究表明圆果种黄麻叶的总黄酮和总多酚含量分别在3.04~7.89 mg·g−1和5.12~7.61 mg·g−1,长果种黄麻叶的总黄酮和总多酚含量分别在5.26~13.66 mg·g−1和5.41~7.78 mg·g−1。冯湘沅等[16]研究表明圆果种黄麻叶多糖的含量高于长果种,两种多糖理化特征存在差异。【本研究切入点】虽然前人对黄麻叶的总酚、总黄酮、多糖等生物活性成分进行了研究报道,但多集中在某一特定时期,关于菜用黄麻不同生育期总酚、总黄酮、多糖的积累特性研究有待深入探讨。【拟解决的关键问题】以圆果种菜用黄麻桂麻菜1号和桂麻菜2号为试验材料,以市售秋葵、山药、油麦菜为对照,测定菜用黄麻苗期、打顶期、开花期、蒴果期叶的总酚、总黄酮和多糖含量,比较菜用黄麻与对照品种的差异,分析生育期与总酚、总黄酮、多糖含量的相关性,明确菜用黄麻叶总酚、总黄酮和多糖的积累特性,旨在为菜用黄麻的合理采收及开发利用提供参考依据。
1. 材料与方法
1.1 试验材料
供试菜用黄麻品种为圆果种黄麻桂麻菜1号和桂麻菜2号,由广西农业科学院经济作物研究所提供。山药、秋葵、油麦菜采购于南宁市蔬菜市场。
1.2 试验方法
田间试验采用随机区组设计,3次重复。5月10日播种,行长2.5 m,行距40 cm,株距10 cm,共10行,小区面积为10.0 m2。田间管理为常规管理,分别于苗期(6月10日)、打顶期(6月23日)、开花期(7月17日)、蒴果期(8月7日)进行取样。每次取样在小区中随机选取10株黄麻,采集植株嫩叶,将嫩叶置于烘箱中105 ℃杀青15 min后,60 ℃烘干至恒重,粉碎后放入干燥器中备用。
以市售采收期块根类蔬菜山药、荚果类蔬菜秋葵、叶菜类蔬菜油麦菜为对照,将其清洗干净后,于烘箱中105 ℃杀青15 min后,60 ℃烘干至恒重,粉碎后放入干燥器中备用。
1.3 测定项目及方法
总酚含量参照魏旭等的方法[17]进行测定;总黄酮含量参照中华人民共和国药典(2020版)沙棘总黄酮含量测定方法进行测定[18];多糖含量参照中华人民共和国药典(2020版)铁皮石斛多糖含量测定方法进行测定[18]。
1.4 统计分析
采用Excel 2019进行数据处理和作图,采用SPSS22.0进行Duncan's方差分析和Pearson相关分析。
2. 结果与分析
2.1 不同生育期总酚含量的变化
由表1可知,同一菜用黄麻品种在不同生育期的总酚含量存在差异,其中桂麻菜1号各生育期之间含量差异显著(P<0.05,下同)。2个菜用黄麻品种的总酚含量随生育期延长呈现先下降后上升的趋势,蒴果期的总酚含量显著高于其他生育期,分别为4.064 mg·g−1和3.852 mg·g−1,打顶期的总酚含量显著低于其他生育期。
表 1 不同生育期各品种总酚含量的变化Table 1. Total phenolics in different varieties at growth stages生育期
Growth stage总酚含量
Total phenolics content/(mg·g−1)桂麻菜1号
Guimacai No.1桂麻菜2号
Guimacai No.2山药
Chinese yam秋葵
Okra油麦菜
Lettuce苗期
Seedling stage3.631±0.036 Ba 3.614±0.022 Ba 0.710±0.005 Ad 2.625±0.046 Ab 2.453±0.022 Ac 打顶期
Topping stage2.769±0.065 Db 3.101±0.019 Ca 0.710±0.005 Ae 2.625±0.046 Ac 2.453±0.022 Ad 开花期
Flowering stage3.494±0.045 Ca 3.626±0.162 Ba 0.710±0.005 Ad 2.625±0.046 Ab 2.453±0.022 Ac 蒴果期
Capsule stage4.064±0.032 Aa 3.852±0.038 Ab 0.710±0.005 Ae 2.625±0.046 Ac 2.453±0.022 Ad 同一品种同列数据后不同大写字母表示不同生育期间差异显著(P<0.05),同行数据后不同小写字母表示不同品种间差异显著(P<0.05)。下同。
Different capital letters in the same column of the same cultivar indicated significant difference at P<0.05 between growth stage. Different lowercase letters in the same row indicated significant difference at P<0.05 between different varieties. Same for below.生育期相同时,2个菜用黄麻品种的总酚含量在苗期和开花期时差异不显著,打顶期时桂麻菜2号的总酚含量显著高于桂麻菜1号,而蒴果期时桂麻菜1号的总酚含量显著高于桂麻菜2号。3个对照品种的总酚含量依次为秋葵>油麦菜>山药,3个对照品种之间总酚含量差异显著。在整个生育期桂麻菜1号和桂麻菜2号的总酚含量均显著高于对照品种。
2.2 不同生育期总黄酮含量的变化
同一品种不同生育期菜用黄麻的总黄酮含量存在差异(表2)。桂麻菜1号的总黄酮含量随生育期的延长呈现先上升后下降的趋势,总黄酮含量依次为开花期>打顶期>蒴果期>苗期,开花期时总黄酮含量最高,达2.755 mg·g−1,与打顶期的含量差异不显著,但显著高于苗期和蒴果期;桂麻菜2号的总黄酮含量随生育期的延长呈现上升的趋势,总黄酮含量依次为蒴果期>开花期>打顶期>苗期,各生育期之间含量差异显著,蒴果期时总黄酮含量最高达4.755 mg·g−1,显著高于其他生育期。
表 2 不同生育期各品种总黄酮含量的变化Table 2. Total flavonoids in different varieties at growth stages生育期
Growth stage总黄酮含量
Total flavonoids content/(mg·g−1)桂麻菜1号
Guimacai No. 1桂麻菜2号
Guimacai No.2山药
Chinese yam秋葵
Okra油麦菜
Lettuce苗期
Seedling stage1.870±0.040 Cb 2.435±0.065 Da — — 1.245±0.015 Ac 打顶期
Topping stage2.745±0.015 Ab 3.170±0.090 Ca — — 1.245±0.015 Ac 开花期
Flowering stage2.755±0.005 Ab 4.085±0.075 Ba — — 1.245±0.015 Ac 蒴果期
Capsule stage2.485±0.015 Bb 4.755±0.155 Aa — — 1.245±0.015 Ac —表示未检出。
—indicates undetected.生育期相同时,桂麻菜2号的总黄酮含量均显著高于桂麻菜1号;3个对照品种仅油麦菜检测出含有总黄酮,其余两个品种未检出。2个菜用黄麻品种各生育期的总黄酮含量均显著高于对照品种油麦菜。
2.3 不同生育期多糖含量的变化
同一菜用黄麻品种不同生育期的多糖含量差异显著(表3)。随生育期的延长桂麻菜1号的多糖含量呈现波动上升的趋势,多糖含量依次为蒴果期>打顶期>苗期>开花期,蒴果期时多糖含量最高达3.175%,显著高于其他生育期;随生育期的延长桂麻菜2号的多糖含量呈现先下降后上升的趋势,多糖含量依次为蒴果期>苗期>打顶期>开花期,蒴果期时多糖含量最高达1.240%,显著高于其他生育期,苗期的多糖含量显著高于打顶期和开花期,打顶期和开花期的含量差异不显著。
表 3 不同育期各品种多糖含量的变化Table 3. Polysaccharides in different varieties at growth stages生育期
Growth stage多糖含量
Polysaccharides content/ %桂麻菜1号
Guimacai No.1桂麻菜2号
Guimacai No.2山药
Chinese yam秋葵
Okra油麦菜
Lettuce苗期
Seedling stage0.441±0.017 Cd 0.717±0.020 Bc 6.795±0.085 Ab 8.140±0.300 Aa 0.378±0.010 Ad 打顶期
Topping stage0.737±0.012 Bc 0.271±0.008 Cd 6.795±0.085 Ab 8.140±0.300 Aa 0.378±0.010 Ad 开花期
Flowering stage0.315±0.011 Dc 0.240±0.009 Cc 6.795±0.085 Ab 8.140±0.300 Aa 0.378±0.010 Ac 蒴果期
Capsule stage3.175±0.045 Ac 1.240±0.030 Ad 6.795±0.085 Ab 8.140±0.300 Aa 0.378±0.010 Ae 生育期相同时,桂麻菜1号在打顶期和蒴果期时多糖含量显著高于桂麻菜2号,在开花期时略高于桂麻菜2号但差异不显著;3个对照品种的多糖含量依次为秋葵>山药>油麦菜,各品种间差异显著;秋葵和山药的多糖含量显著高于2个菜用黄麻品种,桂麻菜1号在打顶期和蒴果期时多糖含量显著高于油麦菜,苗期时略高于油麦菜但差异不显著;桂麻菜2号在苗期和蒴果期时多糖含量显著高于油麦菜,打顶期和开花期时含量低于油麦菜但差异不显著。
2.4 生育期与菜用黄麻叶总酚、总黄酮、多糖含量的相关性分析
由表4可知,桂麻菜1号的总酚、总黄酮、多糖含量与生育期没有显著的相关性,桂麻菜2号的总酚和多糖含量也与生育期没有显著的相关性,但总黄酮含量与生育期呈显著正相关。因此,可以推断推迟采收有利于桂麻菜2号总黄酮的累积。
表 4 生育期与菜用黄麻叶总酚、总黄酮、多糖含量的相关性分析Table 4. Correlations between growth stages and contents of total phenolics,total flavonoids, and polysaccharides in vegetable jute leaves品种
Varieties因素
Factors生育期
Growth stage总酚
Total phenolics总黄酮
Total flavonoids多糖
Polysaccharides桂麻菜1号
Guimacai No.1生育期 Growth stage 1.000 总酚 Total phenolics 0.576 1.000 总黄酮 Total flavonoids 0.495 −0.410 1.000 多糖 Polysaccharides 0.754 0.622 0.068 1.000 桂麻菜2号
Guimacai No.2生育期 Growth stage 1.000 总酚 Total phenolics 0.596 1.000 总黄酮 Total flavonoids 0.995** 0.520 1.000 多糖 Polysaccharides 0.479 0.719 0.397 1.000 **表示在0.01水平上呈极显著相关。
** indicates extremely significant difference at P<0.01.3. 讨论
总酚、总黄酮、多糖是黄麻的主要次生代谢产物和生物活性成分,具有重要的生理和药理活性[2]。不同作物的总酚、总黄酮、多糖含量存在差异,同一作物不同品种之间含量也存在较大的差异[19−20]。本研究测定了黄麻、山药、秋葵、油麦菜4种作物的总酚、总黄酮、多糖含量,结果显示各作物之间总酚、总黄酮、多糖含量存在差异,同时2个菜用黄麻品种之间的含量也存在差异。
酚类物质是植物的重要次生代谢产物,各类植物在不同的生长期表现出不同的积累规律[21−22]。本研究中2个黄麻品种的总酚含量随生育期的变化呈现先下降后上升的趋势,此结果与陈玉婷等[23]对茶枝柑果渣的研究及李杨昕等[24]对玫瑰香葡萄的研究一致。菜用黄麻在打顶期时叶片总酚含量下降可能是因为打顶期为菜用黄麻快速生长时期植株快速发育导致总酚含量有所下降。本研究中2个菜用黄麻品种不同生育期叶片总酚的含量在2.769~4.064 mg·g−1,均低于Biswas等[15]研究中黄麻叶片的总酚含量,可能是品种差异导致的。本研究中2个菜用黄麻品种的总酚含量均显著高于对照品种,此结果与Velioglu等[25]的研究结果一致。2个菜用黄麻品种打顶期总酚含量最低,但均高于黑木耳和南瓜肉;蒴果期的总酚含量最高,高于黑木耳、平红薯、藕、南瓜肉、白菜、洋葱、芹菜叶等19种市售蔬菜,其中桂麻菜1号蒴果期的总酚含量为黑木耳的1.78倍[26]。
黄酮是植物特有的次生代谢产物,具有抗氧化、抗过敏和预防心血管疾病等功效[27]。不同物种、不同器官(或组织)及生育期均可影响黄酮的积累特性[28]。生长期对植物次生代谢产物黄酮含量有一定的影响,并呈现出不同的变化规律[6]。桂麻菜2号的总黄酮含量随生育期的延长呈现上升的趋势,蒴果期达最大值,此研究结果与郭慧敏等[29]、张以忠等[30]、邱珊莲等[22]、樊卫国等[31]的研究结果一致。总黄酮作为次生代谢产物其合成积累是以叶片成熟为前提,以光合产物为基础[32]。随着桂麻菜2号从幼苗期生长至蒴果期,叶片逐渐成熟,光合作用逐渐加强,从而在蒴果期累积了较多的黄酮类物质,在蒴果期总黄酮含量达最高值。本研究中桂麻菜1号整个生育期叶片的总黄酮含量在1.870~2.745 mg·g−1,均低于Biswas等[15]研究中圆果种黄麻叶片的总黄酮含量,这可能是由遗传因素导致的。桂麻菜2号蒴果期的总黄酮含量为4.755 mg·g−1,高于如苤蓝、葫瓜、苦瓜等18种蔬菜,其含量为苤蓝的33.96倍[33]。
多糖具有广泛的生物活性如抗炎、抗衰老、抗凝血、抗溃疡、抗肿瘤及促进免疫等[34−35]。不同作物不同生育期多糖含量的变化不同[36],本研究中桂麻菜1号的多糖含量整体呈现上升的趋势,此结果与史冠莹等[6]的研究结果一致;桂麻菜2号的多糖含量呈现先下降后上升趋势,其结果与马蕊等[37]、陈凌等[38]的研究相一致。本研究中2个菜用黄麻品种苗期的多糖含量分别为0.441%和0.717%均低于英德深红皮和中黄麻4号[16];2个菜用黄麻品种不同生育期的多糖含量在0.240%~3.175%,仅桂麻菜1号蒴果期的多糖含量高于闽麻菜1号,可能是因为品种差异和生物遗传多样性导致的[34]。
4. 结论
同一生育期2个菜用黄麻品种的总酚、总黄酮和多糖含量存在差异;随着生育期的延长,2个菜用黄麻品种的总酚含量呈现先下降后上升的趋势;桂麻菜1号的总黄酮含量呈现先上升后下降的趋势,多糖含量呈现波动上升的趋势;桂麻菜2号的总黄酮含量呈现上升的趋势,多糖含量呈现先下降后上升的趋势。2个菜用黄麻品种总酚和总黄酮含量均显著高于对照品种,秋葵和山药的多糖含量均显著高于2个菜用黄麻品种。蒴果期更有利于菜用黄麻总酚、总黄酮和多糖的积累。
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图 1 水稻产量因子Gn1a、 GS3基因相关标记对紫两优737及其亲本的检测结果
A:Gn1a-M1。M:20bp DNA Marker;1:明恢63;2:宜优673;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。B: GS3-PstⅠ,原始扩增产物(左)和酶切产物(右)。M:100 bp DNA Marker; 1:珍汕97,2:明恢63,3:紫392S,4:福恢737;5:紫两优737。
Figure 1. Detection of Ziliangyou 737 and its parents with markers for rice yield components Gn1a and GS3
A: Gn1a-M1. M: 20bp DNA Marker; 1: Minghui 63; 2: Yiyou 673; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. B: GS3-PstⅠ, original amplified products(left) and enzyme digestion products (right). M: 100 bp DNA Marker; 1: Zhengshan 97; 2: Minghui 63; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737.
图 2 水稻Hd3a、 Hd1基因相关标记对紫两优737及其亲本的检测结果
A: hd3afnp。M:100 bp DNA Marker;1:日本晴;2:Kasalath;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。B:Si9337。M:20 bp DNA Marker;1:日本晴;2:9311;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。
Figure 2. Detection of Ziliangyou 737 and its parents with markers for Hd3a and Hd1
A: hd3afnp. M: 100 bp DNA Marker; 1: Nipponbare; 2: Kasalath; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. B: Si9337. M: 20 bp DNA Marker; 1: Nipponbare; 2: 9311; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737.
图 3 糯稻蜡质基因相关标记对紫两优737及其亲本的检测结果
A:We 2-2。M:20 bp DNA Marker;1:荆糯6;2:9311;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。B:Wx-t1。M:20 bp DNA Marker;1:荆糯6;2:9311;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。C:484/W2R,原始扩增产物(左)和酶切产物(右);M:100 bp DNA Marker;1:9311;2:明恢63;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。D:PCR-AccⅠ,原始扩增产物(左)和酶切产物(右);M:100 bp DNA Marker;1:9311;2:明恢63;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。
Figure 3. Detection of Ziliangyou 737 and its parents with markers for wx
A: We 2-2. M: 20 bp DNA Marker; 1: Jingnuo 6; 2: 9311; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. B: Wx-t1. M: 20 bp DNA Marker; 1: Jingnuo 6; 2: 9311; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. C: 484/W2R, original amplified products (left) and enzyme digestion products (right); M: 100 bp DNA Marker; 1: 9311; 2: Minghui 63; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. D: PCR-AccⅠ, original amplified products (left) and enzyme digestion products (right); M: 100 bp DNA Marker; 1: 9311; 2: Minghui 63; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737.
图 4 水稻淀粉合成相关基因、紫色种皮基因Pb相关标记对紫两优737及其亲本的检测结果
A:Sbe1。M:100 bp DNA Marker。1:9311;2:明恢63;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。B:AGPlar M1。M:20 bp DNA Marker;1:珍汕97B;2:9311;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。C:PUL M2。M:20 bp DNA Marker;1:9311;2:宜优673;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。D:RS/SpeⅠ,原始扩增产物(左)和酶切产物(右)。M:100 bp DNA Marker;1:密阳23;2:宜优673;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。E:CAPSPb,原始扩增产物(左)和酶切产物(右)。M:100 bp DNA Marker;1:日本晴; 2:9311;3:紫392S;4:福恢737;5:紫两优737。
Figure 4. Detection of Ziliangyou 737 and its parents with markers for starch synthesis-related genes and Pb gene
A: Sbe1. M: 100 bp DNA Marker. 1: 9311; 2: Minghui 63; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. B: AGPlar M1. M: 20 bp DNA Marker; 1: Zhenshan 97B; 2: 9311; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. C: PUL M2. M: 20 bp DNA Marker; 1: 9311; 2: Yiyou 673; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. D: RS/SpeⅠ, original amplified products (left) and enzyme digestion products (right). M: 100 bp DNA Marker; 1: Miyang 23; 2: Yiyou 673; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737. E: CAPSPb, original amplified products (left) and enzyme digestion products (right). M: 100 bp DNA Marker; 1: Nipponbare; 2: 9311; 3: Zi 392S; 4: Fuhui 737; 5: Ziliangyou 737.
表 1 检测10个基因的相关标记信息
Table 1 Markers’ information for 10 genes
基因
Gene标记
Marker引物序列
Primer sequence (5′-3′)退火温度
Annealing temperature/℃等位基因参照
Allele referenceGn1a Gn1a-M1[21] CTCTTGCTTCATTATCAATC 55 明恢63 Minghui 63 AAACTACACAAGAATCTGCT GS3 GS3-PstⅠ[21]
(限制性内切酶 Restriction enzyme:PstⅠ)TATTTATTGGCTTGATTTCCTGTG 55 珍汕97 Zhenshan 97,明恢63 Minghui 63 GCTGGTTTTTTACTTTCATTTGCC Hd3a hd3afnp inner[22] AGCGGCAGGAGaGTCTACAA 62 日本晴 Nipponbare, Kasalath TCaGGATCATCGTTAGCTAGGG hd3afnp outer AAtCGAGGGGAGTATATTGCTAGT GCTaCATGAGAGACCTTAGCCTT Hd1 Si9337[23] AGATGTCCCTTCACTTCAGC 60 9311,日本晴 Nipponbare CGAAACGGCCCTTGATCC wx We 2-2[24] CACTACAAGACACACTTGCAC 55 荆糯6 Jingnuo 6, 9311 GTCATCTAGCCCACCACCTT Wx-t1[25] ATGTCGGCTCTCACCACG 55 荆糯6 Jingnuo 6, 9311 ACCGACCGCTGCTGCTTG 484/W2R[26]
(限制性内切酶 Restriction enzyme:AccⅠ)CTTTGTCTATCTCAAGACAC 55 9311,明恢63 Minghui 63 TTTCCAGCCCAACACCTTAC PCR- AccⅠ [27]
(限制性内切酶 Restriction enzyme:AccⅠ)GCTTCACTTCTCTGCTTGTG 55 日本晴Nipponbare, 明恢63 Minghui 63 ATGATTTAACGAGAGTTGAA Sbe1 Sbe1[28] GAGTTGAGTTGCGTCAGATC 57 9311,日本晴 Nipponbare AATGAGGTTGCTTGCTGCTG sbe3-rs RS/SpeⅠ[29]
(限制性内切酶 Restriction enzyme:SpeⅠ)ATGTGATGTGCTGGATTTGG 55 密阳 23 Miyang 23,宜优673 Yiyou 673 TGTGGTTTTCATACCGTTCTTA AGPlar AGPlar M1[30] CGTTCAGGTTCAGGCAATCA 58 珍汕97 Zhenshan 97, 9311 GGAAGGGTGGTGATGTGGAG PUL PUL M2[30] GACAACCGTCCGCTTTAGTTTC 58 9311, 宜优673 Yiyou 673 GCATTTGAGAGGGTTTGGATTC Pb CAPSPb [31]
(限制性内切酶 Restriction enzyme:BamHⅠ)AAATCAGTTGTCCCGTCCA 58 9311,日本晴 Nipponbare TTAGGGAGTTGGTGATGGG 表 2 紫两优737在云南、福建和安徽区域试验产量表现[1,20]
Table 2 Yield performance of Ziliangyou 737 in regional trails in Yunnan, Fujian and Anhui
试验类型
Type of test品种
Varieties平均产量
Average Yield/(kg·hm−2)比对照增减产
Ratio compared with CK/%云南区试 Reginal trial in Yunnan 紫两优737 Ziliangyou 737 7566.90 152.1.0 癸能紫米 Guinengzimi(CK) 3002.10 福建区试 Reginal trial in Fujian 紫两优737 Ziliangyou 737 7505.48 −3.82 宜优673 Yiyou 673(CK) 7804.07 安徽区试 Reginal trial in Anhui 紫两优737 Ziliangyou 737 8441.63 −0.16 Ⅱ优838(CK) 8456.55 表 3 紫两优737在云南、福建区域试验稻米品质[1]
Table 3 Rice quality of Ziliangyou 737 in regional trails in Yunnan and Fujian
类别 Types 糙米率
Brown rice percentage/%精米率
Head rice percentage/%整精米率
Head rice percentage/%粒长
Grain length/mm长宽比 Ratio of grain length to width 直链淀粉 Amylase content/% 碱消值 Alkali value 胶稠度
Gel consistency/mm云南区试Regional trial in Yunnan 78.4 69.4 55.3 6.3 2.7 2.6 7.0 90 福建区试 Reginal trial of in Fujian 79.3 68.5 65.1 6.4 2.9 2.1 7.0 97 -
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