伊藤杂种茎叶化学成分及其综合抗氧化能力

陈友锋; 佟宁宁; 彭丽平; 江莉娜; 刘燕; 刘政安

doi:10.19303/j.issn.1008-0384.2023.08.007

伊藤杂种茎叶化学成分及其综合抗氧化能力

陈友锋^{1, 2,},
佟宁宁²,
彭丽平²,
江莉娜^{2, 3},
刘燕^1, ,,
刘政安²

1.
花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室/国家花卉工程技术研究中心/城乡生态环境北京实验室/林木花卉遗传育种教育部重点实验室/北京林业大学园林学院，北京　100083
2.
中国科学院植物研究所北方资源植物重点实验室/国家植物园，北京　100093
3.
湖南农业大学园艺学院，湖南　长沙　410128

基金项目: 中国科学院战略性科技先导科技专项子课题（XDA23080601）

详细信息

作者简介:
陈友锋（1996 —），男，硕士研究生，主要从事园林植物应用与园林生态研究，E-mail：1466391910@qq.com

通讯作者:
刘燕（1963 —），女，博士，教授，主要从事园林植物应用与园林生态研究，E-mail：chblyan@163.com；刘政安（1963 —），男，博士，研究员，主要从事资源植物收集、评价及利用研究，E-mail：liuzhengan@ibcas.ac.cn

中图分类号: S682
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出版历程
- 收稿日期: 2023-02-16
- 修回日期: 2023-06-01
- 网络出版日期: 2023-09-18
- 刊出日期: 2023-08-27

Chemical Composition and Antioxidant Activity in Stems and Leaves of Paeonia Intersubgeneric Hybrids

1.
Beijing Key Laboratory of Ornamental Plants Germplasm Innovation & Molecular Breeding/National Engineering Research Center for Floriculture/Beijing Laboratory of Urban and Rural Ecological Environment/Key Laboratory of Genetics and Breeding in Forest Trees and Ornamental Plants of Ministry of Education College of Landscape Architecture, Beijing Forestry University, Beijing　100083, China
2.
Key Laboratory of Plant Resources/China National Botanical Garden, Institute of Botany, Chinese Academy of Sciences, Beijing　100093, China
3.
College of Horticulture, Hunan Agricultural University, Changsha, Hunan　410128, China

摘要

摘要:
目的探究芍药属亚属间杂种（伊藤杂种）的茎叶药用价值。
方法利用高效液相色谱-二极管阵列检测（HPLC-DAD）与高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱技术（HPLC-Q-TOF-MS）对16个伊藤杂种茎、叶的次生代谢物进行定性、定量分析，并对其总酚含量和体外抗氧化活性进行测定。
结果在16个伊藤杂种茎叶中共检测到19种次生代谢物，分别属于单萜苷类（5种）、黄酮类（6种）、单宁类（4种）、酚类（4种）。16个伊藤杂种茎叶中的代谢物成分基本相同；除酚类外，叶中其他3类代谢物和总代谢物含量均显著高于茎。16个伊藤杂种叶的抗氧化能力均显著高于茎；5个品种叶中的芍药苷含量高于药典规定的最低标准（18 mg·g⁻¹）。聚类分析结果显示，16个品种被聚为3类，其中第3类群包含2个品种，特点为叶中除单萜苷类含量中等外，各项指标均最高。
结论伊藤杂种的茎叶具有潜在的药用价值，筛选出2个具有药用植物潜力的伊藤杂种Unique和Lollipop。
- 芍药属 /
- 亚属间杂交种 /
- 药用成分 /
- 抗氧化能力 /
- 芍药苷
Abstract:
Objective Pharmaceutical property of the stems and leaves of Paeonia intersubgeneric hybrids (PIHs) was evaluated.
Method Secondary metabolites in 16 PIHs were extracted from the stems and leaves and analyzed by the high-performance liquid chromatography with a diode array detector (HPLC-DAD) and the high-performance liquid chromatography quadrupole time-of-fight mass spectrometry (HPLC-Q-TOF-MS). Total phenolic content and in vitro antioxidant activity of the extract were measured.
Results (1) Nineteen metabolites were identified from the extracts that included 5 monoterpene glycosides, 6 flavonoids, 4 tannins, and 4 phenols. (2) The compositions of all tested hybrids were essentially identical. (3) Except for phenols, the content of individual group or total amount of compounds in the 3 groups were significantly higher in the leaves than in the stems. (4) The in vitro antioxidant activity was tested significantly greater in the leaves than in the stems as well. (5) The contents of paeoniflorin in the leaves of 5 varieties were above the minimum 18 mg·g⁻¹ as stipulated by the pharmacopoeia. (6) A cluster analysis grouped the 16 cultivars into 3 categories with one that contained two varieties, which scored the highest on all indicators except being moderate on monoterpene glycosides.
Conclusion The stems and leaves of “Unique” and “Lollipop” in the 16 tested PIHs appeared to have pharmaceutical values.
- Paeonia /
- intersubgeneric hybrids /
- functional ingredient /
- antioxidant activity /
- paeoniflorin

HTML全文

当前,相场法已成为模拟凝固组织、界面形貌的重要方法^[1]。相场法^[2] 的理论基础是金兹堡-朗道相变理论，系统的模拟二元系统的相变微观结构，研究了等温结晶过程中界面厚度对冰晶生长的扩散、有序化势以及热力学驱动力的综合作用，这是一种通过该理论的微分方程来反映的一种计算方法。近年来，国内外研究者利用相场法模拟凝固微观组织经历了从二维→三维^[3-4]、二元合金→多元合金^[5]、单晶粒→多晶粒^[6-8]、自由枝晶→定向凝固^[9-10]、单相场→多相场^[11]、无流场→包含流场^[12-16]逐步深入的发展历程，从而对凝固过程进行真实的模拟^[17]。一般情况下，凝固体微观组织的形成取决于溶质扩散、界面曲率与热扩散^{[1, 18]}。迄今关于利用相场法模拟在果汁冷冻浓缩过程中的冰晶生长情况的相关研究较少，目前仍处于初步摸索的阶段^[19-20]，亟待进行深入研究。

如今，研究果汁冷冻浓缩尚未构建冰晶生长特征的数学物理模型^[21-22]，还是主要以实验为基础，冰晶夹带的影响因素主要有溶液浓度、降温速率、结晶时间等^[23-25]，另外，还包括处于非平衡态热力学条件下的动力学规律^{[18, 26]}。根据目前已有研究结果表明，研究者何立群等^[27] 提出：异相成核后，研究呈现分形生长的冰晶形态结构和冰晶的演变过程，并基于分形的相关理论，对水分子的结晶能力与降温的速率、溶液的浓度之间的关系进行分析。陈梅英等^{[19-20, 28-29]}首次把相场模型引入食品领域，对冷冻浓缩过程冰晶生长机制进行初步探索，理论分析了冷冻浓缩过冷时间、过冷度等对冰晶生长的影响。

按理界面厚度应取其真实值，但在相场法模拟中需要一个能计算的界面厚度。本研究基于Kim S G等提出的KKS相场模型^[26]，结合Allen^[30]提出的弥散型界面厚度的定义，探寻能反映真实情况且提高计算效率的界面厚度取值，将果汁的多元成分视为水和溶质二元系统，对二元系统冷冻浓缩等温结晶过程进行相场法模拟，分析冰晶生长过程中界面厚度与冰晶形貌和溶质分布之间的关系。

1. 建立冰晶生长的相场模型

1.1 相场法的控制方程

冰晶生长相场模型以自由能减小原理为基础，基于kim S G等^[26]提出的KKS相场模型，并结合近似稀溶液时的基础方程，从而建立了果汁在冷冻浓缩过程中，冰晶生长的相场模拟模型。相场和溶质场方程采用自由能密度形式的相场法分别推导出。自由能密度的定义是：利用固相与液相的自由能密度，分别乘以各自的分数，之后再加上剩余自由能的和，可将其表示为：

$f\left( c,\phi \right)=h\left( \phi \right){{f}^{S}}\left( {{c}_{S}} \right)+\left[ 1-h\left( \phi \right) \right]{{f}^{L}}({{c}_{L}})+Wg\left( \phi \right)~$

(1)

式(1)中： f为自由能密度，J·m^-2；f^S 表示固相，J·m^-2；f^L表示液相，J·m^-2；且其固相分数为 h(ø)，h(ø)=ø³(6ø²-15ø+10)，液相分数为1-h(ø)；c为溶质浓度；ø为相场变量，ø=-1或0时为液相，ø=1时为固相，在液-固的界面上，ø值在-1～1或0～1的范围内发生连续的变化；Wg(ø)表示剩余自由能，其中，W是相场参数，g(ø)是剩余自由能函数，g(ø)=ø²(1-ø)²。可将相场方程表示为：

$\frac{\partial t}{\partial t}\phi t=M\left[ {{\varepsilon }^{2}}{{\nabla }^{2}}\phi -f\left( \phi \right) \right]~$

(2)

式(2)中：M为相场迁移率参数[式(9)]； f(ø)是自由能密度对相场ø的一阶导数；ε为与界面能有关的相场参数。当利用稀溶液来近似时，则表达式为：

$f\left( \phi \right)=\frac{RT}{{{V}_{m}}}h\prime (\phi )ln\frac{\left( 1-{{c}^{e}}_{S} \right)\left( 1-{{c}_{L}} \right)}{\left( 1-{{c}^{e}}_{L} \right)\left( 1-{{c}_{S}} \right)}+Wg\prime (\phi )$

(3)

式(3)中： R表示气体常数，R的值为8.31 J·kmol^-1；T表示温度,K；V_m表示摩尔体积,L·mol^-1；c^e表示平衡浓度；下标L和S分别表示液相和固相； h′(ø)为h(ø)的导函数，h′(ø)=30ø²(1-ø)²； g′(ø)为 g(ø)的导函数，g′(ø)=2ø(1-ø)(1-2ø)。

1.2 溶质场扩散方程

采用自由能密度的形式，可以将溶质场的扩散方程，改写表示为：

$\frac{\partial c}{\partial t}=\nabla (\frac{D\left( \phi \right)}{{{f}_{cc}}}\nabla {{f}_{c}})+\frac{D\left( \phi \right)}{{{f}_{cc}}}\nabla \cdot \nabla f$

(4)

式(4)中：D(ø) 表示溶质扩散率；f_c 表示自由能对浓度的一阶导数；f_cc表示自由能对浓度的二阶导数。界面区域的溶质浓度c，是指固、液相的摩尔分数之和，在固相和液相达到平衡时，在界面区域中，任意一点的固相和液相的化学势相等，即：

$c=h\left( \phi \right){{c}_{S}}\left[ 1-h\left( \phi \right) \right]{{c}_{L}}~$

(5)

${{\mu }^{S}}[{{c}_{S}}\left( x,t \right)]={{\mu }^{L}}[{{c}_{L}}\left( x,t \right)]$

(6)

式(6)中μ^L和μ^S分别为液相和固相的化学势。

1.3 加入扰动

计算时，在界面处施加微小的扰动也会影响真实的枝晶形貌，在相场方程中加入人为的随机扰动：

$f\left( \frac{\partial \phi }{\partial t} \right)=\frac{\partial \phi }{\partial t}+16g\left( \phi \right)\chi \bar{w}$

(7)

式中χ在-1到1之间随机取值， $\bar{w}$ 是与时间相关的相扰动强度因子，16g(ø)用以控制在固液界面中出现扰动，最大扰动可能出现在ø=0.5处，若远离界面则扰动迅速减小。

2. 确定相场参数及模拟计算

2.1 参数的确定

相场参数ε和W与界面厚度及界面能都有关系，相场迁移率参数M则与界面动力学系数有关，它们可以表示为：

$\varepsilon =\sqrt{\frac{6\lambda }{2.2}\sigma },W=\frac{6.6\sigma }{\lambda }$

(8)

${{M}^{-1}}={{\varepsilon }^{2}}\sigma \cdot \frac{RT}{{{V}_{m}}}\cdot \frac{1-{{k}^{e}}}{{{\mu }^{k}}~{{m}^{e}}}$

(9)

式(8)和(9)中：σ表示固液两相的界面能，J·m^-2；R表示气体常数；T表示温度；V_m表示摩尔体积；k^e表示平衡常数；μ^k表示动力系数；m^e表示液相线斜率；ε表示与界面能有关的参数,λ表示界面厚度，μm。

2.2 物性参数的取值

从已有的研究^[31-34]得知，冰晶结构在一般情况下，均表现为密排的六方结构。模拟冰晶结构各向异性模数k的取值为6。当控制其他相关的物性参数取值不发生改变时，只改变界面厚度λ，观察及分析界面厚度对冰晶形貌的影响。选用质量分数为9.6%的糖水溶液视为水和溶质二元系统，将其作为研究对象。在进行计算时，所使用的物性参数，具体如表 1所示。

表 1 蔗糖水溶液的物性参数

Table 1. Average parameters of sucrose solution

物性参数	取值
界面能σ/(J·m^-2)	0.0765
固相溶质扩散系数D_S/(m²·s^-1)	2.5×10^-11
液相溶质扩散系数D_L/(m²·s^-1)	5.6×10^-10
凝固潜热L_m /(kJ·kg^-1)	334.4
熔点温度T_m /K	273.15
液相线斜率m^e	1808^*^[35]
平衡常数k^e	0.075
注：表中数据参照文献^[35]计算得到。

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2.3 数值计算

(1) 边界条件与初始条件。当计算界面区域的边界时，相场与溶质场的边界条件都取绝热边界条件。r表示初始晶核半径，则

$\left\{ \begin{matrix} {{x}^{2}}+{{y}^{2}}\le {{r}^{2}},\phi =1,T={{T}_{m}}-\Delta T \\ {{x}^{2}}+{{y}^{2}}>{{r}^{2}},\phi =0,T={{T}_{m}}-\Delta T \\ \end{matrix}~ \right.$

(10)

式(10)中： x是模拟中的横坐标；y是模拟中的纵坐标；T表示有量纲温度，T_m表示模拟的初始温度，ΔT表示过冷度。

(2) 数值计算方法。相场方程利用显示有限差分求解，时间步长Δt受到溶质场计算的限制，即Δt ＜(Δx)²/4D_L，D_L 表示液相中的溶质扩散系数，取值为：Δt=1.5×10^-9s。晶体轴生长主轴与直角坐标系的x轴和y轴相对应。模拟计算网格数为1400×1400，空间步长为5×10^-8m，初始晶核为半径r=10个网格数的球。

3. 模拟结果与分析

在相变过程中,固体与液体之间存在明显分界面。将固液界面厚度扩大至可计算的尺度，在不同的界面厚度下利用相场法进行模拟，研究界面厚度这个因素对冰晶形貌与其冰晶溶质分布的影响情况，这样就能获得稳定的界面推进速度。

3.1 界面厚度对冰晶形貌的影响

图 1所示为不同界面厚度下的冰晶生长形貌。当λ=1.5dx时，晶粒形貌呈现等轴枝晶形貌，且二次分支不明显；随着界面厚度的增加，当λ=3dx时随着界面厚度的增加，晶粒开始出现分支，二次分支更加发达；当λ=4dx时枝晶的主干变细，二次枝晶生长发达，枝晶整体形貌呈六边形生长。当λ=4.5dx及λ=5dx时，界面厚度进一步增大，主轴枝晶变得更细，部分主轴枝晶消失，枝晶整体形貌呈球形。这是因为扰动对枝晶的影响存在一定的范围。在扰动的影响范围内，当界面厚度较小的时候，受到扰动的影响较小，二次枝晶不明显；随着界面厚度的增大，扰动的影响随之增大，晶体的界面前沿不稳定，二次枝晶开始产生，并随着界面厚度的增加愈加发达。当界面厚度增大到一定程度时，能有效地限制扰动的对晶粒的影响减弱，二次枝晶减少最终晶粒没有二次枝晶的产生，如图 1-d、e。这种现象分别与于艳梅^[36]、王智平^[37]等模拟的结果相吻合。

图 1 界面厚度λ对冰晶形貌的影响

注：(a)λ=1.5dx；(b)λ=3dx；(c)λ=4dx；(d)λ=4.5dx；(e)λ=5dx。图 2同。

Figure 1. Influence of interfacial thickness on ice crystal pattern

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3.2 界面厚度对冰晶溶质分布的影响

图 2 显示了不同界面厚度条件下的溶质分布情况,图 1和图 2对比可知相场和溶质场相吻合。从述两幅图中可以发现，枝晶的固相中夹带着部分的溶质，凝固界面的溶质浓度比周围环境低，且枝晶前沿富集了大量的溶质。这是溶质扩散的过程。一方面水分子和溶质分子都在不断运动中，水分子之间容易形成氢键而结晶，同时溶质分子与水分子相互作用，造成了夹带；另外一方面，在结晶过程中，水结成冰是一个膨胀的过程，因为冰晶生长的速率大于溶质扩散的速率，所以在溶质来不及充分扩散之前，冰晶内的浓缩溶质会被迅速挤向尖端，从而在枝晶前端富集，形成一股流行尖端的溶质流。由图 2可以发现，随着界面厚度的逐渐增大，枝晶的生长速率逐渐加快，而枝晶尖端半径则逐渐减小。同时，从方程(9)可以看出，随着界面厚度取值的增大，界面的迁移速率减小，溶质的扩散较为充分，溶质梯度较少，枝晶生长凝固时间越短，所以生长速度越快。所以，方程(9)的理论结果与相场模拟结果吻合。

图 2 界面厚度λ对冰晶溶质分布的影响

Figure 2. Influence of interfacial thickness on distribution of solute field

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由图 1和图 2可知，当界面厚度取值过大时，枝晶生长形貌变异。所以采用相场法模拟冰晶的生长时，界面厚度取值应在3dx左右，这样不仅可以得到较可靠的冰晶生长形貌，又可以提高计算机的模拟效率。

4. 讨论与结论

将果汁视作水和溶质的二元系统，利用相场法模拟二元系统冷冻浓缩过程中的冰晶生长情况，探讨界面厚度对冰晶形貌的影响。界面厚度对晶粒的形貌有正负影响，当界面厚度尺度达到一定取值时，其数值误差随之被放大，从而在界面处形成误差噪音，误差噪音在界面上形成明显的扰动，使计算得到的冰晶形态发生变化。在扰动干扰的范围内，随着界面厚度的增大,二次枝晶越来越发达，枝晶尖端也尖锐；在扰动干扰范围外，晶粒不产生二次枝晶，同时主轴枝晶变细，部分主轴枝晶消失。由于误差噪音的性质难以描述，故利用相场法模拟冰晶生长时，界面厚度大小应有适当的取值，从而达到有效控制误差噪音。

相场和溶质场相吻合，溶质分布情况随着界面厚度发生变化。随着界面厚度取值越大，界面的迁移速率越小，导致溶质的扩散速度与冰晶的生长速度相差较小，溶质扩散有相对足够的时间，避免大量溶质聚集在固-液界面前沿，削弱了界面前沿出现溶质截留现象。因此溶质的扩散较为充分，溶度梯度较少，枝晶生长凝固时间越短，所以生长速度越快。

晶粒生长速率和枝晶尖端半径受界面厚度取值的影响，界面厚度取值越大，晶粒生长速率越快，而枝晶尖端半径减小。刚开始，晶粒生长速度呈指数上升，且随着界面厚度取值的增大而迅速上升。这是由于开始结晶的时候伴随着能量起伏波动，从而影响初始速度，界面厚度较小的时候，扰动对其的影响较少，在扰动干扰的范围内，随着界面厚度的增大，二次枝晶越来越发达，枝晶尖端半径减小。因此界面厚度的取值应在3 dx左右，较能真实反映晶粒的生长形貌；界面厚度取值不恰当，将使冰晶形貌发生变异，也会受到误差噪音的影响。

在果汁冷冻浓缩过程中，忽略冰晶结晶时释放的潜热，本研究采用相场法对冰晶生长进行等温模拟，但模拟的结果很大程度上受到参数取值的影响。今后将继续在探讨热扩散率、初始晶核半径等其他他相关参数取值方面努力，以取得更优的模拟结果。

图 1 代表性伊藤杂种茎叶成分HPLC图谱 (254 nm)

1：去苯甲酰芍药苷；2：没食子酰己糖；3：没食子酸；4：氧化芍药苷；5：没食子酸甲酯；6：二没食子酸；7：木犀草素二己糖苷；8：芍药苷；9：四没食子酰己糖；10：槲皮素；11：木犀草素己糖苷；12：1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖；13：没食子酸二甲酯；14：没食子酰芍药苷；15：芹菜素二己糖苷；16：芹菜素己糖苷；17：六没食子酰己糖；18：木犀草素己糖醛酸苷；19：苯甲酰氧化芍药苷。(A) 伊藤杂种 Garden Treasure 的茎 (B) 伊藤杂种Garden Treasure 的叶。

Figure 1. HPLC 254 nm chromatograms of typical compounds in stems

1: Debenzoyl-paeonifforin; 2: Galloyl-hexose; 3: Gallic acid; 4: Oxypaeonifforin; 5: Methyl gallate; 6: Digallic acid; 7: Luteolin-dihexoside; 8: Paeonifforin; 9: Tetra-galloyl-hexose; 10: Quercetin; 11: Luteolin-hexoside; 12: Penta-galloyl-glucose; 13: Methyl digallate; 14: Galloyl-paeonifforin; 15: Apigenin-dihexoside; 16: Apigenin-hexoside; 17: Hexa-galloyl-hexose; 18: Luteolin-hexuronide; 19: Benzoyl-oxypaeonifforin. (A) and leaves (B) of PIH “Garden Treasure”.

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图 2 16个伊藤杂种茎（A）、叶（B）中4类代谢物和总量

A：茎； B：叶。不同小写字母代表茎与叶之间差异显著（P＜ 0.05）。

Figure 2. 4 Categories of and total metabolites in stems (A) and leaves (B) of 16 PIHs

A: stems; B: Different lowercase letters represent significant differences between stems and leaves (P<0.05).

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图 3 16个伊藤杂种茎、叶中芍药苷的含量

不同小写字母代表同一部位不同品种间有显著性差异 (P＜0.05)。

Figure 3. Contents of paeoniflorin in stems and leaves of 16 PIHs

Different lowercase letters indicate significant differences in the same part between different cultivars at P＜0.05.

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图 4 16个伊藤杂种茎叶总酚含量

图中茎叶间小写字母表示差异显著异 ( P＜0.05)。

Figure 4. Distribution and ranges of total phenolic in stems and leaves of 16 PIHs

The lowercase letters between stems and leaves in the figure indicate significant differences（P＜0.05）.

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图 5 16个伊藤杂种茎叶总酚含量与抗氧化活性的相关性分析

Figure 5. Correlation between TPC and DPPH, ABTS, and FRAP

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图 6 16个伊藤杂种基于叶中代谢物及抗氧化能力的聚类分析

Figure 6. Cluster maps based on metabolites and their antioxidant activities in leaves of 16 PIHs

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图 7 3组间不同类别代谢物及抗氧化能力差异

不同小写字母代表不同类群间有显著性差异 (P＜0.05)

Figure 7. Variations in metabolites and among antioxidant activities three clusters

Different lowercase letters indicate significant differences in different clusters at P＜0.05.

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表 1 16个伊藤杂种品种名录

Table 1 Sixteen PIHs

编号 Code	品种名 Cultivar	编号 No.	品种名 Cultivar
P1	Scarlet Heaven	P9	First Arrival
P2	Sonoma Sun	P10	Callie's Memory
P3	Visions of Sugar Plums	P11	Lollipop
P4	Lemon Dream	P12	Bartzella
P5	Yankee Doudle Dandy	P13	Prairie Charm
P6	Hillary	P14	Border Charm
P7	Kopper Kettle	P15	Garden Treasure
P8	Unique	P16	Oriental Gold

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表 2 HPLC梯度洗脱条件

Table 2 HPLC gradient program

时间 Time/min	流动相A Eluent A/%	流动相B Eluent B/%	流速 Flow rate/(mL·min⁻¹)
0	5	95	0.6
4	5	95	0.6
12	14	86	0.6
35	14	86	0.6
46	26	74	0.6
60	26	74	0.6
85	40	60	0.6
86	95	5	0.6
96	95	5	0.6
97	5	95	0.6
110	5	95	0.6

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表 3 伊藤杂种茎叶成分标准品的线性响应

Table 3 Linear relationship between composition and standards of compounds in stems and leaves of PIHs

成分 Compound	回归方程 Regression equation	拟合度 Regression （R²）
芍药苷 Paeoniflorin	y = 3988892.99x−209564.63	0.9993
氧化芍药苷 Oxypaeoniflorin	y = 61595437.91x−763226.02	0.9993
没食子酰芍药苷 Galloyl-paeoniflorin	y = 17881895.64x−169740.93	0.9994
苯甲酰氧化芍药苷 Benzoyl-oxypaeoniflorin	y = 43785733.20x−594224.40	0.9997
槲皮素 Quercetin	y = 105165792.29x−1704829.32	0.9999
没食子酸 Gallic acid	y = 71520130.70x−1356976.83	0.9995
没食子酸甲酯 Methyl gallate	y = 50561017.43x + 287227.39	0.9998
1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖 1,2,3,4,6-Penta-O-galloyl-β-D-glucose	y = 22509909.82x−838629.67	0.9992

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表 4 伊藤杂种茎叶总酚与抗氧化活性标准品的线性响应

Table 4 Linear relationship between in vitro antioxidant activity of standard and total phenolic in stems and leaves of PIHs

指标 Index	回归方程 Regression equation	拟合度 Regression （R²)
总酚 Total phenolic content	y = 2.0065x−0.0046	0.9991
DPPH自由基清除能力 DPPH assay	y = 6.5516x + 0.0497	0.9948
ABTS自由基清除能力 FRAP assay	y = 2.5199x + 0.0137	0.9969
FRAP铁离子还原能力 ABTS assay	y = 4.4112x + 0.2067	0.9983

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表 5 伊藤杂种茎叶次生代谢物鉴定

Table 5 Secondary metabolites identified in extracts of stems and leaves of PIHs

编号 No.	成分 Compound	分子式 Molecular Formula	保留时间 T_R/ min	紫外吸收峰 UV λmax/ nm	观测精确分子量 Observed exact mass/Da	理论精确分子量 Theoretically exact mass/Da	分子量准确度 Mass accuracy	其他离子碎片 Other fragmentions of [M−H]⁻ at low energy/(m/z)
1	去苯甲酰芍药苷 Debenzoyl paeonifforin	C₁₆H₂₃O₁₀	7.682	237.9	375.1293	375.1297	−1.0663	165
2	没食子酰己糖 Galloyl-hexose	C₁₃H₁₅O₁₀	8.548	278.1	331.0680	331.0665	4.5308	169
3	没食子酸 Gallic acid	C₇H₆O₅	11.909	271.0	169.0159	169.0143	9.4667	125
4	氧化芍药苷 Oxypaeonifforin	C₂₃H₂₇O₁₂	20.973	257.3	495.1501	495.1493	1.6157	137
5	没食子酸甲酯 Methyl gallate	C₈H₈O₅	22.297	271.5	183.0314	183.0299	8.1954	124
6	二没食子酸 Digallic acid	C₁₄H₁₀O₉	22.552	257.3	321.0263	321.0244	5.9186	169, 125
7	木犀草素二己糖苷 Luteolin dihexoside	C₂₇H₃₀O₁₆	26.168	230.1	609.1455	609.1456	−0.1642	446, 285
8	芍药苷 Paeonifforin	C₂₃H₂₈O₁₁	30.394	238.3	479.1548	479.1614	−13.7741	165, 121
9	四没食子酰己糖 Tetra-galloyl-hexose	C₃₄H₂₈O₂₂	45.240	277.4	787.1006	787.1008	−0.2541	617, 169
10	槲皮素 Quercetin	C₁₅H₁₀O₇	49.745	253.2, 366.8	301.0006	301.0019	−4.3189	145
11	木犀草素己糖苷 Luteolin-hexoside	C₂₁H₂₀O₁₁	50.203	253.7	447.0934	447.0957	−5.1443	285
12	1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖 Penta-galloyl-glucose	C₄₁H₃₂O₂₆	50.408	278.6	939.1198	939.1126	7.6668	769, 617
13	没食子酸二甲酯 Methyl digallate	C₁₅H₁₂O₉	51.833	272.7	335.0423	335.0409	4.1786	183, 124
14	没食子酰芍药苷 Galloyl-paeonifforin	C₃₀H₃₂O₁₅	52.800	272.7	631.1658	631.1663	−0.7922	313, 169
15	芹菜素二己糖苷 Apigenin-dihexoside	C₂₇H₃₀O₁₄	53.004	267.9	577.1552	577.1598	−7.9701	269
16	芹菜素己糖苷 Apigenin-hexoside	C₂₁H₂₀O₁₀	54.226	267.9	431.1020	431.1015	1.1598	269
17	六没食子酰己糖 Hexa-galloyl-hexose	C₄₈H₃₆O₃₀	54.841	278.1	1091.1247	1091.1245	0.1833	939, 769
18	木犀草素己糖醛酸苷 Luteolin-hexuronide	C₂₁H₁₈O₁₂	55.448	277.4	461.1125	461.1116	1.9518	285
19	苯甲酰氧化芍药苷 Benzoyl-oxypaeonifforin	C₃₀H₃₂O₁₃	57.342	276.3	599.1111	599.1106	0.8346	447, 313

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表 6 16个伊藤杂种茎叶抗氧化活性

Table 6 Antioxidant activities of stems and leaves of 16 PIHs

编号 Code	DPPH自由基清除能力 DPPH assay/(mg·g⁻¹)		ABTS自由基清除能力 ABTS assay/(mg·g⁻¹)		FRAP铁离子还原能力 FRAP assay/(mg·g⁻¹)
编号 Code	茎 Stem	叶 Leaf	茎 Stem	叶 Leaf	茎 Stem	叶 Leaf
P1	9.63±0.08 ab	38.11±0.28 a	30.13±2.01 b	61.19±6.39 bc	4.90±0.10 ab	16.80±0.32 cdefgh
P2	9.60±0.05 ab	38.37±0.29 a	19.00±3.12 e	81.30±0.35 a	4.53±0.05 b	16.76±0.40 defgh
P3	9.62±0.08 ab	37.37±1.17 a	18.72±2.78 e	50.27±4.43 de	4.70±0.09 ab	16.89±0.40 bcdefg
P4	9.64±0.04 ab	38.22±0.12 a	18.57±2.06 e	46.85±4.52 ef	4.69±0.21 ab	17.22±0.20 abcd
P5	9.63±0.07 ab	38.30±0.17 a	26.51±1.54 bc	57.04±3.89 bcd	4.78±0.09 ab	17.39±0.10 abc
P6	9.63±0.03 ab	38.18±0.16 a	18.00±2.61 e	54.41±2.25 cd	4.56±0.17 b	17.18±0.10 abcde
P7	9.63±0.05 ab	38.25±0.15 a	45.84±0.66 a	62.20±8.59 b	5.07±0.08 a	17.50±0.30 ab
P8	9.60±0.03 ab	38.34±0.11 a	17.49±2.57 e	55.44±3.26 bcd	4.59±0.13 ab	16.98±0.58 abcdef
P9	9.57±0.07 ab	34.44±0.51 c	6.23±0.81 g	31.35±4.00 i	4.43±0.08 b	15.94±0.28 i
P10	9.49±0.25 b	37.81±0.36 a	10.12±2.64 f	42.71±2.16 fg	4.73±0.06 ab	16.56±0.11 efgh
P11	9.60±0.04 ab	38.36±0.12 a	17.08±2.56 e	83.59±3.64 a	4.72±0.03 ab	17.57±0.30 a
P12	9.59±0.03 ab	35.82±0.60 b	18.24±1.03 e	32.92±3.63 hi	4.59±0.04 ab	16.28±0.42 ghi
P13	9.61±0.05 ab	37.15±0.97 a	18.05±0.99 e	30.30±4.31 i	4.85±0.11 ab	16.37±0.39 fghi
P14	9.63±0.06 ab	37.19±0.80 a	19.99±3.11 de	38.73±1.93 gh	4.69±0.02 ab	16.25±0.09 hi
P15	9.66±0.03 a	38.24±0.16 a	23.36±0.78 cd	60.93±2.09 bc	4.72±0.04 ab	17.39±0.33 abc
P16	9.62±0.03 ab	35.53±1.45 b	16.88±3.58 e	31.58±1.91 i	4.72±0.89 ab	15.86±0.47 i
范围 Range	9.49~9.66	34.44~38.37	6.23~45.84	30.30-83.59	4.43~5.07	15.86~17.57
平均值 Average	9.61±0.08	37.48±1.28	20.26±8.77	51.30±16.58	4.71±0.25	16.81±0.61
同列数据无字母或含相同字母者表示差异不显著（P＞0.05），字母完全不同者表示差异显著（P ＜0.05）。 Data with no or same letter indicate no significant difference at P＞0.05; those with different letters indicate significant difference at P＜0.05.

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表 7 16个伊藤杂种茎的APC指数

Table 7 APC indices of stems of 16 PIHs

编号 Code	APC综合指数 APC index/%	排名 Rank	编号 Code	APC综合指数 APC index/%	排名 Ranking
P1	87.35	2	P9	66.75	16
P2	76.72	9	P10	71.19	15
P3	77.77	7	P11	76.60	10
P4	77.62	8	P12	76.59	11
P5	84.01	3	P13	78.25	6
P6	76.36	13	P14	78.64	5
P7	99.91	1	P15	81.38	4
P8	76.06	14	P16	76.54	12

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表 8 16个伊藤杂种叶的APC指数

Table 8 APC indices of leaves of 16 PIHs

编号 Code	APC综合指数 APC index/%	排名 Rank	编号 Code	APC综合指数 APC index/%	排名 Ranking
P1	89.39	5	P9	72.66	16
P2	97.55	2	P10	81.31	11
P3	84.56	9	P11	99.99	1
P4	84.55	10	P12	75.12	14
P5	89.00	6	P13	75.41	13
P6	87.46	8	P14	78.58	12
P7	91.22	3	P15	90.51	4
P8	87.64	7	P16	73.56	15

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参考文献(33)

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施引文献(6)

期刊类型引用(5)

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2.	杨燕，李娜，袁训锋. 速冻保鲜过程中冰晶生长形态研究. 食品与发酵科技. 2020(05): 55-59 . 百度学术
3.	杨燕，袁训锋. 强各向异性冰晶生长对速冻食品品质的影响. 食品与发酵科技. 2019(04): 59-65 . 百度学术
4.	杨燕，景伟强，袁训锋. 过冷度影响冰晶生长的相场法研究. 低温与超导. 2018(09): 67-71+76 . 百度学术
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1. 建立冰晶生长的相场模型
1.1 相场法的控制方程
1.2 溶质场扩散方程
1.3 加入扰动
2. 确定相场参数及模拟计算
2.1 参数的确定
2.2 物性参数的取值
2.3 数值计算
3. 模拟结果与分析
3.1 界面厚度对冰晶形貌的影响
3.2 界面厚度对冰晶溶质分布的影响
4. 讨论与结论

1. 建立冰晶生长的相场模型
1.1 相场法的控制方程
1.2 溶质场扩散方程
1.3 加入扰动
2. 确定相场参数及模拟计算
2.1 参数的确定
2.2 物性参数的取值
2.3 数值计算
3. 模拟结果与分析
3.1 界面厚度对冰晶形貌的影响
3.2 界面厚度对冰晶溶质分布的影响
4. 讨论与结论

参考文献(33)

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伊藤杂种茎叶化学成分及其综合抗氧化能力

作者简介: 陈友锋（1996 —），男，硕士研究生，主要从事园林植物应用与园林生态研究，E-mail：1466391910@qq.com

通讯作者: 刘燕（1963 —），女，博士，教授，主要从事园林植物应用与园林生态研究，E-mail：chblyan@163.com；刘政安（1963 —），男，博士，研究员，主要从事资源植物收集、评价及利用研究，E-mail：liuzhengan@ibcas.ac.cn

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